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人的可溶性L-selectin(sL-selectin)在杆状病毒载体系统中的表达与纯化
1
作者
胡萍
石必枝
吴兴中
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期647-650,661,共5页
目的利用昆虫细胞杆状病毒系统表达人的重组可溶性L-型选择蛋白配体凝集素(human recombi-nant soluble L-selectin:sL-selectin),探索在真核细胞中高效表达人的重组可溶性L-型选择蛋白配体凝集素的新途径。方法将已经重组好的杆状病毒...
目的利用昆虫细胞杆状病毒系统表达人的重组可溶性L-型选择蛋白配体凝集素(human recombi-nant soluble L-selectin:sL-selectin),探索在真核细胞中高效表达人的重组可溶性L-型选择蛋白配体凝集素的新途径。方法将已经重组好的杆状病毒感染昆虫细胞,表达sL-选凝素于细胞培养上清,利用末端连接的ZZ-结构域(蛋白A来源的首尾相连的二聚化Z结构域)与IgG-琼脂糖-6的结合而分离纯化,通过SDS-PAGE鉴定分子量的大小,并用特异性抗体验证,另外通过重组的sL-选凝素与SMMC7721的黏附观察其活性。结果sL-选凝素可在昆虫细胞中表达,产物的分子量约为46 000,与人肝癌细胞SMMC7721的结合率可达70%。结论sL-选凝素可通过杆状病毒载体在昆虫细胞中有效表达,分离纯化后依然保持生理活性。
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关键词
L-型选择蛋白配体凝集素
杆状病毒
ZZ-结构域
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职称材料
α1,3 FucT-Ⅶ基因转染对人结肠癌LOVO细胞的作用
被引量：
1
2
作者
李文桦
罗建民
+1 位作者
张英
张文
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期569-573,共5页
目的观察α1,3 FucT-Ⅶ基因转染对人LOVO细胞的生物学行为的改变。方法采用RT-PCR和Western blot方法检测转染前后LOVO细胞中α1,3 FucT-Ⅶ基因的表达,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期,并通过体外迁移、侵袭实验检测转染前...
目的观察α1,3 FucT-Ⅶ基因转染对人LOVO细胞的生物学行为的改变。方法采用RT-PCR和Western blot方法检测转染前后LOVO细胞中α1,3 FucT-Ⅶ基因的表达,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期,并通过体外迁移、侵袭实验检测转染前后LOVO细胞运动侵袭能力的变化。结果LOVO细胞微弱表达α1,3 FucT-Ⅶ,RT-PCR和Western blot方法验证转染后的LOVO/FucT-Ⅶ高表达α1,3 FucT-Ⅶ。转染后细胞生长增快,S期细胞增多而G1期细胞减少,细胞趋化性迁移和侵袭能力增强。结论α1,3 FucT-Ⅶ基因能改变人结肠癌LOVO细胞的生物学行为,增强细胞趋化性迁移和侵袭等转移表型。
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关键词
结直肠癌
α1
3
FucT-Ⅶ基因
糖基转移酶
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职称材料
题名
人的可溶性L-selectin(sL-selectin)在杆状病毒载体系统中的表达与纯化
1
作者
胡萍
石必枝
吴兴中
机构
复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系-卫生部糖复合物重点实验室
出处
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期647-650,661,共5页
基金
国家自然科学基金项目(30570414
30470398)资助
文摘
目的利用昆虫细胞杆状病毒系统表达人的重组可溶性L-型选择蛋白配体凝集素(human recombi-nant soluble L-selectin:sL-selectin),探索在真核细胞中高效表达人的重组可溶性L-型选择蛋白配体凝集素的新途径。方法将已经重组好的杆状病毒感染昆虫细胞,表达sL-选凝素于细胞培养上清,利用末端连接的ZZ-结构域(蛋白A来源的首尾相连的二聚化Z结构域)与IgG-琼脂糖-6的结合而分离纯化,通过SDS-PAGE鉴定分子量的大小,并用特异性抗体验证,另外通过重组的sL-选凝素与SMMC7721的黏附观察其活性。结果sL-选凝素可在昆虫细胞中表达,产物的分子量约为46 000,与人肝癌细胞SMMC7721的结合率可达70%。结论sL-选凝素可通过杆状病毒载体在昆虫细胞中有效表达,分离纯化后依然保持生理活性。
关键词
L-型选择蛋白配体凝集素
杆状病毒
ZZ-结构域
Keywords
sL-selectin
baculovirus
ZZ-tag
分类号
Q503 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
α1,3 FucT-Ⅶ基因转染对人结肠癌LOVO细胞的作用
被引量：
1
2
作者
李文桦
罗建民
张英
张文
机构
复旦大学
附属肿瘤医院肿瘤内科
复旦大学
附属肿瘤医院肿瘤内科中心
实验室
复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系-卫生部糖复合物重点实验室
出处
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期569-573,共5页
基金
复旦大学基础-临床医学交叉研究基金资助
文摘
目的观察α1,3 FucT-Ⅶ基因转染对人LOVO细胞的生物学行为的改变。方法采用RT-PCR和Western blot方法检测转染前后LOVO细胞中α1,3 FucT-Ⅶ基因的表达,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期,并通过体外迁移、侵袭实验检测转染前后LOVO细胞运动侵袭能力的变化。结果LOVO细胞微弱表达α1,3 FucT-Ⅶ,RT-PCR和Western blot方法验证转染后的LOVO/FucT-Ⅶ高表达α1,3 FucT-Ⅶ。转染后细胞生长增快,S期细胞增多而G1期细胞减少,细胞趋化性迁移和侵袭能力增强。结论α1,3 FucT-Ⅶ基因能改变人结肠癌LOVO细胞的生物学行为,增强细胞趋化性迁移和侵袭等转移表型。
关键词
结直肠癌
α1
3
FucT-Ⅶ基因
糖基转移酶
Keywords
colorectal eancer, α1,3 FucT-Ⅶ gene
glyeosyltransferase
分类号
R735.35 [医药卫生—肿瘤]
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人的可溶性L-selectin(sL-selectin)在杆状病毒载体系统中的表达与纯化
胡萍
石必枝
吴兴中
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006
0
在线阅读
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职称材料
2
α1,3 FucT-Ⅶ基因转染对人结肠癌LOVO细胞的作用
李文桦
罗建民
张英
张文
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008
1
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职称材料
已选择
0
条
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