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猪卵透明带-4蛋白在大肠杆菌中高表达的研究
被引量:
1
1
作者
孙晓溪
徐万祥
+3 位作者
邱德义
熊艳
李大金
谢毅
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第12期660-663,共4页
目的:在大肠杆菌中高水平地直接表达目的蛋白。方法:用PCR方法从猪卵透明带-l(pZP1)cDNA中扩增pZP4目的基因片段,通过在其5'端和3'端引入的双酶切位点将该完整的目的cDNA定向插入pBV221表达质粒PRPL启动因子下游的多克隆...
目的:在大肠杆菌中高水平地直接表达目的蛋白。方法:用PCR方法从猪卵透明带-l(pZP1)cDNA中扩增pZP4目的基因片段,通过在其5'端和3'端引入的双酶切位点将该完整的目的cDNA定向插入pBV221表达质粒PRPL启动因子下游的多克隆区。结果:此重组表达质粒转化宿主工程菌后经热诱导培养,可在SDS-PAGE凝胶上得到特异性的高表达蛋白条带,而且它在 Wistem blot鉴定实验中能被鼠抗pZP4的单克隆抗体17D3和兔抗pZPIgGe识别。结论:成功地在大肠杆菌高效表达了可被17D3单克隆抗体及ZP多克隆抗体识别的ZP4。
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关键词
猪
CDNA
大肠杆菌
基因表达
卵透明带-4蛋白
在线阅读
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职称材料
题名
猪卵透明带-4蛋白在大肠杆菌中高表达的研究
被引量:
1
1
作者
孙晓溪
徐万祥
邱德义
熊艳
李大金
谢毅
机构
复旦大学
附属妇产科
研究所
上海市计划生育
科学
研究所
复旦大学生命科学院遗传研究所国家重点实验室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第12期660-663,共4页
基金
上海市计生委科研基金资助项目
文摘
目的:在大肠杆菌中高水平地直接表达目的蛋白。方法:用PCR方法从猪卵透明带-l(pZP1)cDNA中扩增pZP4目的基因片段,通过在其5'端和3'端引入的双酶切位点将该完整的目的cDNA定向插入pBV221表达质粒PRPL启动因子下游的多克隆区。结果:此重组表达质粒转化宿主工程菌后经热诱导培养,可在SDS-PAGE凝胶上得到特异性的高表达蛋白条带,而且它在 Wistem blot鉴定实验中能被鼠抗pZP4的单克隆抗体17D3和兔抗pZPIgGe识别。结论:成功地在大肠杆菌高效表达了可被17D3单克隆抗体及ZP多克隆抗体识别的ZP4。
关键词
猪
CDNA
大肠杆菌
基因表达
卵透明带-4蛋白
Keywords
Porcine ZP4 cDNA E.coli Gene expression
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪卵透明带-4蛋白在大肠杆菌中高表达的研究
孙晓溪
徐万祥
邱德义
熊艳
李大金
谢毅
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001
1
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