期刊文献+
共找到8篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
弓形虫P30乳酸球菌口服疫苗诱导小鼠的细胞免疫反应及抗体生成的动态过程 被引量:8
1
作者 李文姝 陆惠民 +2 位作者 张惠琴 夏超明 黄伟达 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第2期82-84,共3页
目的 观察弓形虫P30乳酸球菌口服疫苗诱导小鼠产生的细胞免疫效果和抗体IgG的动态发生过程。方法 口服免疫BALB/c小鼠 ,一个月后 ,取鼠脾细胞作ConA刺激淋转试验 (MTT法 )及T细胞亚群的测定 ;不同免疫时间段内 ,收集实验鼠血清 ,ELIS... 目的 观察弓形虫P30乳酸球菌口服疫苗诱导小鼠产生的细胞免疫效果和抗体IgG的动态发生过程。方法 口服免疫BALB/c小鼠 ,一个月后 ,取鼠脾细胞作ConA刺激淋转试验 (MTT法 )及T细胞亚群的测定 ;不同免疫时间段内 ,收集实验鼠血清 ,ELISA法检测抗体水平的变化。结果 P30乳酸球菌口服免疫组脾淋巴细胞ConA刺激后增殖能力比两对照组显著提高 ,CD+ 4 和CD+ 8的百分数均明显升高 ;第 12周 (即最后一次免疫结束一个月 ) ,P30乳酸球菌口服免疫组检测到特异性抗体IgG。结论 P30乳酸球菌口服疫苗有效地激发了小鼠细胞免疫反应 ,特异性抗体IgG在免疫结束一个月后生成明显。 展开更多
关键词 弓形虫 P30乳酸球菌口服疫苗 诱导 小鼠 细胞免疫反应 抗体生成 动态过程
在线阅读 下载PDF
弓形虫昆山分离株P30抗原基因的克隆与表达 被引量:12
2
作者 杨秋林 陆惠民 +1 位作者 闵太善 黄伟达 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第4期27-29,共3页
目的 在大肠杆菌中高效表达P30抗原。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)从弓形虫昆山分离株cDNA文库中扩增得到编码P30抗原的基因 ,经DNA序列分析后导入表达载体pGEX - 5x - 3 ,然后在大肠杆菌BL2 1中进行表达 ,用亲和层析柱纯化表达产物 ... 目的 在大肠杆菌中高效表达P30抗原。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)从弓形虫昆山分离株cDNA文库中扩增得到编码P30抗原的基因 ,经DNA序列分析后导入表达载体pGEX - 5x - 3 ,然后在大肠杆菌BL2 1中进行表达 ,用亲和层析柱纯化表达产物 ,并以SDS -PAGE和Westernblotting进行鉴定。 结果  1、在我们比较的 783个碱基中 ,弓形虫昆山分离株与RH株之间只有两个碱基不同 ;2、得到一分子量为 5 4kDa的融合蛋白 ,占大肠杆菌总蛋白的 38%。结论  1、弓形虫昆山分离株与RH株的P30基因没有大的差异 ;2、在大肠杆菌中得到了P30融合蛋白的高效表达。 展开更多
关键词 弓形虫 P30 PCR 基因表达 克隆
在线阅读 下载PDF
弓形虫GRA6抗原基因的克隆与表达 被引量:5
3
作者 朱翔 丁天 +2 位作者 陆惠民 张惠琴 黄伟达 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第2期50-54,共5页
目的 在大肠杆菌中高效表达弓形虫抗原GRA6。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)从弓形虫昆山分离株和RH株总DNA中分别扩增到编码GRA6的基因 ,经DNA序列分析后导入表达载体PGEX - 5X - 3 ,然后在大肠杆菌BL2 1 -CodonPlus(DE3) -RP中进行表... 目的 在大肠杆菌中高效表达弓形虫抗原GRA6。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)从弓形虫昆山分离株和RH株总DNA中分别扩增到编码GRA6的基因 ,经DNA序列分析后导入表达载体PGEX - 5X - 3 ,然后在大肠杆菌BL2 1 -CodonPlus(DE3) -RP中进行表达 ,以SDS -PAGE和Westenblotting进行鉴定 ,用GST亲和层析柱纯化表达产物。 结果  1 在我们所比较的 336个碱基中 ,弓形虫昆山分离株与RH株之间碱基基本一致。 2 得到一分子量为 49kDa的融合蛋白 ,占大肠杆菌总蛋白的 2 5 55 % ,通过Westenblotting证实 ,该重组抗原能被弓形虫感染的人特异性IgM和IgG血清所识别。 结论  1 弓形虫昆山分离株和RH株的GRA6基因片段几乎完全一致 ;2 在大肠杆菌中得到了高效表达的融合蛋白 ;3 该重组抗原能被弓形虫感染的人特异性IgM和IgG血清所别 。 展开更多
关键词 弓形虫 GRA6抗原基因 克隆 表达 聚合酶链反应
在线阅读 下载PDF
弓形虫RH株ROP1抗原基因的克隆与表达 被引量:6
4
作者 杨秋林 陆惠民 +1 位作者 施宓 黄伟达 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第5期37-40,共4页
目的 在大肠杆菌中高效表达ROP1抗原。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)从弓形虫RH株cDNA文库中扩增得到编码ROP1的基因 ,经DNA序列分析后导入表达载体pGEX - 5x - 3 ,然后在大肠杆菌BL2 1中进行表达 ,用亲和层析柱纯化表达产物 ,并用SDS ... 目的 在大肠杆菌中高效表达ROP1抗原。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)从弓形虫RH株cDNA文库中扩增得到编码ROP1的基因 ,经DNA序列分析后导入表达载体pGEX - 5x - 3 ,然后在大肠杆菌BL2 1中进行表达 ,用亲和层析柱纯化表达产物 ,并用SDS -PAGE和Westernblotting进行鉴定。 结果  ( 1)在我们比较的 12 4 9个碱基中 ,我们得到的ROP1基因在Ossorio报道的基因的 4 4 7位与 4 4 8位之间有一 96bp的插入片段 ,另有 14个碱基不同 ,造成 3个氨基酸的改变 ,两基因之间有 91.19%的同源性 ,( 2 )得到一分子量约为 70kDa的融合蛋白。结论  1,我们获得了一与Ossorio报道的基因有较大差异的rop1基因 (GeneBank登录号 :AF3 5 0 2 61) ( 2 ) ,ROP1基因在大肠杆菌中得到了ROP1融合蛋白的高效表达。 展开更多
关键词 弓形虫 ROP1 PCR 基因表达 基因克隆
在线阅读 下载PDF
人胰腺癌细胞外基质蛋白基因表达的研究 被引量:3
5
作者 龚涌灵 许国铭 黄伟达 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1997年第8期568-571,共4页
胰腺癌组织具有较强的结缔组织反应特性,细胞外基质蛋白(Extracellularmatrixproteins,ECM)诸成分,在RNA和蛋白水平异常表达,具有一定的分子生物学意义。用Northernblotting方法,显示了胰腺组织及其癌变标本中ECM的基因表达(Gen... 胰腺癌组织具有较强的结缔组织反应特性,细胞外基质蛋白(Extracellularmatrixproteins,ECM)诸成分,在RNA和蛋白水平异常表达,具有一定的分子生物学意义。用Northernblotting方法,显示了胰腺组织及其癌变标本中ECM的基因表达(Geneexpression),以证实胰腺癌细胞本身能合成共产生这些细胞间质成分。结果显示:胰腺癌组织与胰腺癌细胞株(PaTu8988、PaTu8902)中均有ECM的基因表达,在RNA水平,Ⅳ型胶原和层粘素LN的表达较显著。正常组织中ECM的基因表达,在RNA水平,纤粘素FN和层粘素LN低水平表达,Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原更低。提示ECM可能在肿瘤的浸润、转移过程中起一定的作用。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 细胞外基质蛋白 基因表达
在线阅读 下载PDF
靶向胰腺癌细胞株增殖诱导配体基因小干扰RNA的制备及纯化 被引量:1
6
作者 毛振彪 邵建国 +3 位作者 王唯一 谭畅 黄伟达 黄介飞 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期827-832,共6页
目的:制备及纯化针对增殖诱导配体基因(APRIL)的小干扰RNA(APRIL siRNA),为进一步研究APRIL基因在人胰腺癌中的作用奠定基础。方法:构建靶向胰腺癌CFPAC-1细胞株APRIL基因双链RNA(APRIL dsRNA)的表达质粒pET-22b-APRIL,在大肠杆菌中发... 目的:制备及纯化针对增殖诱导配体基因(APRIL)的小干扰RNA(APRIL siRNA),为进一步研究APRIL基因在人胰腺癌中的作用奠定基础。方法:构建靶向胰腺癌CFPAC-1细胞株APRIL基因双链RNA(APRIL dsRNA)的表达质粒pET-22b-APRIL,在大肠杆菌中发酵表达APRIL dsRNA,并利用CF-11树脂亲和层析纯化;用大肠杆菌Ⅲ型RNA水解酶(RNaseⅢ)水解dsRNA,制备APRIL siRNA,应用DEAE树脂离子交换层析使RNaseⅢ与核苷酸分离,分子筛层析进一步分离纯化APRIL siRNA。将纯化后的APRIL siRNA转染CHO细胞,荧光显微镜下观察转染后CHO细胞APRIL蛋白的表达情况。结果:pET-22b-APRIL转染大肠杆菌后,经IPTG诱导能大量表达APRIL dsRNA,表达产物经CF-11树脂纯化能得到纯化的APRIL dsRNA;dsRNA经RNaseⅢ水解后,过DEAE树脂离子交换层析柱,经5%PAGE、12%SDS-PAGE电泳证实RNaseⅢ与核苷酸分离,进一步经分子筛层析分离纯化,得到纯化APRIL siRNA。荧光显微镜下观察结果表明,APRIL siR- NA转染CHO细胞能明显抑制APRIL蛋白的表达。结论:成功制备了靶向CFPAC-1细胞株的APRIL siRNA,为下一步敲减CFPAC-1细胞APRIL基因的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 增殖诱导配体 RNA干扰 胰腺肿瘤 体外转录法
在线阅读 下载PDF
乳酸乳球菌表达弓形虫棒状体蛋白1(ROP1) 被引量:9
7
作者 朱翔 杨秋林 +2 位作者 陆惠民 施宓 黄伟达 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第5期54-56,共3页
目的 在乳酸乳球菌中表达ROP1抗原蛋白。方法 从质粒 psk -ROP1中以BamHⅠ和SalⅠ双酶切出ROP1基因 ,置换构建好的大肠杆菌 -乳酸乳球菌穿梭表达质粒L2 -PsP30T中的P30基因 ,电转化感受态乳酸乳球菌 ,以Westernblotting鉴定ROP1在乳... 目的 在乳酸乳球菌中表达ROP1抗原蛋白。方法 从质粒 psk -ROP1中以BamHⅠ和SalⅠ双酶切出ROP1基因 ,置换构建好的大肠杆菌 -乳酸乳球菌穿梭表达质粒L2 -PsP30T中的P30基因 ,电转化感受态乳酸乳球菌 ,以Westernblotting鉴定ROP1在乳酸乳球菌中的表达。结果 表达产物中有一约 4 3kDa的蛋白带能被弓形虫病人血清识别。 展开更多
关键词 棒状体蛋白1 弓形虫 ROP1 乳酸乳球菌 表达 疫苗 弓形虫病
在线阅读 下载PDF
IDO抑制剂黄连碱对Aβ与IFN-γ联用诱导的PC12细胞凋亡的影响 被引量:6
8
作者 朱宇雯 何晓婕 杨青 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期684-688,共5页
阿尔兹海默症(Alzheimer′s disease,AD),又称原发性老年痴呆症,是一种致死性慢性中枢神经系统退行性疾病,发病机制复杂,主要特征包括细胞外β淀粉样斑块(amyloidβ-protein,Aβ)、细胞内神经元纤维缠结以及神经元功能紊乱或丢失。
关键词 阿尔兹海默症 黄连碱 吲哚胺2 3-双加氧酶 细胞凋亡
在线阅读 下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部