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山羊痘病毒晚转录因子VLTF-1的原核表达及生物信息分析 被引量:1
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作者 张成 王玉婷 +4 位作者 杨勇飞 柳璇 吴锦艳 尚佑军 李有文 《现代畜牧兽医》 2022年第3期20-25,共6页
试验旨在研究山羊痘病毒晚转录因子VLTF-1的特性。研究以山羊痘病毒SS基因组株为模板,采用PCR方法扩增晚转录因子VLTF-1基因,采用基因克隆常规方法与pET-42b表达载体相连接构建原核表达载体,经菌液PCR、双酶切和测序鉴定,阳性克隆转化... 试验旨在研究山羊痘病毒晚转录因子VLTF-1的特性。研究以山羊痘病毒SS基因组株为模板,采用PCR方法扩增晚转录因子VLTF-1基因,采用基因克隆常规方法与pET-42b表达载体相连接构建原核表达载体,经菌液PCR、双酶切和测序鉴定,阳性克隆转化大肠杆菌BL21,以0.1 mmol/L IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE电泳和Western Blot检测表达情况;同时对VLTF-1基因及其蛋白特性进行生物信息学分析。结果显示,PCR扩增的目的基因全长783 bp,与参考株Pellor同源性为100%,推测其编码261个氨基酸。遗传进化树分析表明,羊痘病毒属的3个种各分成一个分支,目的基因与山羊痘毒株位于同一分支。测序结果显示,目的基因表达载体构建正确,SDS-PAGE检测表达了27 kDa的蛋白,Western Blot鉴定表明目的蛋白得到表达。生物信息学分析结果显示,SS株的VLTF-1基因与山羊痘病毒聚于一支,该蛋白是一个跨膜亲水蛋白,具有26个磷酸化位点,二级结构是其结构连接5个α-螺旋。研究表明,试验成功克隆晚转录因子VLTF-1基因,并诱导表达蛋白,预测该蛋白的生物学信息。 展开更多
关键词 山羊痘病毒 晚转录因子VLTF-1基因 原核表达 生物信息学分析
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1例疑似溶血性曼氏杆菌感染的诊断及生物信息学分析
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作者 梁成孔 孙鹏亮 李莲瑞 《现代畜牧兽医》 2022年第6期22-25,共4页
试验旨在研究溶血性曼氏杆菌的生物学特性,以新疆阿克苏市某羊场疑似感染溶血性曼氏杆菌的绵羊为研究对象,对其感染情况和发病症状进行调查记录;解剖病死羊,无菌采集组织脏器,通过普通PCR法对病料进行实验室病原学诊断,同时对溶血性曼... 试验旨在研究溶血性曼氏杆菌的生物学特性,以新疆阿克苏市某羊场疑似感染溶血性曼氏杆菌的绵羊为研究对象,对其感染情况和发病症状进行调查记录;解剖病死羊,无菌采集组织脏器,通过普通PCR法对病料进行实验室病原学诊断,同时对溶血性曼氏杆菌基因及其蛋白特性进行生物信息学分析。结果显示,病死羊肺脏充血、出血、实变,肠道出血、淋巴结肿大;巴氏杆菌PCR、16S rRNA检测结果均为阳性,该病例最终诊断为溶血性曼氏杆菌感染。生物信息学分析结果显示,该蛋白为亲水性蛋白,具有54个磷酸化位点,二级结构为其结构连接5个α-螺旋。研究表明,该羊场羊感染溶血性曼氏杆菌。 展开更多
关键词 溶血性曼氏杆菌 16S rRNA 巴氏杆菌 分子生物学
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