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C端谷氨酰胺富含结构域调节TIAR的细胞内定位
1
作者
谭理
李平
+1 位作者
童畅
朱运松
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期229-232,共4页
目的阐明核糖核酸(RNA)结合蛋白T细胞内抗原相关蛋白(TIAR)的结构域与细胞内定位之间的关系。方法细胞免疫荧光检测SMCC-7721细胞内源性TIAR的细胞内分布,亚克隆构建TIAR全长及缺失体的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达质粒,脂质体法瞬时转...
目的阐明核糖核酸(RNA)结合蛋白T细胞内抗原相关蛋白(TIAR)的结构域与细胞内定位之间的关系。方法细胞免疫荧光检测SMCC-7721细胞内源性TIAR的细胞内分布,亚克隆构建TIAR全长及缺失体的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达质粒,脂质体法瞬时转染SMCC-7721细胞,在荧光显微镜下观察融合蛋白在细胞内的荧光分布情况,免疫印迹检测融合蛋白的表达情况。结果细胞免疫荧光结果显示在SMCC-7721细胞中TIAR主要浓集于细胞核,细胞浆也有少量弥散分布。酶切鉴定及测序结果显示TIAR全长及缺失体的pEGFP-C3重组表达质粒构建成功。EGFP-TIARFL(TIAR全长)主要分布于细胞核;而EGFP-TIARRRM123(TIAR的N端3个RNA结合结构域)弥散分布于整个细胞;EGFP-TIARQ-rich(TIAR的C端谷胺酰胺富含结构域)浓集于细胞核,但浓集程度要比TIARFL-EGFP弱。免疫印迹证实过表达的TIAR全长及缺失体的EGFP融合蛋白分子量大小符合预期。结论我们的结果提示C端谷氨酸富含结构域参与TIAR细胞内定位的调节。
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关键词
T细胞内抗原相关蛋白
细胞内定位
增强型绿色荧光蛋白
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题名
C端谷氨酰胺富含结构域调节TIAR的细胞内定位
1
作者
谭理
李平
童畅
朱运松
机构
复旦大学分子医学教育部重点实验室-上海医学院生物化学与分子生物学系
出处
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期229-232,共4页
基金
国家自然科学基金(30070412)
复旦大学青年教师教学与科研启动基金(CHF101005)资助
文摘
目的阐明核糖核酸(RNA)结合蛋白T细胞内抗原相关蛋白(TIAR)的结构域与细胞内定位之间的关系。方法细胞免疫荧光检测SMCC-7721细胞内源性TIAR的细胞内分布,亚克隆构建TIAR全长及缺失体的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达质粒,脂质体法瞬时转染SMCC-7721细胞,在荧光显微镜下观察融合蛋白在细胞内的荧光分布情况,免疫印迹检测融合蛋白的表达情况。结果细胞免疫荧光结果显示在SMCC-7721细胞中TIAR主要浓集于细胞核,细胞浆也有少量弥散分布。酶切鉴定及测序结果显示TIAR全长及缺失体的pEGFP-C3重组表达质粒构建成功。EGFP-TIARFL(TIAR全长)主要分布于细胞核;而EGFP-TIARRRM123(TIAR的N端3个RNA结合结构域)弥散分布于整个细胞;EGFP-TIARQ-rich(TIAR的C端谷胺酰胺富含结构域)浓集于细胞核,但浓集程度要比TIARFL-EGFP弱。免疫印迹证实过表达的TIAR全长及缺失体的EGFP融合蛋白分子量大小符合预期。结论我们的结果提示C端谷氨酸富含结构域参与TIAR细胞内定位的调节。
关键词
T细胞内抗原相关蛋白
细胞内定位
增强型绿色荧光蛋白
Keywords
T-cell-restricted intracellutar antigen-related protein
subcellular localization
enhanced green fluorescence protein
分类号
Q291 [生物学—细胞生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
C端谷氨酰胺富含结构域调节TIAR的细胞内定位
谭理
李平
童畅
朱运松
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006
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