利用双向电泳技术研究异烟肼耐药MTB感染U937引致的差异表达蛋白 被引量：4

1

作者 刘丽蓉 乐军 王洪海 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期142-150,共9页

利用双向电泳技术对结核分枝杆菌(MTB)异烟肼(INH)耐药株和敏感株感染人源巨噬细胞(U937)后的全细胞蛋白表达图谱进行差异比较和分析,发现其中产生差异的有86个蛋白质斑点.利用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱技术对其中8个差异表达... 利用双向电泳技术对结核分枝杆菌(MTB)异烟肼(INH)耐药株和敏感株感染人源巨噬细胞(U937)后的全细胞蛋白表达图谱进行差异比较和分析,发现其中产生差异的有86个蛋白质斑点.利用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱技术对其中8个差异表达蛋白质斑点进行分析鉴定,获得8个明确的肽质量指纹图谱.通过在蛋白质数据库中进行检索分析,确定这8个蛋白质中的2个为在INH耐药株感染的U937中差异表达的干细胞生长因子和主要组织相容性复合物Ⅰ类抗原,6个为在敏感株感染的U937中差异表达的微管蛋白4β、信号转导和转录激活子3、延长因子-2激酶、环指蛋白29、锌指蛋白193和SNARE Vti1a-β蛋白.实验结果显示,INH耐药株和敏感株感染后的U937表达蛋白有差异,这有助于分析解释临床中观察到的受INH耐药株感染的病例出现毒力下降、致病性下降、传染性降低以及潜伏期延长的现象.结果为针对INH耐药株进行的新疫苗的设计提供了探索方向. 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 异烟肼 耐药 巨噬细胞 双向电泳 差异表达

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HIV/AIDS治疗研究进展 被引量：4

2

作者 王鹏飞 焦艳梅 +1 位作者 朱焕章 吴昊 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第6期715-718,共4页

高效抗反转录病毒治疗(highly active antiretroviral therapy,HAART)是目前针对HIV/AIDS公认有效的治疗方法,自应用于临床以来已取得了巨大的成功,但由于病毒潜伏库的存在,目前的HAART不能彻底清除HIV,因此需要改善现有疗法,以实现治愈... 高效抗反转录病毒治疗(highly active antiretroviral therapy,HAART)是目前针对HIV/AIDS公认有效的治疗方法,自应用于临床以来已取得了巨大的成功,但由于病毒潜伏库的存在,目前的HAART不能彻底清除HIV,因此需要改善现有疗法,以实现治愈AIDS的终极目标。本文对治疗HIV/AIDS的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 高效抗反转录病毒治疗 人类免疫缺陷病毒/获得性免疫缺陷综合征 潜伏

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白三烯A4水解酶基因多态性与结核性脑膜炎易感性的研究 被引量：2

3

作者 杨景卉 乐军 +4 位作者 陈晋 王洪海 徐颖 刘丽蓉 韩敏 《中国防痨杂志》 CAS 2012年第6期360-363,共4页

目的探讨中国汉族人群中白三烯A4水解酶(LTA4H)基因多态性与结核性脑膜炎的相关性。方法应用SNaPshot技术检测48例结核性脑膜炎患者和70名健康对照者LTA4H基因中rs1978331,rs2247570,rs2660898,rs2660845多态位点的等位基因、基因型和... 目的探讨中国汉族人群中白三烯A4水解酶(LTA4H)基因多态性与结核性脑膜炎的相关性。方法应用SNaPshot技术检测48例结核性脑膜炎患者和70名健康对照者LTA4H基因中rs1978331,rs2247570,rs2660898,rs2660845多态位点的等位基因、基因型和单体型分布频率,采用SHEsis软件进行相关统计学分析。结果对照组与患者组rs1978331多态性位点C等位基因例数分别为83和40、频率分别为59.3%和41.7%,T等位基因例数分别为57和56、频率分别为40.7%和58.3%,差异有统计学意义(χ2=7.080,P=0.008);rs1978331位点CC、CT和TT基因型在对照组例和患者组中的例数分别为12、33、25和20、16、12,分布频率分别为17.1%、47.1%、35.7%和41.7%、33.3%、25.0%,差异有统计学意义(χ2=8.670,P=0.013);rs2660898位点AA、AC和CC基因型在对照组和患者组中的数分别为28、32、10和20、12、16,分布频率分别为40.0%、45.7%、14.3%和41.7%、25.0%、33.3%,差异有统计学意义(χ2=7.980,P=0.019);对照组与患者组单体型CACT频率分别为26.3%和45.8%,差异有统计学意义(χ2=7.349,P=0.007)。结论 LTA4H基因中rs1978331基因多态性位点等位基因、rs1978331和rs2660898基因多态性位点基因型、单倍体型CACT与中国汉族人群结核性脑膜炎的易感性存在相关性。 展开更多

关键词 结核 脑膜 环氧水解酶类 多态性 单核苷酸 疾病遗传易感性

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人PTN基因在脑胶质瘤、肝细胞癌、喉鳞癌中的表达研究

4

作者 陈菊祥 卢亦成 +8 位作者 唐榕 方雄英 夏放 廖建春 楼美清 付志仁 应康 谢毅 毛裕民 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期628-630,F003,共4页

目的 :运用基因表达谱芯片和原位杂交技术观察人 PTN(pleiotrophin)基因在某些恶性肿瘤中的表达 ,并探讨其在肿瘤发生发展中的作用。 方法 :用 Bio Door 40 96型 c DNA基因表达谱芯片和原位杂交技术检测 PTN基因在 5例脑胶质瘤、10例喉... 目的 :运用基因表达谱芯片和原位杂交技术观察人 PTN(pleiotrophin)基因在某些恶性肿瘤中的表达 ,并探讨其在肿瘤发生发展中的作用。 方法 :用 Bio Door 40 96型 c DNA基因表达谱芯片和原位杂交技术检测 PTN基因在 5例脑胶质瘤、10例喉鳞癌、6例肝细胞癌及正常对照组织中的表达水平。 结果 :在上述肿瘤的基因表达谱芯片检测中 ,PTN基因表达均显著增高 ,与脑胶质瘤、喉鳞癌、肝细胞癌的原位杂交检测结果相吻合。 结论 :c DNA基因表达谱芯片能够为恶性肿瘤的相关基因功能分析提供特异和可靠的数据。 PTN基因在恶性肿瘤的发生机制中可能起重要作用。 展开更多

关键词 PTN基因 基因芯片 原位杂交 基因表达调控 肿瘤 病因学

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重组溶葡萄球菌酶对奶牛子宫内膜炎的疗效研究 被引量：6

5

作者 张继恩 史为民 +11 位作者 吴聪明 孙永学 王赞江 刘明春 孙春娣 张洪雷 郭刚 曾东平 刘宇 向蓉 沈建忠 黄青山 《中国兽药杂志》 2009年第3期17-23,共7页

为研究重组溶葡萄球菌酶对奶牛子宫内膜炎的疗效,以青霉素钠、土霉素为对照药物,子宫内灌注给药,分别在河北、内蒙古、广州、上海奶牛场试验,共治疗急、慢性子宫内膜炎病例359头,抽检249头奶牛子宫分泌物进行细菌学分离鉴定与统计分析... 为研究重组溶葡萄球菌酶对奶牛子宫内膜炎的疗效,以青霉素钠、土霉素为对照药物,子宫内灌注给药,分别在河北、内蒙古、广州、上海奶牛场试验,共治疗急、慢性子宫内膜炎病例359头,抽检249头奶牛子宫分泌物进行细菌学分离鉴定与统计分析。结果表明,大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、化脓棒状杆菌是4种检出率较高的病原菌。重组溶葡萄球菌酶治疗组与土霉素、青霉素钠比较,按400、800、1200 U/次的三个浓度剂量治疗,隔日投药1次,连续用药3次,800、1200 U/次的浓度剂量显效率超过80%,显著优于青霉素钠的疗效(P<0.01),与土霉素注射液组相当。追加用药次数可进一步提高奶牛子宫内膜炎的痊愈率。重组溶葡萄球菌酶能有效治疗由金黄色葡菌球菌、链球菌、化脓棒状杆菌等革兰氏阳性菌感染的子宫内膜炎,治愈后受孕率在70%左右。尤其是对抗生素治疗无效的慢性子宫内膜炎同样具有很好的疗效。因此,用重组溶葡萄球菌酶治疗奶牛子宫内膜炎安全、高效。 展开更多

关键词 重组溶葡萄球菌酶 奶牛 子宫内膜炎 疗效

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重组溶葡萄球菌酶对奶牛乳房炎的疗效研究 被引量：4

6

作者 蒋司嘉 张继恩 +4 位作者 吴聪明 李国栋 左之才 沈建忠 黄青山 《中国兽药杂志》 2011年第12期23-28,共6页

以85头患乳房炎奶牛共104个乳区为研究对象,随机分为4组,每组26个,分别用重组溶葡萄球菌酶粉低(200 U/乳区)、中(400 U/乳区)、高(800 U/乳区)三个剂量,对照组为青霉素G钠(160万IU/乳区),每天早晚挤奶后乳池灌注给药,共4 d,研究不同剂... 以85头患乳房炎奶牛共104个乳区为研究对象,随机分为4组,每组26个,分别用重组溶葡萄球菌酶粉低(200 U/乳区)、中(400 U/乳区)、高(800 U/乳区)三个剂量,对照组为青霉素G钠(160万IU/乳区),每天早晚挤奶后乳池灌注给药,共4 d,研究不同剂量重组溶葡萄球菌酶对奶牛乳房炎的治疗效果。试验结果显示,低、中、高剂量重组溶葡萄球菌酶均能有效清除感染乳区的链球菌、葡萄球菌、化脓隐秘杆菌等G+菌,大幅降低牛奶中的白细胞数,提高日产奶量。其中低剂量组对隐性乳房炎、临床型乳房炎的有效率和治愈率略优于青霉素G钠(P>0.05);中、高剂量对隐性乳房炎、临床型乳房炎的有效率和治愈率显著优于青霉素G钠(P<0.05);中、高剂量的疗效相当(P>0.05)。重组溶葡萄球菌酶是一种很好的治疗奶牛隐性乳房炎和临床乳房炎备选药物。 展开更多

关键词 重组溶葡萄球菌酶 奶牛 临床乳房炎 隐性乳房炎 疗效

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重组溶葡萄球菌酶在牛奶中的性质研究 被引量：1

7

作者 陆敏 许黎明 +3 位作者 吴宏宇 张继恩 李国栋 黄青山 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期162-166,共5页

溶葡萄球菌酶(Lysostaphin)是一种能高效裂解葡萄球菌细胞壁的肽链内切酶,已有研究表明其能够有效预防和去除奶牛乳腺中葡萄球菌的感染,但该酶在牛奶中的性质研究还缺少详细的研究数据。现对重组溶葡萄球菌酶在牛奶中的一些性质进行研... 溶葡萄球菌酶(Lysostaphin)是一种能高效裂解葡萄球菌细胞壁的肽链内切酶,已有研究表明其能够有效预防和去除奶牛乳腺中葡萄球菌的感染,但该酶在牛奶中的性质研究还缺少详细的研究数据。现对重组溶葡萄球菌酶在牛奶中的一些性质进行研究。检测了加入溶葡萄球菌酶后牛奶性状的变化和重组溶葡萄球菌酶在牛奶中的酶活的稳定性以及溶葡萄球菌酶在牛奶中的抑、杀菌活性。结果显示,重组溶葡萄球菌酶未改变牛奶的外观性状;并且重组溶葡萄球菌酶在39℃牛奶中可以稳定存放至少20 h以上,酶活性保持稳定;同时重组溶葡萄球菌酶在牛奶中对金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌仍然保持了良好的抑杀菌效果。该研究为今后溶葡萄球菌酶用于奶牛乳腺炎的治疗提供参考依据。 展开更多

关键词 重组溶葡萄球菌酶 牛奶 酶活性 杀菌

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检测乙、丙型肝炎病毒基因芯片的制备 被引量：20

8

作者 吴海 顾少华 +5 位作者 胡志前 许一斌 徐东 应康 谢毅 毛裕民 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期527-529,T003,共4页

目的 :探讨研制检测乙型和丙型肝炎病毒的基因芯片。方法 :以 HBV、HCV高度保守的基因片段为探针 ,同时用没有同源性的植物基因片段为内参照基因 ,制备成“乙、丙型肝炎病毒双检基因芯片”。检测时抽提患者血清中的病毒核酸 ,进行RT- PC... 目的 :探讨研制检测乙型和丙型肝炎病毒的基因芯片。方法 :以 HBV、HCV高度保守的基因片段为探针 ,同时用没有同源性的植物基因片段为内参照基因 ,制备成“乙、丙型肝炎病毒双检基因芯片”。检测时抽提患者血清中的病毒核酸 ,进行RT- PCR扩增及荧光标记 ,然后与双检基因芯片杂交 ,杂交结果用 Scan Array 30 0 0扫描仪扫描。 结果 :双检基因芯片的内参照结果能做到绝对阳性和绝对阴性 ,同时对不同血清 (正常人血清 ,乙肝 E抗原阳性血清 ,丙肝 RNA阳性血清 ,乙肝、丙肝阳性混合血清 )能有效检测区分。 结论 :本研究成功地制作了乙、丙型肝炎病毒双检基因芯片 。 展开更多

关键词 基因芯片 基因诊断 乙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒

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基因表达谱芯片发现36条喉鳞癌相关基因 被引量：10

9

作者 陈菊祥 范静平 +7 位作者 应康 孙爱华 廖建春 唐榕 黄燕 李瑶 谢毅 毛裕民 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期519-522,T003,共5页

目的 :研究探讨喉鳞癌发生、发展中相关基因群的表达和初步功能。 方法 :按微矩阵排列的 40 96种全长基因 PCR产物制成 Bio Door40 96型微矩阵表达谱芯片 ;采用条件优化的一步法抽提喉鳞癌及正常组织总 RNA,用 Qiagen公司 Oligotexm RN... 目的 :研究探讨喉鳞癌发生、发展中相关基因群的表达和初步功能。 方法 :按微矩阵排列的 40 96种全长基因 PCR产物制成 Bio Door40 96型微矩阵表达谱芯片 ;采用条件优化的一步法抽提喉鳞癌及正常组织总 RNA,用 Qiagen公司 Oligotexm RNA离心柱分离纯化两种组织的 m RNA;经逆转录合成荧光分子 (Cy3/ Cy5 )掺入的 c DNA一链制备表达谱探针 ,芯片杂交和严格洗片后 ,用 Scan Array30 0 0荧光扫描仪扫描芯片荧光信号图像 ,利用计算机分析肿瘤及正常组织中差异表达的基因。对所获得的基因进行分子生物信息学分析。结果 :在 40 96种基因中 ,喉鳞状细胞癌与正常组织间存在差异表达的基因。在所检测的 4对临床标本中 ,发现有差异表达的基因 36条 (0 .88% )。生物信息学分析显示 ,该 36条差异表达基因与肿瘤的发病机制可能存在相关性。结论 :喉鳞状细胞癌的发生、发展中存在多基因表达调控的改变 。 展开更多

关键词 喉肿瘤 鳞状细胞癌 基因表达 基因芯片

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同卵双生子外周血DNA甲基化谱的差异 被引量：5

10

作者 赵书民 张素华 +2 位作者 陈金中 李士林 李成涛 《法医学杂志》 CAS CSCD 2011年第4期260-264,共5页

目的通过比较不同个体外周血DNA甲基化谱的差异,评估DNA甲基化在同卵双生子个体甄别中的应用价值。方法在知情同意基础上获得22对同卵双生子外周血样。抽提基因组DNA后进行重亚硫酸盐转化,采用Illumina公司的人27k甲基化微珠芯片检测基... 目的通过比较不同个体外周血DNA甲基化谱的差异,评估DNA甲基化在同卵双生子个体甄别中的应用价值。方法在知情同意基础上获得22对同卵双生子外周血样。抽提基因组DNA后进行重亚硫酸盐转化,采用Illumina公司的人27k甲基化微珠芯片检测基因组27 578个CpG位点的甲基化程度(β值)。依据常染色体CpG位点的β值,采用欧氏距离计算方法计算同卵双生子间以及同性别的无关个体间的表观遗传距离。比较同卵双生子对与无关个体对两组不同人群间的表观遗传距离差异。结果同卵双生子对人群以及无关个体对人群中的男性个体对与女性个体对的表观遗传距离差异均无统计学意义(P值分别为0.0695和0.4825)。同卵双生子对的表观遗传距离显著低于无关个体对人群(中位数:6.02 vs 7.20,P=0.000 2),但两组人群的表观遗传距离均显著大于4.00(P<0.000 1)。结论同卵双生子间的外周血DNA甲基化谱差异显著,DNA甲基化是进行同卵双生子个体甄别的有效生物学标记。 展开更多

关键词 法医遗传学 双生 单卵 甲基化 个人识别

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p27^(kip1)过表达对肝细胞癌细胞株细胞周期的影响 被引量：3

11

作者 吴洁 桑瑛颖 +4 位作者 陶静 王英明 吴超群 邓可京 乔守怡 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期323-328,共6页

目的探讨肿瘤抑制基因p27kip1编码的P27蛋白过表达与HCC细胞株细胞周期的关系。方法本研究从野生型p27kip1基因真核表达质粒pEYFP-P27(WT)出发,采用定点诱变技术构建了突变型p27kip1基因表达载体pEYFP-P27(S10A)、pEYFP-P27(T157A)和pEY... 目的探讨肿瘤抑制基因p27kip1编码的P27蛋白过表达与HCC细胞株细胞周期的关系。方法本研究从野生型p27kip1基因真核表达质粒pEYFP-P27(WT)出发,采用定点诱变技术构建了突变型p27kip1基因表达载体pEYFP-P27(S10A)、pEYFP-P27(T157A)和pEYFP-P27(T187A),然后用脂质体法将上述质粒转染HCC细胞株HepG2和Hep3B,Western Blotting检测内源和转入的P27蛋白表达,流式细胞仪检测P27蛋白过表达对HCC细胞株细胞周期的影响。结果野生型和3种突变型的P27融合蛋白在HepG2和Hep3B中的过表达都能增强G0／G1期阻抑;同时,对HepG2细胞,核定位位点突变体P27(T157A)比野生型P27蛋白及其他两个突变体具有更强的细胞周期阻抑活性,而对Hep3B细胞,3个突变体和野生型p27蛋白对细胞周期的影响无明显差异。结论P27蛋白过表达能够显著增强HCC细胞株的G0／G1期阻抑。 展开更多

关键词 P27蛋白 细胞周期 肝细胞癌细胞株

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基于形态性状的松江鲈鱼(Trachidermus fasciatus)种群鉴别 被引量：12

12

作者 王金秋 梁鸿子 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期348-353,共6页

采用差异系数(C.D)和均数差异显著性这两种数理统计分析方法,对松江鲈鱼的鸭绿江、青龙河和富春江三个群体的表型性状,即85个样本的19项形态性状,其中包括10项可数性状和9项可量性状的差异进行了分析研究。结果表明,这三个群体彼此间的... 采用差异系数(C.D)和均数差异显著性这两种数理统计分析方法,对松江鲈鱼的鸭绿江、青龙河和富春江三个群体的表型性状,即85个样本的19项形态性状,其中包括10项可数性状和9项可量性状的差异进行了分析研究。结果表明,这三个群体彼此间的C.D值均小于亚种分化的判定标准1.28的水平,即各群体间的差异尚未达到亚种分化的水平,仍属同一种群。形态性状均数差异显著性的检验结果显示,松江鲈鱼青龙河与富春江两群体之间的差异较小,而鸭绿江群体与这两者的差异相对较大。 展开更多

关键词 松江鲈鱼 种群鉴别 形态性状

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一条KRAB型锌指蛋白全长新基因的克隆与功能初探 被引量：2

13

作者 王兆 应康 +3 位作者 林盛榕 吴海 谢毅 毛裕民 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期247-251,共5页

从人胎脑cDNA文库中克隆到一条全长的锌指蛋白新基因的cDNA ,命名为ZNF303。序列分析表明 ,ZNF303的C末端含有7个保守的锌指基序 ,N末端含有一个KRAB(Kr櫣ｐｐｅｌ associatedbox)结构域。利用肝癌组织表达谱基因芯片杂交证明 ,该基因... 从人胎脑cDNA文库中克隆到一条全长的锌指蛋白新基因的cDNA ,命名为ZNF303。序列分析表明 ,ZNF303的C末端含有7个保守的锌指基序 ,N末端含有一个KRAB(Kr櫣ｐｐｅｌ associatedbox)结构域。利用肝癌组织表达谱基因芯片杂交证明 ,该基因在肝癌组织中的表达量有明显降低。认为这种降低可能跟肝癌的形成和转移有密切的关系。利用辐射杂交基因定位技术 ,得出该基因在人类染色体上的位置是19q13.2。 展开更多

关键词 锌指蛋白 KRAB 肝癌 ZNF303

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人釉原蛋白的原核表达、纯化及鉴定 被引量：2

14

作者 程岚 束蓉 +3 位作者 薛京伦 陈金中 田聆 方煜翔 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期811-814,共4页

目的构建含人釉原蛋白(hAm)成熟肽基因的重组原核表达质粒,在大肠杆菌中表达重组人釉原蛋白,鉴定经纯化获得的融合蛋白。方法利用限制性内切酶EcoRⅠ和SalⅠ将hAm基因插入原核表达载体PGEX4T1,对重组表达质粒PGEX4T1-hAm进行双酶切和测... 目的构建含人釉原蛋白(hAm)成熟肽基因的重组原核表达质粒,在大肠杆菌中表达重组人釉原蛋白,鉴定经纯化获得的融合蛋白。方法利用限制性内切酶EcoRⅠ和SalⅠ将hAm基因插入原核表达载体PGEX4T1,对重组表达质粒PGEX4T1-hAm进行双酶切和测序鉴定。选择测序正确的质粒转化E.coli.RosettaTM,用终浓度0.3 mmol/L的IPTG诱导表达带有亲和标记谷胱甘肽-S-转移酶(GST)的重组hAm。经亲和层析纯化获得融合蛋白GST-hAm,并通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定原核表达的重组hAm。结果重组质粒经双酶切和测序鉴定证实插入序列准确无误。在大肠杆菌RosettaTM中经IPTG诱导表达并纯化得到的融合蛋白GST-hAm,经SDS-PAGE鉴定分子量约为46000,主要以包涵体形式存在,与预测一致;Western blotting证实该融合蛋白能被特异性抗hAm多克隆抗体识别。结论成功构建含有hAm成熟肽基因的重组原核表达质粒,表达的融合蛋白GST-hAm可通过纯化获得,经鉴定为hAm。大量纯化的hAm成熟肽的获得为开展其功能研究奠定了基础。 展开更多

关键词 重组人釉原蛋白 原核表达载体 融合蛋白

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翻译起始的调控与肿瘤靶向基因治疗 被引量：2

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作者 方煜翔 薛京伦 田聆 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第4期396-400,共5页

真核细胞主要通过高度结构化的5′端非翻译区(5′untranslated region,5′UTR)实现mRNA翻译起始的调控,其主要作用方式有3种,即通过本身高度复杂的二级结构在空间上阻碍翻译起始、通过其包含的上游AUG密码子(uAUG)和上游开放阅读框(uORF... 真核细胞主要通过高度结构化的5′端非翻译区(5′untranslated region,5′UTR)实现mRNA翻译起始的调控,其主要作用方式有3种,即通过本身高度复杂的二级结构在空间上阻碍翻译起始、通过其包含的上游AUG密码子(uAUG)和上游开放阅读框(uORF)元件来抑制翻译起始,以及通过其包含的内部核糖体进入位点(IRES)元件的"非帽依赖"(cap-indepen-dent)起始途径来抑制翻译起始。肿瘤细胞通常会过表达真核起始因子4E(eukaryotic initiation factor4E,eIF4E)、eIF4A、eIF4G等,这些因子可以通过解开5′UTR的复杂结构特异性地解除5′UTR的翻译抑制作用。目前应用5′UTR进行肿瘤靶向性基因治疗的思路是把肿瘤杀伤基因置于5′UTR调控之下,利用肿瘤细胞过表达翻译起始因子来发挥5′UTR在肿瘤细胞中的翻译竞争优势,实现治疗基因在肿瘤细胞中的特异性表达,从而达到靶向杀伤肿瘤的目的。 展开更多

关键词 翻译调控 5′UTR 肿瘤 基因治疗 靶向调控

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CRISPR/Cas基因编辑技术应用于表皮生长因子受体突变型肺腺癌的治疗 被引量：2

16

作者 赵家义 吴宏宇 韩一平 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期675-679,共5页

CRISPR/Cas基因编辑技术是一种强大的新技术,可以精确编辑细胞基因组。该技术在实验室应用的基础上,引入至肿瘤研究领域,成为目前肿瘤治疗研究领域的热点。肺癌的综合治疗已经进入了分子靶向时代,表皮生长因子受体(epidermal growth fac... CRISPR/Cas基因编辑技术是一种强大的新技术,可以精确编辑细胞基因组。该技术在实验室应用的基础上,引入至肿瘤研究领域,成为目前肿瘤治疗研究领域的热点。肺癌的综合治疗已经进入了分子靶向时代,表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变是肺腺癌最主要、最重要的驱动基因之一,表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor-tyrosinekinase inhibitors,EGFR-TKI)治疗EGFR突变肺腺癌有显著疗效,但随之而来的原发性和继发性耐药现象成为当前迫切需要解决的问题。应用CRISPR/Cas基因组编辑技术进行个性化分子手术可有效地纠正或破坏EGFR突变,从而抑制肿瘤生长和进展。随着CRISPR/Cas基因重组技术的日臻完善与成熟,分子手术方法联合传统外科手术、放疗和/或TKI靶向药物治疗必将为携带EGFR突变的肺腺癌患者带来很好的希望。 展开更多

关键词 CRISPR/Cas 基因编辑技术 表皮生长因子受体 肺癌

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大量元素、有机添加物、激素对蝴蝶兰原球茎增殖的影响 被引量：28

17

作者 王静 娄玉霞 +1 位作者 郝再彬 明凤 《上海农业科技》 2004年第3期21-23,共3页

蝴蝶兰属热带亚热带兰科植物,花形奇特,姿态高雅,色彩鲜艳,花期持久,素有兰花皇后之称.但蝴蝶兰为单性气生兰,分株繁殖系数低,种子繁殖发芽率又差,难以满足市场需求,故多采用组培繁殖种苗.1974年Intuwong和Sagawa利用蝴蝶兰茎尖诱导产... 蝴蝶兰属热带亚热带兰科植物,花形奇特,姿态高雅,色彩鲜艳,花期持久,素有兰花皇后之称.但蝴蝶兰为单性气生兰,分株繁殖系数低,种子繁殖发芽率又差,难以满足市场需求,故多采用组培繁殖种苗.1974年Intuwong和Sagawa利用蝴蝶兰茎尖诱导产生原球茎,再由其分化幼芽,形成植株.近年来国内外关于蝴蝶兰原球茎发生的研究都有报道,分别以蝴蝶兰的实生苗根尖、茎尖以及幼叶作为外植体和叶片诱导原球茎,通过添加不同有机物和激素以及改变基本培养基组分来促进原球茎增殖,研究结果表明,原球茎可继续增殖形成新的原球茎,但增殖速度缓慢,增殖时间较长(12周以上).如能提高原球茎增殖速度,就会大大提高蝴蝶兰的繁殖系数.本实验通过研究大量元素、有机添加物及激素对原球茎增殖的影响,筛选出最适合蝴蝶兰原球茎增殖的培养基.特别指出的是,试验中关于赤霉素(GA3)对蝴蝶兰原球茎增殖的作用效果做了初步探索.据调查,有关赤霉素(GA3)在蝴蝶兰组织培养中的应用在国内至今未见报道. 展开更多

关键词 蝴蝶兰 原球茎增殖 大量元素 有机物 激素 组织培养 培养基

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蝶呤型钼辅因子生物合成、运输及组装——潜在的药物靶标 被引量：1

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作者 石廷玉 王洪海 谢建平 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期135-141,共7页

钼辅因子作为氧化还原反应中的重要分子,参与硫、氮、碳的氧化还原代谢.钼辅因子主要分为两类:以铁硫簇为基础的铁钼辅因子和以亚钼蝶呤为基础的钼辅因子.钼-二-亚钼蝶呤-鸟苷二核苷钼辅因子(Mo-bis-MGD)是蝶呤型钼辅因子的重要成员之一... 钼辅因子作为氧化还原反应中的重要分子,参与硫、氮、碳的氧化还原代谢.钼辅因子主要分为两类:以铁硫簇为基础的铁钼辅因子和以亚钼蝶呤为基础的钼辅因子.钼-二-亚钼蝶呤-鸟苷二核苷钼辅因子(Mo-bis-MGD)是蝶呤型钼辅因子的重要成员之一,是硝酸盐还原酶的重要辅因子.膜结合硝酸盐还原酶介导的硝酸盐还原为细菌提供了氮源和能源,与分枝杆菌的持留性感染相关.此外,膜结合硝酸盐还原酶能显著增加卡介苗在免疫缺陷鼠中的毒性.人与细菌中蝶呤型钼辅因子生物合成、运输和组装的差异提示,Mo-bis-MGD型钼辅因子的生物合成途径很可能作为新型药物靶标,有益于抗病原菌,尤其有利于抗多重耐药结核分枝杆菌新药的开发研究. 展开更多

关键词 钼辅因子 硝酸盐还原酶 分枝杆菌

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利用RAPD推测宝山香柚与其他柑橘属品种间的亲缘关系 被引量：2

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作者 明凤 任志军 +3 位作者 王敬文 梁斌 郭滨 沈大棱 《上海农业科技》 2004年第2期15-17,共3页

香柚(香橼)(Citrus aurantium L.)(当地农民称谓)是上海市宝山区长兴岛和横沙岛上一种属柑橘类(芸香科,柑橘属)的优良树种,适宜作行道果树、公园装饰树种、城市小区绿化或生态林优势种群.其园艺性状优势:(1)树干挺拔,四季翠绿,易与其他... 香柚(香橼)(Citrus aurantium L.)(当地农民称谓)是上海市宝山区长兴岛和横沙岛上一种属柑橘类(芸香科,柑橘属)的优良树种,适宜作行道果树、公园装饰树种、城市小区绿化或生态林优势种群.其园艺性状优势:(1)树干挺拔,四季翠绿,易与其他树种混种,形成森林生态系统;(2)每年五一节前后是盛花季节,满树白花,香气怡人,树叶散发的气体具有净化空气的作用;(3)成年树金色硕果,由于果酸,枝条有刺,不易失窃,总挂果时间长达半年(从国庆节可持续到春节,满树金黄色果子),每个果实直径达10～12cm,沿道路两旁形成一条美丽的风景线;(4)果实虽有酸味,加工后仍可食用,干果为中药材;(5)树种抗病性强,无致命病虫害.故该品种具有一定的绿化树种与商业开发的应用价值. 展开更多

关键词 宝山香柚 柑橘属 品种间亲缘关系 RAPD 地方种质资源

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一个中国雄性激素不敏感综合征大家系中AR-Arg^(840)Cys突变的生物学效应

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作者 王明华 叶璐夷 +3 位作者 蒋东 吴士良 赵志民 王久存 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期160-166,共7页

雄性激素不敏感综合征在中国有一个患者大家系.遗传分析表明,雄性激素受体(AR)的Arg840Cys突变是引起本家系疾病的原因.家系中的患者个体呈现高度变异的表型特征.选择具有显著代表性的3个患者个体,成功建立了这些个体的生殖器皮肤成纤... 雄性激素不敏感综合征在中国有一个患者大家系.遗传分析表明,雄性激素受体(AR)的Arg840Cys突变是引起本家系疾病的原因.家系中的患者个体呈现高度变异的表型特征.选择具有显著代表性的3个患者个体,成功建立了这些个体的生殖器皮肤成纤维细胞系(GSF),并研究了各细胞系的生长动力曲线和生长周期的分布,发现这些指标和个体病症的严重程度呈一定的正相关性.通过比较野生型与突变性AR的空间结构变化以及转激活能力的变化,结合个体表型的差异性,推测由于个体的基因背景差异,相关AR辅调控因子的表达也会存在着差异,可能最终导致该家系患者显著的表型变化.目前,已利用蛋白质双向电泳,观察到个体间差异表达的蛋白,并在其中寻找AR的辅调控因子,以期进一步阐明AR-Arg840Cys突变一因多效性的机制. 展开更多

关键词 雄性激素不敏感综合征 生殖器皮肤成纤维细胞 辅调控因子 转激活

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