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肝癌Bel7402细胞HLA-E基因上调对NK细胞体外杀伤作用的影响 被引量:3
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作者 张彤 曾宪成 +4 位作者 方天翎 陈文捷 聂常富 李华 陈规划 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期2081-2085,共5页
目的:探讨肝癌Bel7402细胞人类白细胞抗原-E(HLA-E)基因上调对NK细胞体外杀伤作用的影响。方法:体外构建Lentivirus/CMV/GFP-HLA-E慢病毒表达载体并转导肝癌Bel7402细胞,采用RT-PCR和Western blotting方法检测肝癌Bel7402细胞HLA-E基因m... 目的:探讨肝癌Bel7402细胞人类白细胞抗原-E(HLA-E)基因上调对NK细胞体外杀伤作用的影响。方法:体外构建Lentivirus/CMV/GFP-HLA-E慢病毒表达载体并转导肝癌Bel7402细胞,采用RT-PCR和Western blotting方法检测肝癌Bel7402细胞HLA-E基因mRNA水平和蛋白水平的表达,分析肝癌Bel7402细胞HLA-E基因上调及HLA-ABC抗体封闭靶细胞相应位点对NK细胞体外杀伤作用的影响。结果:Lentivirus/CMV/GFP-HLA-E重组慢病毒载体感染Bel7402细胞后不同时段(24h、48h、72h、96h)的HLA-E mRNA的表达明显上调,除在感染后24h(P<0.05)外,慢病毒过表达组在感染后48h、72h、96h与Bel7402组比较,显著差异(P<0.01)。蛋白水平的表达亦明显上调:24h、48h、72h、96h外源性/内源性HLA-E吸光度比值与12h比较显著差异(P<0.01)。未封闭的Bel7402组和Bel7402 LentiHLA-E组比较,NK细胞的杀瘤活性差异显著(P<0.05或P<0.01);封闭组和未封闭组比较,NK细胞的杀瘤活性差异显著(P<0.05);Bel7402(封闭组)和Bel7402 LentiHLA-E(封闭组)比较,NK细胞的杀瘤活性有显著差异(P<0.01)。结论:Lentivirus/CMV/GFP-HLA-E慢病毒表达载体能有效增加HLA-E的表达。NK细胞对HLA-E基因表达上调的Bel7402细胞的靶杀伤作用降低;抗HLA-ABC单抗封闭靶细胞相应位点后,NK细胞对靶细胞的杀伤能力普遍有所提高。 展开更多
关键词 人白细胞抗原E 肝细胞 基因表达 自然杀伤细胞
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HLA-E在肝癌细胞系中的表达 被引量:2
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作者 张彤 曾宪成 +4 位作者 李华 陈文捷 方天翎 聂常富 陈规划 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1884-1886,共3页
目的:研究人类白细胞抗原E(HLA-E)在肝癌细胞系中的表达情况。方法:通过real-time PCR和Western blotting技术研究5种肝癌细胞系和胎肝细胞系中HLA-E mRNA和蛋白的表达情况,进行相对定量分析。结果:Real-time PCR检测显示,HepG2细胞、Be... 目的:研究人类白细胞抗原E(HLA-E)在肝癌细胞系中的表达情况。方法:通过real-time PCR和Western blotting技术研究5种肝癌细胞系和胎肝细胞系中HLA-E mRNA和蛋白的表达情况,进行相对定量分析。结果:Real-time PCR检测显示,HepG2细胞、Bel7402细胞、PLC细胞、MHCC97细胞和Hep3B2.1-7细胞这5种肝癌细胞系与L02胎肝细胞系的HLA-E mRNA水平比较,除Hep3B2.1-7细胞表达几乎接近缺失(P<0.01)外,其余无显著差异(P>0.05)。HepG2细胞、Bel7402细胞、PLC细胞、MHCC97细胞和Hep3B2.1-7细胞与L02细胞的HLA-E蛋白水平比较,差异显著(P<0.01),其中Hep3B2.1-7细胞表达缺失。结论:肝癌细胞系的HLA-E mRNA和蛋白表达不同步,可能存在转录后调控。 展开更多
关键词 人类白细胞抗原E 肝细胞癌 胎肝细胞 基因表达
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肝癌Hep3B细胞HLA-G过表达对NK细胞体外杀伤作用的影响 被引量:4
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作者 曾宪成 张彤 +3 位作者 李华 方天翎 聂常富 陈规划 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期613-618,共6页
目的:探讨肝癌Hep3B细胞白细胞抗原-G(HLA-G)过表达对NK细胞体外杀伤作用的影响。方法:实验分为正常对照组(无干预措施,Hep3B组)、空载体对照组(转染空质粒,Hep3B-GFP组)和实验组(转染pEGFP-C1-HLA-G质粒,Hep3B-HLA-G组)。构建HLA-G真... 目的:探讨肝癌Hep3B细胞白细胞抗原-G(HLA-G)过表达对NK细胞体外杀伤作用的影响。方法:实验分为正常对照组(无干预措施,Hep3B组)、空载体对照组(转染空质粒,Hep3B-GFP组)和实验组(转染pEGFP-C1-HLA-G质粒,Hep3B-HLA-G组)。构建HLA-G真核表达质粒,转染至Hep3B细胞,经G418筛选,建立稳定过表达HLA-G的肝癌Hep3B细胞。Real-time PCR及Western blotting检测肝癌Hep3B细胞HLA-G mRNA及蛋白质水平的表达。分析肝癌Hep3B细胞HLA-G过表达及HLA-ABC抗体封闭靶细胞相应位点对NK细胞体外杀伤作用的影响。结果:经酶切及测序鉴定证实,插入序列与设计的序列相符。Real-time PCR和Western blotting结果均表明,转染重组质粒的Hep3B细胞HLA-G过表达(P<0.01)。NK细胞对转染pEGFP-C1-HLA-G的Hep3B细胞杀伤作用明显降低(P<0.01),HLA-ABC单抗封闭靶细胞相应位点后,NK细胞对Hep3B、Hep3B-GFP和Hep3B HLA-G细胞的杀伤均增加(P<0.01)。结论:pEGFP-C1-HLA-G表达载体可有效增加HLA-G表达,HLA-G过表达可以削弱NK细胞对肝癌细胞的杀伤效应。HLA-ABC单抗封闭靶细胞相应位点后,NK细胞对靶细胞的杀伤能力普遍有所提高。 展开更多
关键词 人类白细胞抗原-G 基因重组 肝肿瘤
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腹腔镜手术在闭合性腹外伤中的应用 被引量:5
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作者 黄延年 姚金科 《中国微创外科杂志》 CSCD 2007年第7期680-681,共2页
目的 探讨腹腔镜手术在闭合性腹外伤中的价值。方法 2003年12月~2006年7月腹腔镜诊治47例闭合性腹外伤。在全麻或硬膜外麻醉下,脐下做1 cm小切口,根据病人的具体情况选用气腹针或通过开放性通道建立人工气腹。未明确诊断者可适当置1~2... 目的 探讨腹腔镜手术在闭合性腹外伤中的价值。方法 2003年12月~2006年7月腹腔镜诊治47例闭合性腹外伤。在全麻或硬膜外麻醉下,脐下做1 cm小切口,根据病人的具体情况选用气腹针或通过开放性通道建立人工气腹。未明确诊断者可适当置1~2个trocar配合探查;若明确诊断,根据病灶位置选择操作孔位置,一般2~3个。根据病变情况再做相应处理。结果 47例经腹腔镜手术明确诊断:肝破裂15例,脾破裂13例,小肠破裂9例,肠系膜损伤3例,胰腺损伤2例,腹膜后血肿2例,腹内多脏器损伤3例。腹腔镜下完成手术28例,17例中转开腹,2例诊断为腹膜后血肿无须处理。47例随访6个月无并发症发生。结论 腹腔镜下可明确诊断闭合性腹外伤,使患者得到及时、有效、合理的治疗。 展开更多
关键词 闭合性腹外伤 腹腔镜
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