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抗乙型肝炎病毒S抗原全人单克隆抗体的制备和表位探究
被引量：
2
1
作者
佀传亚
潘少坤
+4 位作者
凌志洋
伊春艳
邓志瑞
谢幼华
孙兵
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第7期1029-1033,共5页
目的:针对乙型肝炎病毒S蛋白,制备全人单克隆抗体,对其亲和力、中和病毒活性及抗体所结合的抗原表位进行研究。所制备的全人抗体可应用于乙肝病毒的暴露后预防,为阻断母婴传播提供治疗手段。方法:通过流式分选和单细胞RT-PCR技术获得单...
目的:针对乙型肝炎病毒S蛋白,制备全人单克隆抗体,对其亲和力、中和病毒活性及抗体所结合的抗原表位进行研究。所制备的全人抗体可应用于乙肝病毒的暴露后预防,为阻断母婴传播提供治疗手段。方法:通过流式分选和单细胞RT-PCR技术获得单克隆抗体;利用间接ELISA法检测抗体结合活性,进行表位分析;Hep G2-NTCP细胞用于病毒感染,KHB乙型肝炎病毒e抗原诊断试剂盒检测细胞上清中HBe Ag的指标。结果:获得三株具有中和活性,可以结合三种乙肝病毒亚型S蛋白的抗体,其中1F2、2A1两株抗体的结合依赖于抗原蛋白的天然构象,2H2抗体的结合依赖于连续的氨基酸序列;1F2、2H2抗体结合的位置位于S蛋白胞外区第一个免疫环状区域。结论:利用单细胞RT-PCR技术成功制备了针对乙肝病毒S蛋白的抗体,其具有中和作用。抗原表位位于S蛋白胞外区的第一个免疫环状区域内。
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关键词
乙型肝炎
全人单克隆抗体
单细胞RT-PCR
中和活性
抗体表位
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职称材料
活细胞成像技术实时追踪荧光蛋白标记的分枝杆菌的胞内增殖
被引量：
1
2
作者
乔可
王晴岚
+1 位作者
李紫煜
牛辰
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第3期384-388,共5页
目的 利用绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）标记和活细胞显微成像的方法,实时追踪分枝杆菌在巨噬细胞内的增殖过程。方法 用经GFP标记的野生型海分枝杆菌（Mycobacterium marinum,Mm）分别侵染未激活和γ-干扰素激活的巨...
目的 利用绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）标记和活细胞显微成像的方法,实时追踪分枝杆菌在巨噬细胞内的增殖过程。方法 用经GFP标记的野生型海分枝杆菌（Mycobacterium marinum,Mm）分别侵染未激活和γ-干扰素激活的巨噬细胞,使用活细胞显微成像系统连续记录胞内分枝杆菌的增殖动态,同时优化不同细胞接种浓度和感染复数（multiplicity of infection,MOI）对胞内菌增殖动态的追踪效果。结果 使用GFP标记和活细胞成像的方法可以实时追踪胞内分枝杆菌的增殖过程和形态学变化。γ干扰素对Mm在巨噬细胞中的增殖有抑制作用。当接种巨噬细胞浓度为1×105/孔,MOI为1时,可直观清晰地分析实时追踪图像中胞内菌的增殖过程。结论 通过活细胞成像技术分析荧光蛋白标记的分枝杆菌,可实时追踪巨噬细胞内分枝杆菌增殖过程和形态学变化,是一种体外分析胞内分枝杆菌增殖的理想方法,可应用于其他相关病原菌和宿主相互作用及影响因素的研究。
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关键词
海分枝杆菌(Mm)
巨噬细胞
活细胞成像
细菌增殖
感染复数(MOI)
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职称材料
靶向融合肽IL-4Rα-lytic对原发性渗出性淋巴瘤的抑制作用
被引量：
1
3
作者
郑响
陈小亭
+1 位作者
蔡启良
魏芳
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第3期175-180,共6页
目的:探讨靶向融合肽IL-4Rα-lytic对卡波西肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)阳性原发性渗出性淋巴瘤(PEL)细胞的体内外杀伤作用及其安全性。方法:应用MTT法检测IL-4Rα-lytic对KSHV阳性PEL细胞BCBL-1和BCP-1的杀伤能力。通过FCM检测IL-4Rα-lyti...
目的:探讨靶向融合肽IL-4Rα-lytic对卡波西肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)阳性原发性渗出性淋巴瘤(PEL)细胞的体内外杀伤作用及其安全性。方法:应用MTT法检测IL-4Rα-lytic对KSHV阳性PEL细胞BCBL-1和BCP-1的杀伤能力。通过FCM检测IL-4Rα-lytic诱导KSHV阳性PEL细胞凋亡的情况。建立BCBL-1细胞小鼠移植瘤模型,连续3周(3次/周)腹腔注射IL-4Rα-lytic后,通过活体生物发光成像技术评估IL-4Rα-lytic对小鼠体内BCBL-1细胞移植瘤的抑制效果,并通过H-E染色和全血分析法检测其毒副作用。结果:靶向融合肽IL-4Rα-lytic在体外对两种KSHV阳性PEL细胞BCBL-1和BCP-1均有选择性杀伤作用(均P<0.01),并且可以在短时间内发挥杀伤作用(均P<0.01)。靶向融合肽IL-4Rα-lytic可诱导KSHV阳性PEL细胞BCBL-1和BCP-1凋亡(均P<0.05)。靶向融合肽IL-4Rα-lytic显著抑制BCBL-1细胞小鼠移植瘤的生长,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05),并且无明显的器官毒性(均P>0.05),同时不会造成体质量异常(P>0.05)。结论:靶向融合肽IL-4Rα-lytic在体内外均显著抑制KSHV阳性PEL细胞的生长,且无明显毒副作用,有望为PEL的治疗提供一种新的治疗方案。
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关键词
原发性渗出性淋巴瘤
靶向融合肽
卡波西肉瘤相关疱疹病毒
IL-4Rα
裂解肽
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职称材料
题名
抗乙型肝炎病毒S抗原全人单克隆抗体的制备和表位探究
被引量：
2
1
作者
佀传亚
潘少坤
凌志洋
伊春艳
邓志瑞
谢幼华
孙兵
机构
上海
大学
生命科学
学院
复旦大学
基础
医学院
中国科
学院
上海巴斯德研究所
中国科
学院
生物化学与细胞生物学研究所
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第7期1029-1033,共5页
基金
国家重点基础研究发展计划(2015CB554302)
上海市2016年度"科技创新行动计划"生物医药领域产学研医合作项目(16DZ1910100)资助
文摘
目的:针对乙型肝炎病毒S蛋白,制备全人单克隆抗体,对其亲和力、中和病毒活性及抗体所结合的抗原表位进行研究。所制备的全人抗体可应用于乙肝病毒的暴露后预防,为阻断母婴传播提供治疗手段。方法:通过流式分选和单细胞RT-PCR技术获得单克隆抗体;利用间接ELISA法检测抗体结合活性,进行表位分析;Hep G2-NTCP细胞用于病毒感染,KHB乙型肝炎病毒e抗原诊断试剂盒检测细胞上清中HBe Ag的指标。结果:获得三株具有中和活性,可以结合三种乙肝病毒亚型S蛋白的抗体,其中1F2、2A1两株抗体的结合依赖于抗原蛋白的天然构象,2H2抗体的结合依赖于连续的氨基酸序列;1F2、2H2抗体结合的位置位于S蛋白胞外区第一个免疫环状区域。结论:利用单细胞RT-PCR技术成功制备了针对乙肝病毒S蛋白的抗体,其具有中和作用。抗原表位位于S蛋白胞外区的第一个免疫环状区域内。
关键词
乙型肝炎
全人单克隆抗体
单细胞RT-PCR
中和活性
抗体表位
Keywords
Hepatitis B virus
Human monoclonal antibody
Single cell PCR
Neutralization capacity
Epitope mapping
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
活细胞成像技术实时追踪荧光蛋白标记的分枝杆菌的胞内增殖
被引量：
1
2
作者
乔可
王晴岚
李紫煜
牛辰
机构
复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室
北京东胜创新生物科技有限公司
分子
影像部
出处
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第3期384-388,共5页
基金
国家自然科学基金青年项目(81201256)
supported by the Youth Program of National Natural Science Foundation of China(81201256)
文摘
目的 利用绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）标记和活细胞显微成像的方法,实时追踪分枝杆菌在巨噬细胞内的增殖过程。方法 用经GFP标记的野生型海分枝杆菌（Mycobacterium marinum,Mm）分别侵染未激活和γ-干扰素激活的巨噬细胞,使用活细胞显微成像系统连续记录胞内分枝杆菌的增殖动态,同时优化不同细胞接种浓度和感染复数（multiplicity of infection,MOI）对胞内菌增殖动态的追踪效果。结果 使用GFP标记和活细胞成像的方法可以实时追踪胞内分枝杆菌的增殖过程和形态学变化。γ干扰素对Mm在巨噬细胞中的增殖有抑制作用。当接种巨噬细胞浓度为1×105/孔,MOI为1时,可直观清晰地分析实时追踪图像中胞内菌的增殖过程。结论 通过活细胞成像技术分析荧光蛋白标记的分枝杆菌,可实时追踪巨噬细胞内分枝杆菌增殖过程和形态学变化,是一种体外分析胞内分枝杆菌增殖的理想方法,可应用于其他相关病原菌和宿主相互作用及影响因素的研究。
关键词
海分枝杆菌(Mm)
巨噬细胞
活细胞成像
细菌增殖
感染复数(MOI)
Keywords
Mycobacterium marinum （Mm）
macrophage
live cell imaging
mycobacteriaproliferation
multiplicity of infection （MOI）
分类号
R378.91 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
靶向融合肽IL-4Rα-lytic对原发性渗出性淋巴瘤的抑制作用
被引量：
1
3
作者
郑响
陈小亭
蔡启良
魏芳
机构
上海交通
大学
生命科学技术
学院
盛毓绶细胞与免疫学研究中心
复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第3期175-180,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81772166)
文摘
目的:探讨靶向融合肽IL-4Rα-lytic对卡波西肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)阳性原发性渗出性淋巴瘤(PEL)细胞的体内外杀伤作用及其安全性。方法:应用MTT法检测IL-4Rα-lytic对KSHV阳性PEL细胞BCBL-1和BCP-1的杀伤能力。通过FCM检测IL-4Rα-lytic诱导KSHV阳性PEL细胞凋亡的情况。建立BCBL-1细胞小鼠移植瘤模型,连续3周(3次/周)腹腔注射IL-4Rα-lytic后,通过活体生物发光成像技术评估IL-4Rα-lytic对小鼠体内BCBL-1细胞移植瘤的抑制效果,并通过H-E染色和全血分析法检测其毒副作用。结果:靶向融合肽IL-4Rα-lytic在体外对两种KSHV阳性PEL细胞BCBL-1和BCP-1均有选择性杀伤作用(均P<0.01),并且可以在短时间内发挥杀伤作用(均P<0.01)。靶向融合肽IL-4Rα-lytic可诱导KSHV阳性PEL细胞BCBL-1和BCP-1凋亡(均P<0.05)。靶向融合肽IL-4Rα-lytic显著抑制BCBL-1细胞小鼠移植瘤的生长,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05),并且无明显的器官毒性(均P>0.05),同时不会造成体质量异常(P>0.05)。结论:靶向融合肽IL-4Rα-lytic在体内外均显著抑制KSHV阳性PEL细胞的生长,且无明显毒副作用,有望为PEL的治疗提供一种新的治疗方案。
关键词
原发性渗出性淋巴瘤
靶向融合肽
卡波西肉瘤相关疱疹病毒
IL-4Rα
裂解肽
Keywords
primary effusion lymphoma(PEL)
targeting fusion peptide
Kaposi sarcoma-associated herpesvirus(KSHV)
IL-4Rα
lytic peptide
分类号
R733.1 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗乙型肝炎病毒S抗原全人单克隆抗体的制备和表位探究
佀传亚
潘少坤
凌志洋
伊春艳
邓志瑞
谢幼华
孙兵
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
活细胞成像技术实时追踪荧光蛋白标记的分枝杆菌的胞内增殖
乔可
王晴岚
李紫煜
牛辰
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2014
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
靶向融合肽IL-4Rα-lytic对原发性渗出性淋巴瘤的抑制作用
郑响
陈小亭
蔡启良
魏芳
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022
1
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