检索结果-维普期刊中文期刊服务平台

天然人源IgG Fab噬菌体抗体库的构建及多样性分析被引量：5: 1; 作者邵红霞章黎 +4 位作者杨彬冯萌付永峰 Hiroshi Tachibana 程训佳《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1007-1010,1015,共5页; 目的:构建天然人源IgGFab噬菌体抗体库并分析来源于健康人外周血B淋巴细胞的抗体基因可变区的多样性及优势选择。方法:以DNA重组技术从300名健康志愿者的外周血淋巴细胞中扩增出全套人抗体轻链及重链Fd基因,分别插入噬菌体载体pFabICN... 展开更多; 关键词噬菌体展示库免疫球蛋白Fab片段免疫球蛋白重链基因抗体多样性; 在线阅读下载PDF 职称材料

福氏志贺菌感染豚鼠和HeLa细胞的毒力被引量：3: 2; 作者钱雪琴李雪萍 +1 位作者王重振钱利生《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第2期132-134,F004,共4页; 目的　研究福氏志贺菌感染豚鼠和HeLa细胞后细菌致病能力的差异 ,探讨痢疾的防治。方法　选用 2 8株福氏志贺菌感染豚鼠眼角膜 ,观察角膜结膜病变反应 ,并进行细胞学、细菌学、病理组织切片检查。然后再选出12株福氏志贺菌强毒株和两株... 展开更多; 关键词福氏志贺菌感染豚鼠 HELA细胞毒力角膜结膜炎; 在线阅读下载PDF 职称材料

自制肺炎衣原体单克隆抗体检测其特异性抗原对动脉粥样硬化诊断的临床意义被引量：2: 3; 作者史益军钱利生 +4 位作者王卫群李雪苹李刚徐坚余竹元《中国全科医学》 CAS CSCD 2007年第1期29-31,共3页; 目的探讨采用自制肺炎衣原体单克隆抗体(Cpn-McAb)检测人外周血单核细胞(PBMC)和冠状动脉瘤标本中肺炎衣原体特异性抗原(Cpn-Ag)的临床意义。方法采用自制Cpn-McAb的直接免疫荧光(DI)法检测颈动脉粥样硬化和健康体检者PBMC中Cpn-Ag及冠... 展开更多; 关键词动脉硬化衣原体肺炎抗原单克隆抗体外周血单核细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

冠状动脉瘤组织中肺炎衣原体特异性抗原的表达被引量：2: 4; 作者王卫群钱利生 +3 位作者史益军李雪萍白永怿余竹元《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期104-106,110,共4页; 目的探讨肺炎衣原体特异性抗原(Cpn-Ag)表达与冠状动脉瘤之间的关系。方法采用自制肺炎衣原体单克隆抗体的直接微量免疫荧光法检测50例冠状动脉瘤标本和20例正常冠状动脉标本中Cpn-Ag的表达。结果冠状动脉瘤和正常冠状动脉标本中Cpn-Ag... 展开更多; 关键词冠状动脉瘤肺炎衣原体特异性抗原肺炎衣原体单克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

福氏志贺菌临床分离株毒力基因的研究被引量：3: 5; 作者张俊琪钱雪琴 +1 位作者李雪萍钱利生《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1243-1246,共4页; 目的研究在一种快速、特异的mPCR方法在检出福氏志贺菌的同时对其毒力进行监测。方法选取福氏志贺菌三种毒力基因ipaH,ial,set1B作为扩增目标,在同一mPCR体系中对86株福氏志贺菌临床分离株进行了检测,并选取12株进行了噬斑形成试验,观... 展开更多; 关键词福氏志贺菌 mPCR 噬斑形成试验; 在线阅读下载PDF 职称材料

热带剥爪螨变应原Blot 5的克隆表达、纯化及免疫学鉴定被引量：3: 6; 作者蔡俊龙杨彬 +5 位作者邓宜红陈实罗慕侠李勤付永锋程训佳《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期690-694,共5页; 目的:克隆热带剥爪螨主要变应原Blot 5基因,表达纯化该蛋白,并检测其免疫活性。方法:提取热带剥爪螨总RNA,采用RT-PCR的方法扩增Blot 5编码基因,将其连入原核表达载体pET-19b,将重组质粒转化入大肠杆菌BL21 Star(DE3)pLysS,IPTG诱导表达... 展开更多; 关键词热带剥爪螨重组变应原 BLOT 5 蛋白表达 IgE; 在线阅读下载PDF 职称材料

多主枝孢霉重组变应原Cla h8的制备及其免疫活性鉴定被引量：1: 7; 作者杨柳付永锋 +2 位作者李雪萍冯萌程训佳《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期446-449,共4页; 目的:通过基因工程手段,获得重组多主枝孢霉变应原蛋白Cla h8,有利于进行变应原的标准化,为标准化抗原的临床特异性诊断与治疗奠定基础。方法:从多主枝孢霉菌体中提取总RNA,采用RT-PCR的方法扩增Cla h8编码基因,将其连入pET-19b载体。... 展开更多; 关键词多主枝孢霉重组变应原Clah8 蛋白表达变应原活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

日本柳杉花粉变应原CJP-6的重组表达和免疫反应性鉴定: 8; 作者蒋建国刘瑞玲 +1 位作者付永锋程训佳《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期444-448,共5页; 目的:获得日本柳杉花粉主要变应原CJP-6的编码基因,构建其原核表达载体进行表达,并对重组CJP-6(rCJP-6)进行免疫活性鉴定。方法:从日本柳杉花粉中提取总RNA,采用RT-PCR的方法扩增CJP-6编码基因,将其克隆入pET-19b表达载体。转入大肠杆菌... 展开更多; 关键词日本柳杉 CJP-6 变应原交叉反应性 IgE; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名天然人源IgG Fab噬菌体抗体库的构建及多样性分析被引量：5: 1; 作者邵红霞章黎杨彬冯萌付永峰 Hiroshi Tachibana 程训佳; 机构复旦大学上海医学院病原生物学系 Department of Infectious Diseases; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1007-1010,1015,共5页; 基金国家自然科学基金项目(No.30371331) 上海市基础研究重点项目(No.08JC1401000); 文摘目的:构建天然人源IgGFab噬菌体抗体库并分析来源于健康人外周血B淋巴细胞的抗体基因可变区的多样性及优势选择。方法:以DNA重组技术从300名健康志愿者的外周血淋巴细胞中扩增出全套人抗体轻链及重链Fd基因,分别插入噬菌体载体pFabICN相应位置,构建天然人源免疫球蛋白G基因文库;进一步从抗体库中随机挑选克隆,获得重轻链基因进行核苷酸序列测定并利用IgBLAST数据库分析抗体基因可变区的同源家族。结果:从4×108库容的天然人源IgGFab噬菌体抗体库中随机挑选克隆,对其中32个轻链及重链Fd基因插入正确的克隆进行核苷酸序列测定和氨基酸序列的推算,获得29条彼此完全不同的Fd重链基因及轻链基因。以IgBLAST数据库比对分析显示29条重链基因的V区分别属于VH3(72.4%),VH1(10.3%),VH4(6.9%),VH5(6.9%)和VH7(3.4%)基因家族。29条轻链基因分别属于Vκ1(44.8%),Vκ2(15.4%),Vκ3(11.5%),Vκ4(23.1%)基因家族和Vλ1(11.5%)基因家族。结论:以300份健康人外周血淋巴细胞的抗体基因构建的天然人源IgGFab噬菌体抗体库基因多样性良好,重链VH3基因家族存在优势表达。; 关键词噬菌体展示库免疫球蛋白Fab片段免疫球蛋白重链基因抗体多样性; Keywords Phage display library； Immunoglobulin Fab Fragments； Immunoglobulin heavy chain genes； Antibody diversity; 分类号 R392.1 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名福氏志贺菌感染豚鼠和HeLa细胞的毒力被引量：3: 2; 作者钱雪琴李雪萍王重振钱利生; 机构复旦大学上海医学院病原生物学系; 出处《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第2期132-134,F004,共4页; 文摘目的　研究福氏志贺菌感染豚鼠和HeLa细胞后细菌致病能力的差异 ,探讨痢疾的防治。方法　选用 2 8株福氏志贺菌感染豚鼠眼角膜 ,观察角膜结膜病变反应 ,并进行细胞学、细菌学、病理组织切片检查。然后再选出12株福氏志贺菌强毒株和两株弱毒株 ,通过噬斑形成实验 ,观察对HeLa细胞的侵袭能力。结果　 2 8株福氏志贺菌均在 3d之内引起豚鼠发病 ,但症状表现有差异 ,除 2株福氏志贺菌感染豚鼠后发病时间延长、症状轻微外 ,其余菌株则引起较为严重的角膜结膜炎 ,尤其在感染第 3天 ,出现最为典型的临床表现。噬斑形成试验结果与豚鼠感染试验基本相符。结论　检测福氏志贺菌的毒力可用HeLa细胞噬斑形成试验替代Sereny试验。利用Sereny试验和HeLa细胞噬斑形成试验鉴定出 2 6株福氏志贺菌的强毒株和 2株弱毒株。; 关键词福氏志贺菌感染豚鼠 HELA细胞毒力角膜结膜炎; Keywords Cells Disease control Microorganisms Pathology; 分类号 R772.2 [医药卫生—眼科]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名自制肺炎衣原体单克隆抗体检测其特异性抗原对动脉粥样硬化诊断的临床意义被引量：2: 3; 作者史益军钱利生王卫群李雪苹李刚徐坚余竹元; 机构复旦大学附属金山医院心内科复旦大学上海医学院病原生物学系微生物学教研室复旦大学附属金山医院细菌室; 出处《中国全科医学》 CAS CSCD 2007年第1期29-31,共3页; 基金上海市卫生局基金资助项目(沪卫科教[2002]58号); 文摘目的探讨采用自制肺炎衣原体单克隆抗体(Cpn-McAb)检测人外周血单核细胞(PBMC)和冠状动脉瘤标本中肺炎衣原体特异性抗原(Cpn-Ag)的临床意义。方法采用自制Cpn-McAb的直接免疫荧光(DI)法检测颈动脉粥样硬化和健康体检者PBMC中Cpn-Ag及冠状动脉瘤和正常冠状动脉标本中Cpn-Ag的表达。结果颈动脉粥样硬化患者和健康体检者PBMC中Cpn-Ag检测结果间差异有显著性意义(P<0.01);粥样硬化冠状动脉瘤标本和正常冠状动脉标本外膜下和/或斑块内Cpn-Ag检测结果间差异有显著性意义(P<0.01)。冠状动脉瘤标本中有大量Cpn-Ag沉积,分别位于外膜下及粥样硬化斑块内,而正常血管壁中仅有少量沉积(P<0.05)。结论PBMC中的Cpn-Ag的检测可为诊治与该病原体相关的疾病提供依据;Cpn可能是动脉粥样硬化形成的原因之一。; 关键词动脉硬化衣原体肺炎抗原单克隆抗体外周血单核细胞; Keywords Athefiosclerosis Chlamydophila pneumoniae Antigens Antibodies, monclonal~ Peripheral blood monocytes; 分类号 R543.3 [医药卫生—心血管疾病]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名冠状动脉瘤组织中肺炎衣原体特异性抗原的表达被引量：2: 4; 作者王卫群钱利生史益军李雪萍白永怿余竹元; 机构复旦大学附属金山医院心内科复旦大学上海医学院病原生物学系微生物学教研室; 出处《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期104-106,110,共4页; 基金上海市卫生局基金项目(2002-024006); 文摘目的探讨肺炎衣原体特异性抗原(Cpn-Ag)表达与冠状动脉瘤之间的关系。方法采用自制肺炎衣原体单克隆抗体的直接微量免疫荧光法检测50例冠状动脉瘤标本和20例正常冠状动脉标本中Cpn-Ag的表达。结果冠状动脉瘤和正常冠状动脉标本中Cpn-Ag的阳性率分别是58.0%(29/50)和15.0%(3/20)。冠状动脉瘤标本中有大量Cpn-Ag沉积,分别位于外膜下及粥样硬化斑块内,而正常血管壁中仅有少量Cpn-Ag沉积,两者具有统计学差异(P<0.01)。结论Cpn-Ag在冠状动脉瘤外膜下有高表达率,Cpn可能是参与冠状动脉粥样硬化形成损害的原因之一。; 关键词冠状动脉瘤肺炎衣原体特异性抗原肺炎衣原体单克隆抗体; Keywords coronary artery atheroma Cpn-specific antigen monoclonal antibody to Chlamydia pneumoniae; 分类号 R543.3 [医药卫生—心血管疾病]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名福氏志贺菌临床分离株毒力基因的研究被引量：3: 5; 作者张俊琪钱雪琴李雪萍钱利生; 机构复旦大学上海医学院病原生物学系上海市公共卫生中心检验科; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1243-1246,共4页; 基金 "复旦大学青年教师科研启动基金"资助; 文摘目的研究在一种快速、特异的mPCR方法在检出福氏志贺菌的同时对其毒力进行监测。方法选取福氏志贺菌三种毒力基因ipaH,ial,set1B作为扩增目标,在同一mPCR体系中对86株福氏志贺菌临床分离株进行了检测,并选取12株进行了噬斑形成试验,观察了扩增产物不同的福氏志贺菌对Hela细胞的毒力作用。结果86株福氏志贺菌临床分离株均检测到ipaH基因,阳性率为100%;45株检测到ial基因,阳性率为52%;69株检测到set1B基因,阳性率为80%。噬斑形成试验证明,mPCR结果不同的菌株对Hela细胞的感染能力存在明显差异。结论应用上述mPCR体系在检出福氏志贺菌的同时能够对菌株的毒力进行初步判别,对于临床诊断及治疗具有重要意义。; 关键词福氏志贺菌 mPCR 噬斑形成试验; Keywords Shigella flexneri multiplex polymerase chain reactions plaque formation test; 分类号 R378 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名热带剥爪螨变应原Blot 5的克隆表达、纯化及免疫学鉴定被引量：3: 6; 作者蔡俊龙杨彬邓宜红陈实罗慕侠李勤付永锋程训佳; 机构复旦大学上海医学院病原生物学系; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期690-694,共5页; 基金国家高技术研究发展计划项目(2007AA02Z472) 卫生行业科研专项项目(20082001)资助; 文摘目的:克隆热带剥爪螨主要变应原Blot 5基因,表达纯化该蛋白,并检测其免疫活性。方法:提取热带剥爪螨总RNA,采用RT-PCR的方法扩增Blot 5编码基因,将其连入原核表达载体pET-19b,将重组质粒转化入大肠杆菌BL21 Star(DE3)pLysS,IPTG诱导表达后,通过Ni2+亲和层析纯化重组变应原Blot 5。用Dot blot、Western blot和ELISA等方法检测重组变应原Blot 5免疫活性。结果:Dot blot和Western blot结果表明重组变应原Blot 5和热带剥爪螨粗提液都能和Blot 5鼠单克隆抗体结合。重组变应原Blot 5检测69份热带剥爪螨过敏患者血清和21份户尘螨过敏患者血清中的特异性IgE,阳性率分别为29.0%和33.3%。结论:表达和纯化了具有与天然蛋白相似的免疫活性的重组热带剥爪螨变应原Blot 5,可用于热带剥爪螨变应原的标准化,为标准化抗原的临床特异性诊断与治疗奠定基础。; 关键词热带剥爪螨重组变应原 BLOT 5 蛋白表达 IgE; Keywords Blomia tropicalis Recombinant allergen Blot 5 Protein expression IgE; 分类号 R392.8 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名多主枝孢霉重组变应原Cla h8的制备及其免疫活性鉴定被引量：1: 7; 作者杨柳付永锋李雪萍冯萌程训佳; 机构复旦大学上海医学院病原生物学系; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期446-449,共4页; 基金国家高技术研究发展计划项目(2007AA02Z472) 卫生行业科研专项项目(20082001)资助; 文摘目的:通过基因工程手段,获得重组多主枝孢霉变应原蛋白Cla h8,有利于进行变应原的标准化,为标准化抗原的临床特异性诊断与治疗奠定基础。方法:从多主枝孢霉菌体中提取总RNA,采用RT-PCR的方法扩增Cla h8编码基因,将其连入pET-19b载体。转入大肠杆菌BL21 Star(DE3)pLysS,经诱导表达后,进行提纯复性,用Western blot和Dot-blot检测其免疫活性。结果:重组多主枝孢霉变应原Cla h8蛋白可以与多主枝孢霉过敏患者的血清中IgE和IgG抗体特异性结合,与天然蛋白具有相似的免疫活性。结论:制备并获得了具有生物学活性的可溶性重组多主枝孢霉变应原Cla h8蛋白,可用于多主枝孢霉变应原的标准化,克服天然提取物的非单一性及标准化难的障碍。; 关键词多主枝孢霉重组变应原Clah8 蛋白表达变应原活性; Keywords Cladosporium herbarum Recombinant allergen Cla h8 Protein expression IgE; 分类号 R392.8 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名日本柳杉花粉变应原CJP-6的重组表达和免疫反应性鉴定: 8; 作者蒋建国刘瑞玲付永锋程训佳; 机构复旦大学上海医学院病原生物学系; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期444-448,共5页; 基金国家高技术研究发展计划项目(2007AA02Z472) 卫生行业科研专项项目(20082001)资助; 文摘目的:获得日本柳杉花粉主要变应原CJP-6的编码基因,构建其原核表达载体进行表达,并对重组CJP-6(rCJP-6)进行免疫活性鉴定。方法:从日本柳杉花粉中提取总RNA,采用RT-PCR的方法扩增CJP-6编码基因,将其克隆入pET-19b表达载体。转入大肠杆菌BL21 Star(DE3)pLysS,经IPTG诱导表达,以Ni2+亲和层析柱对重组变应原进行纯化,采用Dot blot和ELISA方法检测重组变应原rCJP-6与对日本柳杉花粉、尘螨和蒿草花粉过敏患者的血清中的IgE反应活性。结果:重组变应原与日本柳杉花粉过敏患者血清中的IgE具有较高的结合活性,rCJP-6与尘螨、蒿草花粉过敏患者血清中的IgE也具有很高的反应性,而且反应性与日本柳杉花粉过敏的患者血清相似。结论:制备并获得了具有IgE结合活性的重组日本柳杉花粉变应原CJP-6,日本柳杉花粉变应原是中国过敏反应性疾病患者潜在的变应原,为国内过敏反应性疾病的临床诊断和免疫治疗及进一步的实验研究奠定了基础。; 关键词日本柳杉 CJP-6 变应原交叉反应性 IgE; Keywords Cryptomeria japonica CJP-6 Allergen Cross-reactivity IgE; 分类号 R392.8 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	天然人源IgG Fab噬菌体抗体库的构建及多样性分析	邵红霞章黎杨彬冯萌付永峰 Hiroshi Tachibana 程训佳	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2010	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	福氏志贺菌感染豚鼠和HeLa细胞的毒力	钱雪琴李雪萍王重振钱利生	《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心	2004	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	自制肺炎衣原体单克隆抗体检测其特异性抗原对动脉粥样硬化诊断的临床意义	史益军钱利生王卫群李雪苹李刚徐坚余竹元	《中国全科医学》 CAS CSCD	2007	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	冠状动脉瘤组织中肺炎衣原体特异性抗原的表达	王卫群钱利生史益军李雪萍白永怿余竹元	《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2007	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	福氏志贺菌临床分离株毒力基因的研究	张俊琪钱雪琴李雪萍钱利生	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	3	在线阅读下载PDF 职称材料
6	热带剥爪螨变应原Blot 5的克隆表达、纯化及免疫学鉴定	蔡俊龙杨彬邓宜红陈实罗慕侠李勤付永锋程训佳	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2012	3	在线阅读下载PDF 职称材料
7	多主枝孢霉重组变应原Cla h8的制备及其免疫活性鉴定	杨柳付永锋李雪萍冯萌程训佳	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2011	1	在线阅读下载PDF 职称材料
8	日本柳杉花粉变应原CJP-6的重组表达和免疫反应性鉴定	蒋建国刘瑞玲付永锋程训佳	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料