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肺腺癌脑转移病理学特征及人类间变性淋巴瘤激酶和表皮生长因子受体诊断价值 被引量:1
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作者 李竹君 毛璐宁 +3 位作者 熊佶 王鑫 卢韶华 刘颖 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 北大核心 2021年第4期272-280,共9页
目的总结肺腺癌脑转移的病理学特征,并探讨人类间变性淋巴瘤激酶(ALK)和表皮生长因子受体(EGFR)的诊断价值。方法收集2013年1月至2016年12月在复旦大学附属华山医院神经外科手术切取的86例非小细胞肺癌脑转移的脑组织标本,经HE染色和免... 目的总结肺腺癌脑转移的病理学特征,并探讨人类间变性淋巴瘤激酶(ALK)和表皮生长因子受体(EGFR)的诊断价值。方法收集2013年1月至2016年12月在复旦大学附属华山医院神经外科手术切取的86例非小细胞肺癌脑转移的脑组织标本,经HE染色和免疫组化染色进行病理学分析,经免疫组化染色检测ALK和EGFR阳性率。结果 86例非小细胞肺癌患者中74例(86.05%)发生肺腺癌脑转移,其病理分型为实体型44例(59.46%)、腺泡型9例(12.16%)、乳头型14例(18.42%)和微乳头型7例(9.46%),与文献报道的原发性肺腺癌的病理分型差异有统计学意义(χ^(2)=97.858,P=0.000)。肺腺癌脑转移ALK阳性率为9.46%(7/74),不同病理分型差异无统计学意义(χ^(2)=1.690,P=0.639);EGFR阳性率为52.70%(39/74),不同病理分型差异有统计学意义(χ^(2)=7.938,P=0.047);突变型EGFR总体阳性率为33.78%(25/74),不同病理分型差异无统计学意义(χ^(2)=1.721,P=0.632),其中EGFR-19阳性率为18.92%(14/74)、EGFR-21为16.22%(12/74)。肺腺癌脑转移患者ALK与EGFR的表达可能存在相互排斥(χ^(2)=12.462,P=0.001)。结论肺腺癌实体型和微乳头型具有较高的脑转移率。肺腺癌脑转移ALK和EGFR表达与原发性肺腺癌相一致,且二者表达可能存在相互排斥。 展开更多
关键词 非小细胞肺 肿瘤转移 受体 表皮生长因子 淋巴瘤 大细胞 间变性 免疫组织化学
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IgA肾病伴系膜区Ⅲ型胶原沉积2例
2
作者 黄洁波 蔡小凡 +4 位作者 赵仲华 张志刚 沈强 王浩 吴慧娟 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期426-430,共5页
型胶原(typeⅢcollagen,ColⅢ)作为间质胶原在正常肾小球内无分布,但Ⅲ型胶原肾病时大量胶原沉积于肾小球系膜区及内皮下。IgA肾病合并Ⅲ型胶原沉积极为罕见。本文报道了2例IgA肾病合并Ⅲ型胶原沉积的患者,经过免疫抑制治疗或中药汤剂... 型胶原(typeⅢcollagen,ColⅢ)作为间质胶原在正常肾小球内无分布,但Ⅲ型胶原肾病时大量胶原沉积于肾小球系膜区及内皮下。IgA肾病合并Ⅲ型胶原沉积极为罕见。本文报道了2例IgA肾病合并Ⅲ型胶原沉积的患者,经过免疫抑制治疗或中药汤剂治疗后,肾功能稳定且尿蛋白水平均明显下降。 展开更多
关键词 肾小球肾炎 IGA肾病 Ⅲ型胶原(ColⅢ) 系膜区
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FATP2在脂质肾毒性中的机制研究进展
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作者 李彦琪 钟佳延 吴慧娟 《复旦学报(医学版)》 北大核心 2025年第2期292-296,共5页
血脂代谢异常和肾脏异位脂质沉积与肾脏病的发生和发展密切相关,特别是在糖尿病肾病中更为明显。临床上常用的治疗高胆固醇血症的药物,如他汀类、依泽麦布和前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin/Kexin type 9,PCS... 血脂代谢异常和肾脏异位脂质沉积与肾脏病的发生和发展密切相关,特别是在糖尿病肾病中更为明显。临床上常用的治疗高胆固醇血症的药物,如他汀类、依泽麦布和前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin/Kexin type 9,PCSK9)抑制剂,虽都能有效降低血脂水平,但均不能延缓肾脏病进展。近年来,越来越多的研究开始关注游离脂肪酸(free fat acids,FFA)对肾脏的影响。慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者存在明显的脂肪酸代谢紊乱,这种异常参与肾脏病进展,FFA的转运蛋白在肾脏疾病中的作用机制逐渐被认识。本文就近端肾小管上皮细胞表达的脂肪酸转运蛋白2(fatty acid transport protein 2,FATP2)的临床前研究做一综述。 展开更多
关键词 脂肪酸转运蛋白2(FATP2) 慢性肾脏病(CKD) 近端肾小管 脂毒性 游离脂肪酸(FFA)
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疫情期间本科生病理解剖学课程在线考试的探讨与实践 被引量:9
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作者 王漱阳 刘秀萍 +1 位作者 张志刚 曾勇 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期71-75,共5页
目的探讨COVID-19疫情期间本科生病理解剖学课程在线考试的可行性和实践流程。方法运用复旦大学在线教育中心的超星在线考试系统对临床医学八年制专业本科生"病理解剖学"课程进行考前准备、考试监考和考后阅卷及试卷分析。结... 目的探讨COVID-19疫情期间本科生病理解剖学课程在线考试的可行性和实践流程。方法运用复旦大学在线教育中心的超星在线考试系统对临床医学八年制专业本科生"病理解剖学"课程进行考前准备、考试监考和考后阅卷及试卷分析。结果共有151名八年制学生参加了在线考试。通过系统内"限时进入"和"限时提交"的设定,可以实现时间的公平和公正性。通过增加分析、归纳、比较类题目,减少记忆类考题,可使试卷总体难度系数(P=0.81)与往年同期线下考试相当。通过模拟测试演练使得老师和考生熟悉考试流程、完善考试设备:学生在正式考试中使用PC端电脑平台网页进行答题的比例比模拟测试时上升约2%,手机平台答题降低4%。结论本次在线考试总体运行平稳,成绩分布合理。考试平台的选择应适用于全体考生。考前,应充分考虑线上考试场景的特殊性并提前进行模拟测试和考试备案设计。线上考试的组卷和出题应适当进行调整。 展开更多
关键词 线上考试 网络教学 医学本科教学 病理解剖学
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56例肾淀粉样变性的病理分型及临床分析 被引量:6
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作者 覃乔静 常凯利 +1 位作者 赵仲华 刘学光 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期188-194,共7页
目的分析肾淀粉样变性的组织学特点及临床表现,提高对该病的诊断水平。方法回顾性分析复旦大学基础医学院病理学系2007年1月至2016年7月肾活检病例中确诊的56例肾淀粉样变性,经免疫染色检测肾组织中免疫球蛋白轻链κ、λ及淀粉样蛋白A(a... 目的分析肾淀粉样变性的组织学特点及临床表现,提高对该病的诊断水平。方法回顾性分析复旦大学基础医学院病理学系2007年1月至2016年7月肾活检病例中确诊的56例肾淀粉样变性,经免疫染色检测肾组织中免疫球蛋白轻链κ、λ及淀粉样蛋白A(amyloid A,AA)的表达,并分析病理形态学特点及临床表现。结果56例肾淀粉样变性的发病年龄为(58.6±9.3)岁,高峰年龄段为50~69岁。42例(75.0%)临床表现为肾病综合征,10例(17.9%)伴2个或以上多器官淀粉样物质沉积。刚果红染色、偏振光显微镜及电镜检查显示淀粉样物广泛沉积于肾小球、肾小管基膜、间质及血管壁,肾小球重度沉积者24 h尿蛋白定量显著高于轻度沉积者。43例(76.8%)为AL型(36例ALλ型、7例ALκ型),3例(5.4%)为AA型,其余10例(17.9%)免疫染色均为阴性。46例确定分型的病例中,免疫染色显示多种免疫球蛋白及补体轻度沉积于各型尤其ALλ型,电镜下多未发现电子致密物沉积,提示为非特异性沉积。电镜检查显著提高早期病变的检出率。结论ALλ型是本组肾淀粉样变性最常见的病理类型;电镜检查可显著提高其早期病变的确诊率;应常规应用免疫染色确定前体蛋白类型,必要时应进行质谱分析。 展开更多
关键词 淀粉样变性 肾脏 病理分型 临床分析
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人工神经网络算法在消化道恶性肿瘤病理诊断及患者预后预测中的应用 被引量:4
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作者 肖雅 王漱阳 +1 位作者 凌人 宋毓飞 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期243-248,共6页
消化道恶性肿瘤相关的人工神经网络诊断研究成为人工智能研究热点领域。研究工具主要集中在基于卷积神经网络的模型开发上,少部分采用卷积神经网络与循环神经网络联用的方式;研究内容方面则聚焦于基于人工神经网络实现经典组织病理学诊... 消化道恶性肿瘤相关的人工神经网络诊断研究成为人工智能研究热点领域。研究工具主要集中在基于卷积神经网络的模型开发上,少部分采用卷积神经网络与循环神经网络联用的方式;研究内容方面则聚焦于基于人工神经网络实现经典组织病理学诊断、利用人工神经网络进行肿瘤分子分型诊断以及预测患者预后情况。本文综述了消化道恶性肿瘤病理诊断及预后预测中人工神经网络算法的相关研究。 展开更多
关键词 人工神经网络 算法 消化道恶性肿瘤 病理诊断 预后预测 综述
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大鼠肾系膜细胞饰胶蛋白聚糖乙酰化可增强其蛋白质稳定性和功能
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作者 李元臣 徐玉音 +3 位作者 刘曦 丁心怡 吴慧娟 张志刚 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期191-198,共8页
目的通过细胞学研究检测大鼠肾系膜细胞饰胶蛋白聚糖(decorin,DCN)的乙酰化及其对系膜细胞泛素化的影响作用。方法体外培养大鼠肾系膜细胞,应用免疫共沉淀、蛋白质电泳分析及RT-PCR等检测DCN的表达改变。结果大鼠肾系膜细胞存在DCN乙酰... 目的通过细胞学研究检测大鼠肾系膜细胞饰胶蛋白聚糖(decorin,DCN)的乙酰化及其对系膜细胞泛素化的影响作用。方法体外培养大鼠肾系膜细胞,应用免疫共沉淀、蛋白质电泳分析及RT-PCR等检测DCN的表达改变。结果大鼠肾系膜细胞存在DCN乙酰化修饰,且DCN的乙酰化修饰抑制了DCN泛素化降解,促进了DCN蛋白质的稳定。此外增强DCN乙酰化修饰可促进转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)以及Ⅳ型胶原的下调,同时抑制肾系膜细胞的生长。结论 DCN乙酰化修饰可抑制DCN降解,增强DCN抗肾炎的作用,在防治系膜细胞增生性肾炎中可作为潜在的干扰靶点。 展开更多
关键词 饰胶蛋白聚糖 乙酰化 泛素化
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头颈部肿瘤CT灌注成像与微血管密度(MVD)的相关性研究 被引量:5
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作者 王杰 唐作华 +5 位作者 王纾宜 曾文娇 钱雯 吴灵捷 王文忠 罗剑锋 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期581-588,共8页
目的研究头颈部肿瘤CT灌注成像和微血管密度(microvessel density,MVD)的相关性,探讨其在评价肿瘤血管丰富程度及鉴别良、恶性肿瘤中的应用价值。方法将41例头颈部肿瘤分成3组:A组16例,良性乏血供肿瘤;B组13例,良性富血供肿瘤;C组12例,... 目的研究头颈部肿瘤CT灌注成像和微血管密度(microvessel density,MVD)的相关性,探讨其在评价肿瘤血管丰富程度及鉴别良、恶性肿瘤中的应用价值。方法将41例头颈部肿瘤分成3组:A组16例,良性乏血供肿瘤;B组13例,良性富血供肿瘤;C组12例,恶性肿瘤。术前对所有肿瘤行CT灌注检查,用后处理软件绘制时间-密度曲线(time density curve,TDC),并计算感兴趣区的最大密度投影(maximum intensity projection,MIP)、血容量(blood volume,BV)、血流量(blood flow,BF)、平均通过时间(mean transit time,MTT)和毛细血管通透性(capillary permeability,CP)等参数。同时切取与CT灌注相同层面的组织切片,行CD34抗体免疫组织化学染色,观察分析各CT灌注成像在3组肿瘤之间表现的差异及其与MVD的相关性。结果头颈部肿瘤CT灌注成像TDC显示,良性肿瘤(A组+B组)出现I型TDC的频率明显高于恶性肿瘤(C组)(P=0.003),恶性肿瘤中以Ⅱ型和Ⅲ型TDC为主。B组和C组的MIP、BV及BF均比A组明显高(P<0.01)。MVD在3组肿瘤之间差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关性分析表明在3组肿瘤中MVD与MIP、BV均呈正相关(P<0.05,r值分别为0.41,0.352)。结论 CT灌注成像的TDC形态、MIP和BV等可间接反映头颈部肿瘤血管生成情况,结合MVD有助于鉴别良性乏血供肿瘤、良性富血供肿瘤及恶性肿瘤。 展开更多
关键词 头颈部肿瘤 体层摄影术 X线计算机 灌注成像 微血管密度(MVD)
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中药治疗1例脂蛋白肾病 被引量:3
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作者 薛汝群 陈万佳 +3 位作者 钟逸斐 赵仲华 蔡小凡 刘学光 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期392-394,共3页
脂蛋白肾小球病(lipoprotein glomerulopathy,LPG)也称脂蛋白肾病,是一种较为罕见的常染色体隐性遗传病,组织学特征为肾小球毛细血管腔内脂蛋白性血栓形成,临床常表现为脂质代谢障碍、严重蛋白尿并最终进展至肾功能衰竭。近期上海中... 脂蛋白肾小球病(lipoprotein glomerulopathy,LPG)也称脂蛋白肾病,是一种较为罕见的常染色体隐性遗传病,组织学特征为肾小球毛细血管腔内脂蛋白性血栓形成,临床常表现为脂质代谢障碍、严重蛋白尿并最终进展至肾功能衰竭。近期上海中医药大学附属龙华医院肾内科诊断1例LPG,以中医药治疗取得较好疗效,报告如下。 展开更多
关键词 脂蛋白肾病 肾小球 中药
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megsin干扰质粒对大鼠Thy1肾炎病变的拮抗作用 被引量:1
10
作者 李毅 余怡文 +4 位作者 关运 姜姝君 徐玉音 赵仲华 张志刚 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期70-75,共6页
目的应用大鼠Thy1肾炎模型体外输入megsin siRNA干扰质粒,观察下调megsin表达后对大鼠肾炎中肾小球系膜细胞和基质增生的抑制作用。方法雄性SD大鼠共9只,随机等分为对照组(A组),Thy1肾炎模型组(B组)和质粒组(C组)。C组为肾炎模型加肾动... 目的应用大鼠Thy1肾炎模型体外输入megsin siRNA干扰质粒,观察下调megsin表达后对大鼠肾炎中肾小球系膜细胞和基质增生的抑制作用。方法雄性SD大鼠共9只,随机等分为对照组(A组),Thy1肾炎模型组(B组)和质粒组(C组)。C组为肾炎模型加肾动脉注射megsin siRNA质粒,并辅以电穿孔技术促进质粒浸入肾脏。肾脏标本行real-time PCR、HE染色、PAS染色和megsin、PCNA的免疫组化染色。结果与对照组比较,HE染色结果可见B组肾小球系膜细胞明显增生伴基质增多,而C组肾小球细胞数量明显少于B组,但多于A组;PAS染色可见B组肾小球系膜区基质大量增多,呈节段性分布,C组则与之相比基质增生减少;RT-PCR和免疫组化结果显示B组肾小球中megsin mRNA和蛋白质水平明显升高,与A组相比两指标差异均有统计学意义(P<0.01),而在C组megsin mRNA和蛋白质水平又明显下降,与A、B组相比两指标差异有统计学意义(P<0.05)。PCNA阳性细胞核平均数A组为3个,B组14.79个,而C组仅为6.94个。统计显示B组和A组、B组和C组之间差异均有统计学意义(P<0.001)。结论注射megsin干扰质粒以后,系膜细胞、基质的增生均受到抑制,肾炎病变减轻,提示megsin干扰质粒体外转染具有拮抗大鼠Thy1肾炎的作用,这为探索以系膜细胞增生为特征的肾脏疾病的防治提供了新的思路和依据。 展开更多
关键词 megsin干扰质粒 Thy1肾炎 系膜细胞增生 大鼠
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大鼠急性肾缺血再灌注损伤早期的基因表达 被引量:1
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作者 林俊毅 茅幸 +1 位作者 吴慧娟 薛爱民 《法医学杂志》 CAS CSCD 2016年第6期401-405,409,共6页
目的研究急性肾缺血再灌注损伤早期的差异基因表达,探索其潜在的分子机制。方法通过单纯夹闭大鼠肾动脉制备肾缺血再灌注模型,进行基因表达芯片检测和生物信息学分析,筛选急性肾损伤早期的差异基因表达及其所涉及的细胞活动和信号通路... 目的研究急性肾缺血再灌注损伤早期的差异基因表达,探索其潜在的分子机制。方法通过单纯夹闭大鼠肾动脉制备肾缺血再灌注模型,进行基因表达芯片检测和生物信息学分析,筛选急性肾损伤早期的差异基因表达及其所涉及的细胞活动和信号通路。同时,通过构建差异表达基因的生物网络来寻找与急性肾损伤关系密切的分子,并进行荧光定量PCR验证。结果在检测出的151个差异表达基因中,132个基因显著上调,19个基因显著下调,GO与KEGG通路富集分析结果显示主要与细胞增殖、细胞因子介导的信号通路和免疫反应等有关。荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,挑选出的3个与急性肾损伤高度相关的基因(ANXA1、PHLDA1、KLF6)在疾病早期具有显著的表达差异,上升倍数与芯片检测出的倍数基本一致。结论本研究揭示了急性肾损伤早期的差异基因表达特征以及所涉及的生物学过程和信号通路,其中ANXA1、PHLDA1、KLF6可能在急性肾损伤的发病机制中起到一定作用。 展开更多
关键词 法医病理学 再灌注损伤 差异基因表达 生物信息学
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尸检发现空肠异位胰腺1例 被引量:4
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作者 薛汝群 刘学光 +1 位作者 朱虹光 谭聪 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期548-549,共2页
异位胰腺(heterotopic pancreas),又称迷走胰腺或副胰腺,其定义是胰腺组织未在正常解剖学位置,且与正常胰腺组织之间无任何解剖、血管或神经联系。由Jean-Schultz于1727年首先在回肠憩室发现并报道。异位胰腺发生率极低,临床通常在胃... 异位胰腺(heterotopic pancreas),又称迷走胰腺或副胰腺,其定义是胰腺组织未在正常解剖学位置,且与正常胰腺组织之间无任何解剖、血管或神经联系。由Jean-Schultz于1727年首先在回肠憩室发现并报道。异位胰腺发生率极低,临床通常在胃镜检查或上腹部手术时意外发现,或在尸检时偶然发现。 展开更多
关键词 异位胰腺 空肠 尸检 病理 误诊
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肿瘤干细胞在乙型肝炎病毒相关肝细胞癌中的研究进展 被引量:1
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作者 邱小锋 朱荣 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期610-614,共5页
肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是一种很常见的恶性肿瘤,流行病学和临床病理学研究发现其多发生在肝脏原有病变的基础上。在中国,长期慢性的乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是HCC发生的主要危险因子。肿瘤干细胞(canc... 肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是一种很常见的恶性肿瘤,流行病学和临床病理学研究发现其多发生在肝脏原有病变的基础上。在中国,长期慢性的乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是HCC发生的主要危险因子。肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)理论认为HCC的起始细胞(tumor initial cell,TIC)是CSC,但其中的机制尚不明确,特别是CSC在HBV相关HCC发生和发展中的作用。本文就肿瘤干细胞在HBV相关HCC发病中的机制及CSC标志物在临床诊疗和预后评估等方面的最新研究进展作一总结。 展开更多
关键词 肿瘤干细胞 肝细胞癌 乙型肝炎病毒
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肾上腺髓质肽在大鼠足细胞损伤模型中调控肾小球壁层上皮细胞分化 被引量:2
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作者 薛汝群 杨望 +2 位作者 张敏 赵仲华 刘学光 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期611-619,共9页
目的探讨肾上腺髓质肽(adrenomedullin,AM)是否通过调控肾小球壁层上皮细胞(parietal epithelial cells,PECs)分化参与对大鼠足细胞损伤模型的保护作用及可能的分子机制。方法雄性SD大鼠经一次性腹腔注射嘌呤霉素氨基核苷(puromycinamin... 目的探讨肾上腺髓质肽(adrenomedullin,AM)是否通过调控肾小球壁层上皮细胞(parietal epithelial cells,PECs)分化参与对大鼠足细胞损伤模型的保护作用及可能的分子机制。方法雄性SD大鼠经一次性腹腔注射嘌呤霉素氨基核苷(puromycinaminonucleoside,PAN)(15 mg/100 g体重)建立足细胞损伤模型,随机分为模型组和治疗组,治疗组每天经尾静脉注射AM蛋白质(6.6μg/100 g体重)。分别在首次注射PAN后7、14和21天,观察大鼠尿蛋白水平及肾组织形态改变,并经免疫组化染色、双重或三重免疫荧光染色,检测足细胞数量、肾小球AM的表达、PECs分化以及Notch3表达变化。结果大鼠PAN肾病模型表现为大量蛋白尿、肾小球节段性损伤、足细胞计数显著减少。AM/claudin-1双重荧光染色显示PECs中AM表达显著增强且出现于毛细血管袢内。AM治疗可改善大鼠尿蛋白及肾组织形态,减少足细胞丢失,14天时显著增加共表达PECs(claudin-1)及足细胞特异性标志蛋白(WT-1和synaptopodin)的细胞数。Ki67与claudin-1共定位表达于PECs,但未与WT-1共表达。AM显著抑制由PAN所致的Notch3表达。结论在大鼠PAN足细胞损伤模型中,PECs中AM表达上调提示机体的一种代偿性保护机制,AM可能通过下调Notch3信号通路而促进PECs分化,参与其促进损伤后修复的作用。 展开更多
关键词 肾上腺髓质肽 壁层上皮细胞 足细胞 嘌呤霉素氨基核苷 NOTCH 大鼠
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星形胶质细胞瘤IDH1突变对TAZ蛋白表达的影响
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作者 李宁宁 熊佶 +2 位作者 汪寅 朱静静 刘颖 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期379-384,共6页
目的研究星形胶质细胞瘤异柠檬酸脱氢酶1(isocitrate dehydrogenase 1,IDH1)突变对TAZ(transcriptional coactivator with PDZ-binding motif)蛋白的影响,并探讨相关机制。方法采用稳定转染突变型IDH1-132H(132H)及野生型IDH1-132R(WT)... 目的研究星形胶质细胞瘤异柠檬酸脱氢酶1(isocitrate dehydrogenase 1,IDH1)突变对TAZ(transcriptional coactivator with PDZ-binding motif)蛋白的影响,并探讨相关机制。方法采用稳定转染突变型IDH1-132H(132H)及野生型IDH1-132R(WT)的胶质母细胞瘤(U87MG)细胞,通过Western blot法检测细胞内TAZ蛋白表达;免疫组化法检测14例IDH1突变阴性和7例IDH1突变阳性的人脑胶质母细胞瘤组织样本中TAZ蛋白及其胞质结合蛋白14-3-3e的表达差异;qRT-PCR观察两组细胞TAZ在mRNA水平有无差异;Western blot方法检测Hippo信号通路核心激酶LATS1及磷酸化TAZ蛋白的表达,以及14-3-3e蛋白的表达。结果 Western blot结果表明IDH1突变的星形胶质细胞瘤中TAZ蛋白表达降低;人体胶质细胞瘤组织的免疫组织化学结果与Western blot一致,证实了IDH1突变的星形胶质细胞瘤中TAZ胞浆结合蛋白14-3-3e表达升高;qRT-PCR发现IDH1突变细胞TAZ mRNA水平相比野生型细胞表达明显降低;IDH1突变细胞中,LATS1以及TAZ磷酸化水平升高且细胞14-3-3e蛋白表达升高。结论星形胶质细胞瘤IDH1突变导致TAZ mRNA及蛋白水平表达降低,并通过活化Hippo信号通路影响TAZ蛋白的磷酸化水平从而影响TAZ表达。 展开更多
关键词 星形胶质细胞瘤 IDH1突变 TAZ蛋白 Hippo信号通路 14-3-3e蛋白
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miR-133a对恶性黑色素瘤的膜突蛋白表达及侵袭能力的影响
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作者 Aparicio Avichacra Carlos Edgar Emilio 王继纲 +3 位作者 杨海萍 丁笛 刘秀萍 许祖德 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期498-502,共5页
目的探讨微小RNA-133a(micro RNA-133a,miR-133a)对人类恶性黑色素瘤(malignant melanoma,MM)的膜突蛋白(moesin)表达及体外迁移侵袭能力的调节作用。方法以脂质体介导质粒体外转染的方法上调MM细胞系SK-mel-28和A375中的miR-133a的表... 目的探讨微小RNA-133a(micro RNA-133a,miR-133a)对人类恶性黑色素瘤(malignant melanoma,MM)的膜突蛋白(moesin)表达及体外迁移侵袭能力的调节作用。方法以脂质体介导质粒体外转染的方法上调MM细胞系SK-mel-28和A375中的miR-133a的表达水平,然后采用RT-PCR和Western blot法检测moesin的表达水平,采用划痕实验和Transwell实验检测moesin的迁移和侵袭能力。结果MM细胞系中miR-133a的表达均明显低于正常黑色素细胞,而moesin的表达(RNA和蛋白)则高于正常黑色素细胞。MM细胞中miR-133a上调后moesin表达显著下降,细胞的侵袭能力也显著降低。结论 MM中miR-133a可能对moesin的表达有一定的调控作用,这种调控机制可能与MM的侵袭转移相关。 展开更多
关键词 恶性黑色素瘤 膜突蛋白 miRNA-133a 侵袭
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活化的大鼠肝星状细胞赖氨酸乙酰化蛋白质组学分析
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作者 翟颖真 丁笛 +2 位作者 侯陈建 陶丽丽 刘秀萍 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期513-521,共9页
目的对活化的大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)进行赖氨酸乙酰化(lysine acetylation,Kac)蛋白质组学分析。方法于清洁级雄性SD大鼠中提取并培养原代HSCs,分为对照组(培养<2天)和活化组(培养≥10天)。对两组细胞进行裂解... 目的对活化的大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)进行赖氨酸乙酰化(lysine acetylation,Kac)蛋白质组学分析。方法于清洁级雄性SD大鼠中提取并培养原代HSCs,分为对照组(培养<2天)和活化组(培养≥10天)。对两组细胞进行裂解,iTRAQ/TMT标记后的成对肽段样品采用乙酰化抗体进行亲和富集,应用高分辨率LC-MS/MS技术进行质谱鉴定。最后对质谱鉴定的乙酰化蛋白质进行生物信息学分析。结果应用LC-MS/MS技术、GO注释和KEGG通路等生物信息学分析方法,共确定309种蛋白质中的470个Kac位点。对其中150个蛋白质的231个Kac位点进行肽段定量研究,与静息的HSCs相比,在活化的HSCs中有109个蛋白质的乙酰化肽段数目增加,18个蛋白质的乙酰化肽段数目减少,并涉及多种GO分类和KEGG通路。乙酰化蛋白质广泛定位于胞质(38.1%)和线粒体(30.2%)。基于GO富集的聚类分析显示Kac位点主要与能量代谢相关;基于KEGG通路的聚类分析显示这些蛋白质广泛参与三羧酸循环,与线粒体关系密切。结论首次对HSCs的Kac蛋白质进行质谱分析,并对发生乙酰化的蛋白质位点进行量化鉴定,为揭示蛋白质乙酰化在HSCs活化过程中的作用提供了一定的基础,并为抑制肝纤维化提供了潜在的分子靶标。 展开更多
关键词 肝星状细胞 赖氨酸乙酰化 LC-MS/MS 翻译后修饰 大鼠
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Rac1及Cdc42在肾上腺髓质肽(AM)缓解嘌呤霉素氨基核苷(PAN)所诱导足细胞损伤中作用机制的初步探讨 被引量:2
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作者 覃乔静 常凯利 +3 位作者 孟利霞 董楠 赵仲华 刘学光 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期496-505,共10页
目的观察肾上腺髓质肽(adrenomedullin,AM)对嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PAN)所诱导受损足细胞的作用以及Rac1/Cdc42表达变化,初步探讨其可能机制。方法将小鼠肾足细胞株分为对照组、PAN处理组(100μg/mL)、PAN联合AM... 目的观察肾上腺髓质肽(adrenomedullin,AM)对嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PAN)所诱导受损足细胞的作用以及Rac1/Cdc42表达变化,初步探讨其可能机制。方法将小鼠肾足细胞株分为对照组、PAN处理组(100μg/mL)、PAN联合AM处理组(10-7mol/L)及PAN联合AM和蛋白激酶A(PKA)抑制剂H89(10-6mol/L)处理组。经一次性腹腔注射PAN(150 mg/kg)建立大鼠足细胞损伤模型,每天经尾静脉注射AM蛋白(66μg/kg)进行干预。SDS-PAGE法检测尿蛋白水平,电镜观察足细胞足突宽度变化,双重免疫荧光染色及/或Western blot观察足细胞特异性骨架蛋白(synaptopodin、nephrin)、Rac1及Cdc42的蛋白表达水平,实时定量PCR(qRT-PCR)检测synaptopodin、nephrin的mRNA表达,谷胱甘肽巯基转移酶-拉下实验(GST-pull down assay)法检测Rac1及Cdc42活性变化。结果PAN在体内、外均显著降低synaptopodin、nephrin的蛋白或/及mRNA表达水平,且显著升高desmin表达;大鼠PAN肾病模型的尿蛋白水平显著升高,足突宽度显著增加;PAN显著降低Rac1、Cdc42总蛋白及活性水平。上述由PAN所介导的效应被AM显著抑制;H89显著阻断AM的体外作用。结论AM主要通过PKA通路促进受损足细胞的修复,该保护机制与AM调控Rac1/Cdc42表达密切相关。 展开更多
关键词 肾上腺髓质肽(AM) Rho GTPases 足细胞 嘌呤霉素氨基核苷(PAN) 细胞骨架蛋白 大鼠
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同位素标记相对与绝对定量技术筛选出Vinculin蛋白在进展期胃癌组织中低表达及其预后意义 被引量:2
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作者 卢珊 张磊 +3 位作者 苏莹 侯陈建 王美丽 刘秀萍 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期194-200,共7页
目的应用同位素标记相对与绝对定量蛋白组学(isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ)技术鉴定和筛选进展期胃癌复发转移相关的差异蛋白;检测筛选出的目标蛋白Vinculin表达水平及其预后意义。方法应用iTRAQ技术... 目的应用同位素标记相对与绝对定量蛋白组学(isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ)技术鉴定和筛选进展期胃癌复发转移相关的差异蛋白;检测筛选出的目标蛋白Vinculin表达水平及其预后意义。方法应用iTRAQ技术在正常胃黏膜组织组、胃癌复发组和胃癌未复发组,检测差异表达的蛋白。然后选取差异性表达显著的Vinculin蛋白,采用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)技术在110例人胃癌组织标本中检测其表达情况,并统计分析Vinculin蛋白表达量与临床病理学指标的关系;采用Kaplan-Meier生存曲线分析,探究Vinculin蛋白表达与胃癌患者生存期的关系。结果Vinculin蛋白主要表达于细胞质中近胞膜处;在110例人胃癌组织标本中,Vinculin蛋白阳性表达46例(41.8%),缺失表达64例(58.2%)。统计结果显示,Vinculin蛋白缺失表达与淋巴结转移(P=0.018)、肿瘤TNM分期(P=0.022)、血管侵袭(P=0.002)显著正相关。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,Vinculin缺失表达与胃癌患者不良预后正相关(P=0.011)。结论Vinculin蛋白缺失表达与肿瘤转移和预后不良相关,提示其表达可以作为预测胃癌侵袭转移的潜在指标。 展开更多
关键词 VINCULIN 胃癌 预后 侵袭 转移
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Lamp2a表达下调对肝癌细胞侵袭迁移能力的影响 被引量:1
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作者 余思颖 金晓霞 +1 位作者 高攀 张农 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期696-702,共7页
目的研究溶酶体相关蛋白2a(lysossomal associated protein 2a,Lamp2a)在肝细胞性肝癌中的表达情况及其生物学影响,探讨相关的机制。方法采用siRNA瞬时转染高侵袭性细胞株MHCC-97H和SMMC-7721以降低Lamp2a表达,Western blot检测Lamp2a... 目的研究溶酶体相关蛋白2a(lysossomal associated protein 2a,Lamp2a)在肝细胞性肝癌中的表达情况及其生物学影响,探讨相关的机制。方法采用siRNA瞬时转染高侵袭性细胞株MHCC-97H和SMMC-7721以降低Lamp2a表达,Western blot检测Lamp2a蛋白水平的表达量,qRT-PCR验证Lamp2a的干扰效果,观察Lamp2a在mRNA水平的表达变化。用Transwell小室分析干扰后肝癌细胞株的侵袭和迁移能力的改变。用Western blot和qRT-PCR检测Lamp2a调控肝癌相关侵袭转移的标志物。结果体外实验表明,下调Lamp2a可以抑制肝癌细胞的侵袭迁移;qRT-PCR检测上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关指标波形蛋白、N-钙黏素表达下降,E-钙黏素表达增加。结论 Lamp2a可能通过EMT相关通路促进肝癌细胞的侵袭迁移。 展开更多
关键词 肝细胞性肝癌 溶酶体相关蛋白2a 上皮间充质转化
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