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HBV-preS2/S-C3d联合基因疫苗诱导的特异性免疫应答及其意义 被引量:1
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作者 关庆东 王立新 +3 位作者 徐薇 王缨 储以微 熊思东 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期812-816,821,共6页
目的:研究HBV-preS2/S-C3d联合基因疫苗诱导的特异性体液和细胞免疫应答及其意义。方法:CR2结合实验检测C3d融合蛋白的结合特性;分别用TR421、TR421-preS2/S和TR421-preS2/S-C3d3重组质粒免疫小鼠,ELISA法检测特异性抗HBs-IgG的亲合力,3... 目的:研究HBV-preS2/S-C3d联合基因疫苗诱导的特异性体液和细胞免疫应答及其意义。方法:CR2结合实验检测C3d融合蛋白的结合特性;分别用TR421、TR421-preS2/S和TR421-preS2/S-C3d3重组质粒免疫小鼠,ELISA法检测特异性抗HBs-IgG的亲合力,3H-TdR掺入法检测其特异性淋巴细胞增殖活性(SI),半定量RT-PCR法检测IL-4、IFN-γ、T-bet和GATA-3基因表达的水平。结果:C3d融合蛋白可有效地结合CR2;TR421-preS2/S-C3d3质粒基因免疫诱导的抗HBs-IgG水平、亲合力以及SI均明显高于TR421-preS2/S组,并且前者诱导的IL-4、IFN-γ、T-bet和GATA-3基因表达水平也均高于后者。结论:C3d通过结合CR2、上调IL-4和转录因子的表达、促进抗体亲合力成熟来增强基因免疫诱导的HBV特异性免疫应答。 展开更多
关键词 基因免疫 免疫调节 C3D 乙型肝炎病毒表面抗原
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C3d-P28对基因免疫诱导的HBV特异性细胞免疫应答的调节作用
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作者 王立新 关庆东 +2 位作者 徐薇 王缨 熊思东 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期443-447,共5页
目的 :观察补体C3d P2 8对基因免疫诱导的HBV特异性细胞免疫应答的调节作用 ,为增强基因免疫效果寻求新方法。方法 :将质粒pVAON33 S2 S质粒 (仅含HBV preS2 S编码基因 )和pVAON33 S2 S P2 8 4质粒 (含HBV preS2 S和 4拷贝C3d P2 8... 目的 :观察补体C3d P2 8对基因免疫诱导的HBV特异性细胞免疫应答的调节作用 ,为增强基因免疫效果寻求新方法。方法 :将质粒pVAON33 S2 S质粒 (仅含HBV preS2 S编码基因 )和pVAON33 S2 S P2 8 4质粒 (含HBV preS2 S和 4拷贝C3d P2 8的编码基因 )以肌肉注射法对BALB C小鼠实施基因免疫 (10 0 μg 10 0 μl 只 ) ,并以空载质粒为对照。定期采集免疫小鼠血清、ELISA法检测其中特异性抗HBs IgG及其亚型的水平 ;免疫小鼠脾细胞经特异性抗原 (HBsAg)刺激后 ,采用3H TdR掺入法、半定量RT PCR法、同位素释放法分别检测其特异性淋巴细胞增殖活性、IL 4和IFN γ基因表达的水平、CTL杀伤活性。结果 :pVAON33 S2 S P2 8 4质粒基因免疫诱导的特异性淋巴细胞增殖活性、抗HBs IgG水平以及特异性CTL杀伤活性均明显高于pVAON33 S2 S质粒 ;C3d P2 8未改变基因免疫诱导的抗HBs IgG各亚型水平的格局 ,同时增强IgG1、IgG2a、IgG2b的水平 ;pVAON33 S2 S P2 8 4质粒诱导的IL 4和IFN γ的基因表达水平均明显高于pVAON33 S2 S质粒。结论 :C3d P2 8可在提高体液免疫应答的同时增强基因免疫诱导的HBV特异性细胞免疫应答。 展开更多
关键词 基因免疫 免疫调节 补体C3d 乙型肝炎病毒表面抗原
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B7反义肽抑制同种异基因移植排斥反应的研究 被引量:4
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作者 陈晋 熊思东 +2 位作者 张瑞华 储以微 郑秀娟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期468-472,共5页
目的 :探讨B7反义肽竞争抑制CD2 8 B7共刺激通路、抑制移植排斥反应的作用 ,为该反义肽在器官移植方面的应用提供实验依据。方法 :固相合成法合成含有MYPPPYmotif的B7反义肽N’ EFMYPPPYLD C’ ,纯度 95 % ,分子量 (MW)为12 71 6 ;用灭... 目的 :探讨B7反义肽竞争抑制CD2 8 B7共刺激通路、抑制移植排斥反应的作用 ,为该反义肽在器官移植方面的应用提供实验依据。方法 :固相合成法合成含有MYPPPYmotif的B7反义肽N’ EFMYPPPYLD C’ ,纯度 95 % ,分子量 (MW)为12 71 6 ;用灭活的C5 7(H 2 d)脾细胞和体外培养新生C5 7心肌细胞作为刺激细胞 ,以适当浓度的B7反义肽处理刺激细胞后 ,再与BALB C(H 2 d)脾细胞作为应答细胞进行混合培养 ,观察此反义肽在体外抑制淋巴细胞增殖的效果 ;用此反义肽预封闭新生C5 7小鼠心肌后 ,移植到BALB C小鼠耳后 ,观察此反义肽在体内抑制移植排斥反应、延长心肌移植存活的情况。结果 :B7反义肽能抑制前述两种淋巴细胞增殖反应 ,抑制率分别为 38 4 %和 36 6 % ;并呈现出明显的剂量依赖关系 ,此反义肽预处理过的新生C5 7小鼠心肌 ,移植到BALB C小鼠 ,可较对照组平均延长 5 4天 (n =6 ,P <0 0 0 1)。结论 :人工合成的B7反义肽在体外可以通过抑制CD2 8 B7共刺激通路 ,抑制淋巴细胞的增殖 ,并可用于延长心肌移植物存活 ,为进一步研究其在移植免疫方面的应用提供了有益的启示。 展开更多
关键词 B7 反义肽 同种异基因移植 排斥反应 研究
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IP10对机体抗肿瘤免疫应答的增强作用及其机制 被引量:8
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作者 杨秀利 储以微 +1 位作者 邓富刚 熊思东 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期99-103,108,共6页
目的:研究IP10对机体整体及肿瘤局部细胞免疫应答的影响,从而探讨其抗肿瘤的作用及机制。方法:基因转染的方法建立稳定表达IP10的4T1细胞株(IP10-4T1)。观察IP10-4T1细胞生长情况,观察荷瘤小鼠的生存情况。3H-TdR掺入法检测细胞免疫应... 目的:研究IP10对机体整体及肿瘤局部细胞免疫应答的影响,从而探讨其抗肿瘤的作用及机制。方法:基因转染的方法建立稳定表达IP10的4T1细胞株(IP10-4T1)。观察IP10-4T1细胞生长情况,观察荷瘤小鼠的生存情况。3H-TdR掺入法检测细胞免疫应答水平。F icoll密度梯度离心法分离肿瘤浸润淋巴细胞,流式细胞技术检测CXCR3的表达。结果:pcDNA3-IP10转染不影响4T1细胞体外生长。IP10-4T1形成的肿瘤生长明显减慢,瘤重显著减轻,该荷瘤小鼠生存率显著增加(P<0.05)。与对照组比较,IP10-4T1细胞免疫的小鼠脾细胞特异性增殖反应明显(P<0.05)。IP10-4T1细胞形成的肿瘤内CXCR3+细胞浸润增加,肿瘤内分离的淋巴细胞抗原刺激后显著增殖(P<0.05)。结论:IP10可能通过诱导机体细胞免疫应答、促进肿瘤内淋巴细胞浸润并增强肿瘤内淋巴细胞增殖活性介导抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 IP10 抗肿瘤免疫 机制
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未成熟树突状细胞诱导建立异基因嵌合体及延长移植物存活的可能机制 被引量:3
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作者 于平 熊思东 +2 位作者 何球藻 储以微 郑秀娟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期269-272,共4页
目的 :研究应用供体来源的未成熟树突状细胞 (imDCs)注射受体小鼠后 ,诱导形成异基因嵌合体及延长移植物存活的机制。方法 :(1)应用供体 (C5 7BL 6 )来源的骨髓细胞 ,在体外培养出imDCs ,灭活后体内输注或体外直接刺激受体小鼠(Balb C)... 目的 :研究应用供体来源的未成熟树突状细胞 (imDCs)注射受体小鼠后 ,诱导形成异基因嵌合体及延长移植物存活的机制。方法 :(1)应用供体 (C5 7BL 6 )来源的骨髓细胞 ,在体外培养出imDCs ,灭活后体内输注或体外直接刺激受体小鼠(Balb C)的脾细胞 ,观察脾细胞对供体细胞的应答反应 ;(2 )取已建立异基因嵌合体并有效延长移植物存活的受体小鼠的脾细胞 ,观察其对供体细胞刺激的应答反应 ;(3)通过半定量RT PCR检测不同免疫状态下Th1 Th2型细胞因子的表达情况。结果 :应用imDCs体外预刺激脾细胞或体内注射imDCs受鼠的脾细胞 ,均呈现对供鼠脾细胞刺激的特异性低应答 ,这种低应答主要出现在受鼠脾细胞在供鼠脾细胞刺激后的 72小时内 ;建立异基因嵌合体并延长移植物存活的受鼠对来自供鼠脾细胞的刺激也表现为低应答 ,而对于无关第三者脾细胞的刺激仍保持较高水平 ,二者比较 ,统计学处理有显著性差异 (P <0 0 5 ) ;在诱导形成异基因嵌合体及延长移植物存活的过程中 ,一定程度上显示出Th1 Th2模式的偏移。结论 :应用供体来源的imDCs注射给受体 ,诱导形成异基因嵌合体和延长移植物存活的机制可能与imDCs诱导受体T细胞无能有关 ,而且此过程中在一定程度上表现为Th1向Th2方向的免疫偏移。 展开更多
关键词 未成熟树突状细胞 异基因嵌合体 免疫耐受 移植物
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