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微生物生长量测定系统 被引量:1
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作者 胡宝龙 林勇 《实验技术与管理》 CAS 1995年第4期49-50,共2页
测定微生物纯培养过程中生物量的变化,在生命科学研究和工、农、医及卫生保健事业中有广泛应用。采用传统测定法,因多次移取测定样品等操作,常使纯培养物遭受杂菌污染。同时,由于所取测定样品不能倒回培养容器,使容器内的纯培养物逐渐... 测定微生物纯培养过程中生物量的变化,在生命科学研究和工、农、医及卫生保健事业中有广泛应用。采用传统测定法,因多次移取测定样品等操作,常使纯培养物遭受杂菌污染。同时,由于所取测定样品不能倒回培养容器,使容器内的纯培养物逐渐减少而致培养条件不断改变,故较难真实反映容器内纯培养物的生长规律。我们研制的称为无污染原位法测定微生物生长量系统,能很好地解决上述弊端,并使测定操作能快速与准确地完成。经科研和教学实践验证,均获得了满意的结果。 展开更多
关键词 微生物 微生物生长量 测定系统
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昆明市腹泻人群肠致病性大肠杆菌流行特征研究 被引量:7
2
作者 杨春利 张顺先 +10 位作者 艾琳 蔡玉春 卢艳 陈韶红 徐闻 古文鹏 胡薇 陈军虎 李石柱 陈家旭 周晓农 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期321-325,共5页
目的了解云南省昆明市肠致病性大肠杆菌(enteropathogenic Escherichia coli,EPEC)的流行特征,为我国EPEC感染引起的腹泻提供科学依据。方法在云南省昆明市4家哨点医院收集腹泻病例粪便样本1 121份,非腹泻人群粪便样本319份,进行细菌培... 目的了解云南省昆明市肠致病性大肠杆菌(enteropathogenic Escherichia coli,EPEC)的流行特征,为我国EPEC感染引起的腹泻提供科学依据。方法在云南省昆明市4家哨点医院收集腹泻病例粪便样本1 121份,非腹泻人群粪便样本319份,进行细菌培养,选择单个菌落,提取DNA,并采用荧光定量PCR检测EPEC,同时使用结构化问卷收集研究对象基本信息。结果 EPEC在腹泻病例中的检出率高于非腹泻研究对象中的检出率(5.53%,1.88%,χ~2=7.36,P<0.05)。EPEC的检出率在不同年龄组腹泻病例中有统计学差异(χ~2=17.27,P<0.05),其中在2—5岁腹泻病例最高(12.12%,16/132);EPEC的检出率在腹泻病例中有明显的季节分布趋势(χ~2=12.82,P<0.05),其中EPEC在夏季最高(9.00%,18/200),冬季最低(3.05%,12/394)。EPEC阳性的腹泻病例水样便占61.3%(38/62),出现脱水症状占12.9%(8/62)。结论 EPEC是昆明市人群腹泻的重要细菌性病原体之一,且EPEC感染以5岁以下儿童为主,EPEC感染容易造成脱水。 展开更多
关键词 腹泻病例 非腹泻研究对象 肠致病性大肠杆菌 流行病学特征
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超抗原SEB活化耐受性NKT细胞亚群的研究 被引量:7
3
作者 陈钰 钟江 +4 位作者 徐健 陈中才 郭业磊 金婷 张继慧 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期943-946,共4页
目的:探讨超抗原SEB活化的效应细胞参与免疫耐受的NKT细胞亚群及分化特征。方法:采用C57BL/J小鼠脾细胞经SEB诱导,收集体外扩增10d的淋巴细胞为效应细胞,与刀豆蛋白(ConA)、脂多糖(LPS)和白介素-2(IL-2)共同培养3d,测定效应细胞对刺激... 目的:探讨超抗原SEB活化的效应细胞参与免疫耐受的NKT细胞亚群及分化特征。方法:采用C57BL/J小鼠脾细胞经SEB诱导,收集体外扩增10d的淋巴细胞为效应细胞,与刀豆蛋白(ConA)、脂多糖(LPS)和白介素-2(IL-2)共同培养3d,测定效应细胞对刺激剂的应答反应能力。在正常小鼠淋巴细胞与上述刺激剂反应的同时添加效应细胞,3d后测定效应细胞抑制正常淋巴细胞对刺激原的应答反应能力。用MTT染色方法记录细胞增殖的A值。以ConA活化的淋巴细胞做参照,用流式细胞术(FCM)解析了耐受性效应细胞中NKT细胞亚群并显示分化来源与功能的相关性。结果:与正常淋巴细胞对抗原应答反应能力相比,SEB活化的效应细胞对ConA、LPS和IL-2的应答反应能力明显降低,细胞生长的A值从正常组的0.80±0.04、0.60±0.03和0.55±0.07下降到0.60±0.05、0.30±0.05及0.27±0.04(P<0.01,n=3)。效应细胞抑制正常淋巴细胞对上述抗原的应答反应,尤其抑制ConA活化的T淋巴细胞的应答反应;A值分别由正常值降低到0.26±0.002、0.48±0.04及0.34±0.02(P<0.01,n=3)。效应细胞中CD4+NK1.1+、CD8+NK1.1+、TcRVβ8+/NK1.1+NKT细胞亚群显著增加(P<0.05和P<0.01,n=4)。ConA活化的淋巴细胞是T淋巴细胞并包括CD4-CD8-/CD3+NK1.1+NKT细胞。结论:超抗原SEB活化的耐受功能与CD4+NK1.1+、CD8+NK1.1+、TcRVβ8+NK1.1+NKT细胞亚群有关,它们由T细胞分化而来。CD4-CD8-/CD3+NK1.1+NKT细胞没有参与耐受性调节。 展开更多
关键词 NKT细胞亚群 超抗原 SEB 免疫耐受
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转Bt基因甘蔗抗虫性及重要经济、农艺性状的评价 被引量:4
4
作者 陈勇生 翁丽星 +8 位作者 劳方业 邓海华 汪联辉 齐永文 沈万宽 刘福业 吴文龙 符成 陈健文 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期376-381,共6页
为评价转Bt基因甘蔗的抗虫性,对6份转Bt甘蔗品系(Y2、Y3、Y4、T1、T2和T3)进行室内抗虫性鉴定实验和田间自然感虫的抗虫性评价。结果表明,室内人工抗虫性鉴定结果与田间自然感染结果大体吻合,各参试材料在两个试验点的抗虫性表现基本一... 为评价转Bt基因甘蔗的抗虫性,对6份转Bt甘蔗品系(Y2、Y3、Y4、T1、T2和T3)进行室内抗虫性鉴定实验和田间自然感虫的抗虫性评价。结果表明,室内人工抗虫性鉴定结果与田间自然感染结果大体吻合,各参试材料在两个试验点的抗虫性表现基本一致,Bt基因表达稳定,所有参试品系抗虫性均明显比相应的供体品种强,其中Y4和T2的抗性最强,T3相对较弱;在经济性状方面,Y3、Y4和T3的蔗茎产量、含糖量与其供体品种‘新台糖16号’相当,但甘蔗蔗糖含量较低;T2的甘蔗蔗糖含量则超过其供体品种‘新台糖16号’,但农艺性状较差,茎产量和含糖量低。 展开更多
关键词 转Bt甘蔗 抗虫性 产量 蔗糖含量 评价
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表皮葡萄球菌SarA对atlE、lipA和zinC基因表达调控的研究 被引量:3
5
作者 王海蛟 范长胜 +4 位作者 辛及娣 陶菊红 苑兴卉 高山峨 梁国新 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第2期180-186,共7页
表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermids)是一种条件致病菌,SarA(StaphylococcalaccessoryregulatorA)是该菌中一个全局性调控因子,它控制着细胞中许多与毒性相关的基因表达.报道了SarA在转录水平直接调控atlE、lipA和zinC基因的表达.RT... 表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermids)是一种条件致病菌,SarA(StaphylococcalaccessoryregulatorA)是该菌中一个全局性调控因子,它控制着细胞中许多与毒性相关的基因表达.报道了SarA在转录水平直接调控atlE、lipA和zinC基因的表达.RT-PCR和lacZ报告基因的分析结果显示,在表皮葡萄球菌ATCC35984中,SarA对atlE(自溶酶基因)表达起负调控作用,而对lipA(脂肪酶基因)和zinC(膜相关锌金属蛋白酶基因)的表达则有正调控作用.生物信息学分析表明,SarA控制atlE,lipA和zinC3种基因表达可能是通过与被调控基因上游的特定DNA序列的结合来实现的,该DNA结合区保守并富含AT碱基.根据已报道的金黄色葡萄球菌中SarA的结合位点序列,利用Omiga软件分析并推测了SarA结合atlE,lipA和zinC的可能区域.基于SarA是一种多功能的毒素相关调控因子,结果提示,SarA能调控众多因子,可以作为防治表皮葡萄球菌感染的一个药物筛选靶点. 展开更多
关键词 SARA 自溶酶基因(atLE) 脂肪酶基因(lipA) 膜相关锌金属蛋白酶基因(zinC) 基因调控 表皮葡萄球菌
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转录组测序深度对表达基因检出及表达量估计的影响 被引量:7
6
作者 高原 王翌霞 +2 位作者 张亮 窦同海 周雁 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期642-647,共6页
基于第二代测序技术的转录组测序(RNA-seq)是目前基因表达分析的重要手段,其测序深度与检出的表达基因数量及基因表达量准确程度直接相关。为探索转录组测序深度对基因表达分析的影响,进而为不同实验需求选择合适的测序深度提供参考,本... 基于第二代测序技术的转录组测序(RNA-seq)是目前基因表达分析的重要手段,其测序深度与检出的表达基因数量及基因表达量准确程度直接相关。为探索转录组测序深度对基因表达分析的影响,进而为不同实验需求选择合适的测序深度提供参考,本研究采用Hiseq2000高通量测序平台完成小鼠大脑转录组的深度测序,共产出38 M有效reads。从中随机抽取总量的25%,50%,75%和全部数据模拟建成4个不同测序深度的文库,并以相对表达量RPKM值的高低将表达基因划分为5组,比较分析不同测序深度下不同组别检出表达基因个数以及基因相对表达量(RPKM)的变化。结果表明,9.5 M reads的测序深度中可检出81.55%的总编码基因,而随测序深度增加新检出表达基因的数量逐步减少。基因表达量的分析中,中高表达量基因RPKM[30,+∞)、偏低表达基因RPKM[3,30)和低表达基因RPKM[1,3)的相对表达量分别在9.5 M,19 M和28.5 M有效reads的测序深度以上的文库中趋于稳定。由此可知,研究中高表达基因时,可参考的转录组测序量为9.5 M有效reads以上,而研究低表达基因时,测序量需为19 M有效reads或更高。 展开更多
关键词 高通量测序技术 测序深度 基因检出个数 基因表达量
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大肠杆菌ppsA基因的克隆表达 被引量:3
7
作者 柴红梅 赵永昌 +2 位作者 宋令荣 范长胜 陈永青 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第4期559-561,共3页
The pps A gene encoding PpsA was obtained by polymerase chain reaction(PCR) and expressed in E.coli BL21 strain.SDS PAGE demonstrated that the band at 87 kD was more intensive than the same bands of the constract.The ... The pps A gene encoding PpsA was obtained by polymerase chain reaction(PCR) and expressed in E.coli BL21 strain.SDS PAGE demonstrated that the band at 87 kD was more intensive than the same bands of the constract.The specific activity of PpsA in crude extracts was increased 3.9 fold. 展开更多
关键词 苯丙氨酸 ppsA 基因克隆 基因表达 生物合成
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酵母乳糖酶对牛乳乳糖水解作用的研究 被引量:4
8
作者 郭杰炎 毛敏伟 孙玉华 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 1991年第3期19-22,18,共5页
采用乳酸克鲁维酵母的乳糖酶(β-乳糖苷酶)对乳糖溶液、喷雾干燥脱脂奶以及全脂奶进行了试验,以确定将乳糖转化成单糖的最适条件。当牛奶中酶浓度为3u/ml时,于40℃反应2小时或4℃反应24小时,约60%的乳糖得以水解。随着乳糖浓度的增高,... 采用乳酸克鲁维酵母的乳糖酶(β-乳糖苷酶)对乳糖溶液、喷雾干燥脱脂奶以及全脂奶进行了试验,以确定将乳糖转化成单糖的最适条件。当牛奶中酶浓度为3u/ml时,于40℃反应2小时或4℃反应24小时,约60%的乳糖得以水解。随着乳糖浓度的增高,水解程度也有所提高。当酶浓度为10U/ml时,于40℃反应2小时,90%乳糖得以水解。用自制的乳酸克鲁维酵母的乳糖酶和加拿大lactaid Inc.生产的乳糖酶制剂lactaid水解乳糖无大的差异。 展开更多
关键词 乳糖酶 乳糖 水解作用 牛乳 酵母
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超抗原SEB活化的NKT细胞亚群形态和分化途径的研究 被引量:4
9
作者 陈钰 郭业磊 钟江 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期596-599,共4页
目的:以NKT细胞形态和分化途径为焦点,研究超抗原SEB活化的NKT细胞亚群的特征。方法:C57BL/J小鼠脾细胞分别经SEB或者ConA诱导,收集体外扩增10d和5d的淋巴细胞以及获取正常黏附性巨噬细胞。用荧光抗体染色,流式细胞仪测定淋巴细胞和大... 目的:以NKT细胞形态和分化途径为焦点,研究超抗原SEB活化的NKT细胞亚群的特征。方法:C57BL/J小鼠脾细胞分别经SEB或者ConA诱导,收集体外扩增10d和5d的淋巴细胞以及获取正常黏附性巨噬细胞。用荧光抗体染色,流式细胞仪测定淋巴细胞和大淋巴细胞群表面CD69的表达、NKT细胞亚群百分数和不同NKT细胞亚群的分化途径。倒置显微镜400倍下比较大淋巴细胞的形态。结果:SEB活化的淋巴细胞和大淋巴细胞表面CD69分子表达由正常值的0.11%分别提高到55.00%和68.95%。大细胞群中CD8+和TCRVB8+NKT细胞亚群的百分数由原始的0.36%和0.81%分别提高到30.29%和31.48%。这些细胞位于流式细胞图的上部,是大体积细胞群。显微镜下显示SEB活化的大淋巴细胞体积不仅大于ConA活化的T淋巴细胞,而且比正常巨噬细胞大5倍以上,是非黏附性细胞。胞内质粒松散、胞质与核之比>1。SEB活化的CD8+和TCRVβ8+NKT细胞亚群均由T细胞直接分化而来。结论:SEB活化10d的NKT细胞亚群主要是CD8+NK1.1+和TCRVβ8+NK1.1+的NKT细胞。这些细胞是大体积淋巴细胞,应属于T细胞的亚群。 展开更多
关键词 NKT细胞亚群 超抗原 细胞形态 细胞分化
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枯草杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶基本酶学性质研究 被引量:3
10
作者 黄兴奇 郑伟军 +1 位作者 陈永青 宋大新 《西南农业学报》 CSCD 1990年第2期106-108,共3页
β-葡聚糖是大麦淀粉质胚乳细胞壁的主要成份,约占大麦总重量的10%。β-葡聚糖酶(Endo-1,3-1,4-β-Glucanase)能专一性地分解大麦β-葡聚糖,产生可利用的还原糖。因此,是啤酒酿造业,农副产品加工业中一个亟待开发应用的重要工业用酶... β-葡聚糖是大麦淀粉质胚乳细胞壁的主要成份,约占大麦总重量的10%。β-葡聚糖酶(Endo-1,3-1,4-β-Glucanase)能专一性地分解大麦β-葡聚糖,产生可利用的还原糖。因此,是啤酒酿造业,农副产品加工业中一个亟待开发应用的重要工业用酶。本文报道了对枯草杆菌(B.SubtiliS 1.88)中分离制备的β-1,3-1,4-葡聚糖酶基本酶学性质的研究结果。1 展开更多
关键词 枯草杆菌 β-萄聚糖酶 酶学性质
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体外活化CD8^+ NKT细胞的肿瘤杀伤作用 被引量:2
11
作者 郭业磊 陈钰 +1 位作者 钟江 张世仑 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期947-949,共3页
目的:探讨超抗原SEB活化并扩增的耐受调节性CD8+ NKT细胞对肿瘤细胞K562和A549的杀伤作用。方法:获取体外扩增0、10、20、30 d的耐受调节性效应细胞与K562和A549肿瘤细胞做混合淋巴细胞培养,MTT方法测定效应细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。... 目的:探讨超抗原SEB活化并扩增的耐受调节性CD8+ NKT细胞对肿瘤细胞K562和A549的杀伤作用。方法:获取体外扩增0、10、20、30 d的耐受调节性效应细胞与K562和A549肿瘤细胞做混合淋巴细胞培养,MTT方法测定效应细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。经荧光抗体染色、流式细胞术(FCM)解析效应细胞表面CD69分子的表达率和NKT细胞亚群百分数。结果:在效靶比20∶1时,效应细胞杀伤K562和A549细胞的百分率分别达到75.4%和67.2%(P<0.05,n=3)。效应细胞的上清液未显示杀伤作用。效应细胞表面CD69分子的表达率随培养时间延长而增加,由0 d的0.11%增加到30 d的98.23%(P<0.01,n=3)。效应细胞中CD8+ NKT细胞亚群随扩增时间延长而增加,由正常值(0 d)的0.36%增加到30 d的41.59%(P<0.05,n=3)。结论:耐受调节性CD8+ NKT细胞在杀伤肿瘤细胞中起了重要作用。杀伤肿瘤细胞的作用机制是效应细胞的直接作用,与游离的细胞因子无关。 展开更多
关键词 CD8+ NKT细胞 超抗原 SEB 肿瘤免疫
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dCTP焦磷酸酶在胃癌组织中的表达和分布及其临床相关性研究 被引量:2
12
作者 徐苓 夏立亮 +5 位作者 宋飞飞 季萍 王树军 张勇 沈立松 王颖 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期172-177,共6页
目的检测d CTP焦磷酸酶(DCTPP1)在胃癌组织中的表达和分布,分析其与临床胃癌病理特征的相关性,探讨DCTPP1参与胃癌发生与发展的可能机制。方法收集胃癌手术患者正常、癌旁和肿瘤组织,Western blotting比较DCTPP1蛋白在3类组织中的表达,... 目的检测d CTP焦磷酸酶(DCTPP1)在胃癌组织中的表达和分布,分析其与临床胃癌病理特征的相关性,探讨DCTPP1参与胃癌发生与发展的可能机制。方法收集胃癌手术患者正常、癌旁和肿瘤组织,Western blotting比较DCTPP1蛋白在3类组织中的表达,免疫组织化学法检测DCTPP1在胃癌肿瘤细胞中的表达和分布,探讨其与胃癌临床病理特征的相关性,分析DCTPP1在不同分期胃癌中的表达和分布。结果来自于同一患者的3类组织样本中,胃癌组织中DCTPP1的表达量明显高于同一个体正常组织和癌旁组织。组织学观察结果显示,DCTPP1在胃癌组织细胞的细胞质及细胞核中均有表达,并且胃癌分期越高,其在细胞核中的表达越多。在伴随淋巴结转移的胃癌样本中,DCTPP1的细胞核表达高于未发生转移的肿瘤样本。结论与正常和癌旁组织相比,DCTPP1在胃癌组织呈现高表达现象,并且其在肿瘤细胞核的富集表达与肿瘤的恶性程度和转移存在一定的统计学相关性。DCTPP1参与调节细胞内异常核苷酸的代谢,其在肿瘤细胞中的高表达和在细胞核中的聚集可能在胃癌的发生与发展过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 胃癌 dCTP焦磷酸酶 病理相关性 淋巴结转移
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甜蛋白的开发与应用研究 被引量:26
13
作者 范长胜 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2001年第12期50-54,共5页
甜蛋白是一类高甜度低热量应用前景广阔的天然甜味剂。本文介绍甜蛋白的开发研究进展 。
关键词 甜蛋白 基因工程 开发 应用 甜味剂
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豆乳的乳酸菌发酵初探 被引量:23
14
作者 郭杰炎 陈惠萍 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期28-31,共4页
利用乳酸菌发酵豆乳,结果表明,如同牛乳一样,豆乳也能提供乳酸菌生长所需的营养物质,并使豆乳的PH下降和产生凝乳现象。但经乳酸菌发酵的豆乳,其酸度远不如酸乳,而且乳酸菌的生长量也低于牛乳(前者仅10~7个/ml,后者达10~8个/ml以上)。... 利用乳酸菌发酵豆乳,结果表明,如同牛乳一样,豆乳也能提供乳酸菌生长所需的营养物质,并使豆乳的PH下降和产生凝乳现象。但经乳酸菌发酵的豆乳,其酸度远不如酸乳,而且乳酸菌的生长量也低于牛乳(前者仅10~7个/ml,后者达10~8个/ml以上)。添加葡萄糖、乳糖等物质于豆乳中,虽有助于提高豆乳的酸度,但效果不甚显著。此外,豆乳经乳酸菌发酵后也不能产生酸牛奶所具有的特殊香味或风味,也未检出双乙酰(丁二酮)和乙醛等物质。 展开更多
关键词 豆乳 乳酸菌 发酵 饮料
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引进酸乳发酵剂菌种的分离、鉴定和性质 被引量:5
15
作者 郭杰炎 韩洪章 +1 位作者 金一刚 邱景玫 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 1990年第4期154-15,共1页
酸乳已日益成为人们喜爱的乳制品。近年来我国陆续引进了几条酸乳生产线和附带的发酵剂。为了探索和了解国外酸乳生产菌株(发酵剂)的菌种特性和种类,我们对上海市牛奶公司引进的酸乳发酵粉剂进行菌种分离和鉴定。结果表明,引进的Ⅰ型和... 酸乳已日益成为人们喜爱的乳制品。近年来我国陆续引进了几条酸乳生产线和附带的发酵剂。为了探索和了解国外酸乳生产菌株(发酵剂)的菌种特性和种类,我们对上海市牛奶公司引进的酸乳发酵粉剂进行菌种分离和鉴定。结果表明,引进的Ⅰ型和Ⅱ型两种发酵剂中,均为保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌两种菌株,这和一般酸乳生产所选用的菌株是相吻合的。一、材料与分析发酵剂来源,上海市牛奶公司提供。 1.菌种分离培养基根据引进酸乳发酵剂所提供的基本情况,参考有关文献资料,我们初步选定了#17[1]、 展开更多
关键词 酸乳 发酵剂 菌种 分离 鉴定 性质
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抗原肽运载体TAP2基因与乙型肝炎病毒感染预后的相关性研究(摘要)
16
作者 夏天 郝妍 +4 位作者 王小华 刘洋 陈兆鹏 沈锡中 朱乃硕 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期96-96,共1页
目的研究上海地区中国人群抗原肽运载体(transporter associated with antigen processing,TAP)基因与HBV感染以及慢性HBV感染和慢性肝炎并发肝硬化之间的相关性。方法收集临床病例,检测乙型肝炎病毒标志,参照“病毒性肝炎防治方案... 目的研究上海地区中国人群抗原肽运载体(transporter associated with antigen processing,TAP)基因与HBV感染以及慢性HBV感染和慢性肝炎并发肝硬化之间的相关性。方法收集临床病例,检测乙型肝炎病毒标志,参照“病毒性肝炎防治方案-2000”,选取101例乙型肝炎病毒感染者,21例HBV感染康复者及113例正常对照,进行TAP2等位基因分型。对数据分组进行统计分析。结果慢性乙型肝炎组的TAP2*0201基因频率显著低于感染恢复组(X^2=4.95,P〈0.03);肝硬化组的TAP2*0101基因频率显著高于正常对照组(X^2=5.72,P〈0.02);在慢性乙型肝炎并发肝硬化组中DR4与TAP2*0101等位基因间存在显著的连锁不平衡(△=0.026,P〈0.05)。结论TAP2*0101等位基因型携带者易感慢性乙型肝炎和乙型肝炎并发肝硬化,而丁AP2*0201则表现出对慢性乙型肝炎的抗性。两者均与HBV感染的预后似有一定相关。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒感染 抗原肽运载体 P2基因 慢性HBV感染 预后 慢性乙型肝炎 等位基因分型 正常对照组 摘要 TA
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耐受性CD8^+ NKT细胞体外增殖能力的鉴定
17
作者 郭业磊 陈钰 +1 位作者 钟江 张世仑 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期170-172,共3页
目的:利用CFSE标记细胞,流式细胞术(FCM)检测法,解析超抗原SEB活化的耐受性CD8+ NKT细胞在体外增殖的情况。方法:利用CFSE标记新鲜分离的C57BL/J鼠脾细胞,分别与ConA和LPS共同培养3d,收集细胞进行荧光染色并用FCM解析细胞表面CD69分子... 目的:利用CFSE标记细胞,流式细胞术(FCM)检测法,解析超抗原SEB活化的耐受性CD8+ NKT细胞在体外增殖的情况。方法:利用CFSE标记新鲜分离的C57BL/J鼠脾细胞,分别与ConA和LPS共同培养3d,收集细胞进行荧光染色并用FCM解析细胞表面CD69分子的表达率和增殖能力。CFSE标记的鼠脾细胞与SEB共培养5d和10d后,荧光染色并用FCM解析细胞表面CD69的百分数和增殖能力。SEB活化的第10天细胞经CFSE标记后在IL-2的协同作用下继续培养10d,荧光染色,FCM解析这群细胞的增殖能力、活性分子CD69的表达率和NKT细胞亚群的变化情况。结果:ConA、LPS和SEB三者均可以刺激小鼠脾细胞增殖。ConA和LPS在3d内可以使细胞增殖3代,且CD69的表达率为74.19%和41.56%;SEB在5d和10d内分别可以使细胞增殖5代和7代,细胞表面CD69的表达率为32.09%和48.66%。SEB活化的10d细胞可以在IL-2的协同下继续传代培养10d,可以增殖7代;这群细胞中CD8+ NKT细胞亚群,由原始的0.36%增加到38.58%;细胞表面CD69分子由正常值的0.11%提高到83.74%。结论:超抗原SEB活化的CD8+ NKT细胞可以在体外进行增殖培养,且这些细胞是活性化的细胞。利用CFSE标记细胞,FCM可以检测耐受性CD8+ NKT细胞在体外的增殖水平。 展开更多
关键词 CD8+ NKT细胞 超抗原 SEB 流式细胞术 CFSE
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耐受调节性CD8^+NKT细胞体外稳定性的研究
18
作者 郭业磊 陈钰 +1 位作者 钟江 张世仑 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期852-855,共4页
目的:探讨超抗原SEB活化并扩增的CD8+NKT细胞耐受调节功能的稳定性。方法:超抗原SEB活化并体外扩增的10 d、20 d、30 d和冻存效应细胞被用于本研究。以正常C57BL/J鼠脾细胞为对照,将各个效应细胞与刺激剂刀豆蛋白(ConA)或脂多糖(LPS)共... 目的:探讨超抗原SEB活化并扩增的CD8+NKT细胞耐受调节功能的稳定性。方法:超抗原SEB活化并体外扩增的10 d、20 d、30 d和冻存效应细胞被用于本研究。以正常C57BL/J鼠脾细胞为对照,将各个效应细胞与刺激剂刀豆蛋白(ConA)或脂多糖(LPS)共同培养72 h,测定效应细胞对刺激剂的应答反应能力。在正常小鼠淋巴细胞与上述刺激剂反应的同时添加各效应细胞,72 h后测定效应细胞抑制正常淋巴细胞对刺激剂的应答反应能力。体外扩增和冻存的效应细胞与异源鼠脾细胞做混合淋巴细胞培养,MTT法测定细胞的增殖情况。效应细胞用荧光抗体染色,用流式细胞术(FCM)解析NKT细胞亚群。结果:与正常淋巴细胞对刺激剂的应答反应能力相比,体外扩增10 d、20 d、30 d和冻存效应细胞对ConA或LPS的应答反应能力明显降低,细胞增殖的A值分别由正常值0.67和0.61分别下降至0.30和0.31,0.28和0.20,0.26和0.24,以及0.22和0.23(P<0.05,n=3)。效应细胞抑制正常淋巴细胞对上述刺激剂ConA或LPS的应答反应,分别由正常值0.67和0.61下降至0.33和0.39,0.30和0.43,0.36和0.43,以及0.26和0.29(P<0.05,n=3)。效应细胞与异源鼠脾细胞反应与对照组相比明显的降低,分别由正常值0.70下降至20 d的0.42,30 d的0.42以及冻存效应细胞的0.54(P<0.05,n=3)。在这群效应细胞中,主要是CD8+NKT细胞,由原始的0.36%增加到41.59%(P<0.05,n=3)。结论:耐受调节性CD8+NKT细胞可以在体外进行传代培养,并且这些传代培养细胞的耐受调节功能依然存在。 展开更多
关键词 CD8+NKT细胞 免疫耐受 超抗原 SEB
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管碟琼脂块法筛选洁霉素产生菌
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作者 范长胜 程皆能 +1 位作者 胡宝龙 陈力 《微生物学杂志》 CAS CSCD 1989年第1期40-42,共3页
尽管采用人工诱变能提高微生物的突变率,但其突变率仍然很低,人们要从中筛选到自己所需理想菌株的机率则更低。因此,在微生物菌种选育中筛选方法显得十分重要。
关键词 产生菌 琼脂块法 菌种选育 突变率 洁霉素 单菌落 抑菌圈直径 链霉菌 管碟法 摇瓶
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食用菌病毒的诊断与病毒的复制
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作者 潘迎捷 陈明杰 +3 位作者 汪昭月 龚胜萍 方炳初 王鸣歧 《食用菌》 北大核心 1989年第5期41-42,共2页
由于病毒颗粒大多以潜伏状态存在于食用菌的菌丝体和子实体中,因此食用菌病毒的诊断是比较困难的。病毒学家们进行了大量的研究,已建立起敏感而又准确的病毒检测方法。目前病毒诊断一般采用以下四种方法:
关键词 食用菌 病毒 诊断 复制
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