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小鼠结肠癌肝转移模型的建立及其活化肝星状细胞的表达
被引量:
7
1
作者
朱巍莹
张学利
+3 位作者
陈宗祐
夏蓓莉
陈忠清
项建斌
《复旦学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期274-277,共4页
目的建立小鼠结肠癌肝转移模型,并研究肝星状细胞(hepatic stellete cell,HSC)与结肠癌肝转移的相关性。方法采用囊袋法瘤块盲肠原位移植建立15只小鼠结肠癌肝转移模型,免疫组化法观察活化的HSC在转移灶、癌旁组织及未转移肝组织内的表...
目的建立小鼠结肠癌肝转移模型,并研究肝星状细胞(hepatic stellete cell,HSC)与结肠癌肝转移的相关性。方法采用囊袋法瘤块盲肠原位移植建立15只小鼠结肠癌肝转移模型,免疫组化法观察活化的HSC在转移灶、癌旁组织及未转移肝组织内的表达情况。结果建模后3周结肠癌肝转移率为40%,4周转移率为60%。转移灶中活化HSC的表达显著高于癌旁组织和未转移肝组织。结论囊袋法瘤块盲肠原位移植是较理想的结肠癌肝转移模型的制作方法;肝脏局部免疫微环境中活化HSC的表达可能参与结肠癌肝转移过程中的免疫调控。
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关键词
结肠癌
肝转移
肝星状细胞
小鼠
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职称材料
人纤溶酶原K5区基因真核表达载体的构建和活性鉴定
被引量:
1
2
作者
杨健
王跃祥
+3 位作者
官孝群
马春姑
陶贤梅
宋后燕
《复旦学报(医学版)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2003年第5期409-413,F002,共6页
目的 构建含人纤溶酶原K5区基因的真核表达载体 ,转染人乳腺癌细胞株MDA MB 2 31,观察阳性克隆表达的K5蛋白对人脐静脉内皮细胞株ECV30 4和MDA MB 2 31细胞增殖的影响。方法 应用PCR将人纤溶酶原信号肽序列引入K5cDNA ,所得的目的片...
目的 构建含人纤溶酶原K5区基因的真核表达载体 ,转染人乳腺癌细胞株MDA MB 2 31,观察阳性克隆表达的K5蛋白对人脐静脉内皮细胞株ECV30 4和MDA MB 2 31细胞增殖的影响。方法 应用PCR将人纤溶酶原信号肽序列引入K5cDNA ,所得的目的片段与真核表达载体 pcDNA3重组 ,构建重组质粒pcDNA3K5 ,脂质体法将其转染MDA MB 2 31,G4 18筛选阳性克隆 ,PCR鉴定 ,RT PCR和Westernblot检测K5的表达。将鉴定正确的阳性克隆的培养上清作用于ECV30 4细胞 ,MTT法检测其增殖情况 ,并用MTT法检测转染 pcD NA3K5对MDA MB 2 31细胞增殖的影响。结果 构建的重组质粒 pcDNA3K5经酶切鉴定、测序正确 ,将其转染MDA MB 2 31后挑取的阳性克隆有 3个经PCR鉴定正确 ,并经RT PCR和Westernblot检测证实K5的表达。阳性克隆的培养上清作用于ECV30 4细胞后 ,其存活率降低 ;转染 pcDNA3K5对MDA MB 2 31细胞增殖无明显影响。结论 应用脂质体法将带有人纤溶酶原信号肽序列的K5cDNA转染MDA MB 2 31细胞后 ,其分泌产生的有生物学活性的K5 ,呈现对ECV30 4细胞增殖的抑制作用 ,而对MDA MB 2 31细胞的生长则无影响。
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关键词
乳腺癌
基因治疗
重组新生血管生成抑制因子K5
基因表达
真核表达载体
构建
活性鉴定
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职称材料
题名
小鼠结肠癌肝转移模型的建立及其活化肝星状细胞的表达
被引量:
7
1
作者
朱巍莹
张学利
陈宗祐
夏蓓莉
陈忠清
项建斌
机构
复旦大学
附属华山医院普外科
上海
市奉贤区中心医院普外科
复旦大学上海医学院细胞与遗传学系
复旦大学
附属华山医院病理科
出处
《复旦学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期274-277,共4页
文摘
目的建立小鼠结肠癌肝转移模型,并研究肝星状细胞(hepatic stellete cell,HSC)与结肠癌肝转移的相关性。方法采用囊袋法瘤块盲肠原位移植建立15只小鼠结肠癌肝转移模型,免疫组化法观察活化的HSC在转移灶、癌旁组织及未转移肝组织内的表达情况。结果建模后3周结肠癌肝转移率为40%,4周转移率为60%。转移灶中活化HSC的表达显著高于癌旁组织和未转移肝组织。结论囊袋法瘤块盲肠原位移植是较理想的结肠癌肝转移模型的制作方法;肝脏局部免疫微环境中活化HSC的表达可能参与结肠癌肝转移过程中的免疫调控。
关键词
结肠癌
肝转移
肝星状细胞
小鼠
Keywords
colon cancer
liver metastasis
hepatic stellete cell
mice
分类号
R735.35 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
人纤溶酶原K5区基因真核表达载体的构建和活性鉴定
被引量:
1
2
作者
杨健
王跃祥
官孝群
马春姑
陶贤梅
宋后燕
机构
复旦大学上海医学院细胞与遗传学系
-教育部分子
医学
重点实验室
出处
《复旦学报(医学版)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2003年第5期409-413,F002,共6页
文摘
目的 构建含人纤溶酶原K5区基因的真核表达载体 ,转染人乳腺癌细胞株MDA MB 2 31,观察阳性克隆表达的K5蛋白对人脐静脉内皮细胞株ECV30 4和MDA MB 2 31细胞增殖的影响。方法 应用PCR将人纤溶酶原信号肽序列引入K5cDNA ,所得的目的片段与真核表达载体 pcDNA3重组 ,构建重组质粒pcDNA3K5 ,脂质体法将其转染MDA MB 2 31,G4 18筛选阳性克隆 ,PCR鉴定 ,RT PCR和Westernblot检测K5的表达。将鉴定正确的阳性克隆的培养上清作用于ECV30 4细胞 ,MTT法检测其增殖情况 ,并用MTT法检测转染 pcD NA3K5对MDA MB 2 31细胞增殖的影响。结果 构建的重组质粒 pcDNA3K5经酶切鉴定、测序正确 ,将其转染MDA MB 2 31后挑取的阳性克隆有 3个经PCR鉴定正确 ,并经RT PCR和Westernblot检测证实K5的表达。阳性克隆的培养上清作用于ECV30 4细胞后 ,其存活率降低 ;转染 pcDNA3K5对MDA MB 2 31细胞增殖无明显影响。结论 应用脂质体法将带有人纤溶酶原信号肽序列的K5cDNA转染MDA MB 2 31细胞后 ,其分泌产生的有生物学活性的K5 ,呈现对ECV30 4细胞增殖的抑制作用 ,而对MDA MB 2 31细胞的生长则无影响。
关键词
乳腺癌
基因治疗
重组新生血管生成抑制因子K5
基因表达
真核表达载体
构建
活性鉴定
Keywords
Assays
Cells
Cloning
Gene transfer
Proteins
分类号
R737.9 [医药卫生—肿瘤]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
小鼠结肠癌肝转移模型的建立及其活化肝星状细胞的表达
朱巍莹
张学利
陈宗祐
夏蓓莉
陈忠清
项建斌
《复旦学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2010
7
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下载PDF
职称材料
2
人纤溶酶原K5区基因真核表达载体的构建和活性鉴定
杨健
王跃祥
官孝群
马春姑
陶贤梅
宋后燕
《复旦学报(医学版)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2003
1
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