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聚丙烯酰胺凝胶电泳分离恶性疟原虫pfs25膜蛋白的免疫原性研究
1
作者
陈勇
李萍
+2 位作者
张予超
雷清
蒋琳
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第7期694-696,共3页
目的:研究聚丙烯酰胺凝胶电泳法纯化的pfs25蛋白的免疫原性变化。方法:利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)分离了毕赤酵母表达的恶性疟原虫pfs25膜蛋白,按照常规程序将分离的pfs25膜蛋白免疫小鼠,以验证其免疫原性。通过荧光光谱分析...
目的:研究聚丙烯酰胺凝胶电泳法纯化的pfs25蛋白的免疫原性变化。方法:利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)分离了毕赤酵母表达的恶性疟原虫pfs25膜蛋白,按照常规程序将分离的pfs25膜蛋白免疫小鼠,以验证其免疫原性。通过荧光光谱分析、酶联免疫吸附实验,分析了聚丙烯酰胺凝胶电泳过程中pfs25蛋白质免疫原性的变化情况。结果:SDS-PAGE方法成功分离了pfs25蛋白,免疫小鼠后不能产生特异性抗体;与pfs25标准品相比,纯化的pfs25蛋白的荧光光谱发生了改变,但是ELISA结果均为阳性。结论:聚丙烯酰胺凝胶电泳法纯化的pfs25蛋白保留了其免疫反应性,丧失了免疫原性。
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关键词
pfs25
SDS-PAGE
免疫原性
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职称材料
Pfs25蛋白单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA的建立
被引量：
11
2
作者
李萍
马亚茹
+3 位作者
陆俭
雷清
陈勇
蒋琳
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第12期1330-1334,共5页
目的:制备恶性疟原虫子孢子囊表面膜蛋白Pfs25的单克隆抗体(mAb),建立检测Pfs25蛋白的双抗体夹心ELISA方法。方法:纯化毕赤酵母表达的重组Pfs25蛋白,并免疫BALB/c小鼠,采用骨髓瘤细胞Sp2/0与免疫BALB/c鼠脾细胞杂交的细胞融合技术,通过...
目的:制备恶性疟原虫子孢子囊表面膜蛋白Pfs25的单克隆抗体(mAb),建立检测Pfs25蛋白的双抗体夹心ELISA方法。方法:纯化毕赤酵母表达的重组Pfs25蛋白,并免疫BALB/c小鼠,采用骨髓瘤细胞Sp2/0与免疫BALB/c鼠脾细胞杂交的细胞融合技术,通过间接ELISA检测获得分泌抗Pfs25抗体的阳性杂交瘤细胞株,通过免疫F1鼠诱生腹水,纯化腹水,并进行mAb的各项生物学鉴定。辣根过氧化物酶(HRP)标记纯化后的抗体,以4B7为包被抗体,1B4为酶标抗体,建立了双抗体夹心ELISA法。结果:获得3株抗Pfs25的杂交瘤细胞株,其中2株有良好的稳定性和特异性。并建立了双抗体夹心ELISA检测法,检测有效范围在0.07～1 mg/mL,其检测灵敏度为41.6 ng/mL。结论:成功制备抗Pfs25蛋白的单克隆抗体,并建立了一种可用于Pfs25蛋白检测的双抗体夹心ELISA法,为Pfs25蛋白制备传播阻断型疟疾疫苗奠定了基础。
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关键词
Pfs25蛋白
单克隆抗体
双抗体夹心ELISA
传播阻断型疟疾疫苗
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职称材料
题名
聚丙烯酰胺凝胶电泳分离恶性疟原虫pfs25膜蛋白的免疫原性研究
1
作者
陈勇
李萍
张予超
雷清
蒋琳
机构
国药集团兰州生物制品研究所
有限责任公司
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第7期694-696,共3页
文摘
目的:研究聚丙烯酰胺凝胶电泳法纯化的pfs25蛋白的免疫原性变化。方法:利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)分离了毕赤酵母表达的恶性疟原虫pfs25膜蛋白,按照常规程序将分离的pfs25膜蛋白免疫小鼠,以验证其免疫原性。通过荧光光谱分析、酶联免疫吸附实验,分析了聚丙烯酰胺凝胶电泳过程中pfs25蛋白质免疫原性的变化情况。结果:SDS-PAGE方法成功分离了pfs25蛋白,免疫小鼠后不能产生特异性抗体;与pfs25标准品相比,纯化的pfs25蛋白的荧光光谱发生了改变,但是ELISA结果均为阳性。结论:聚丙烯酰胺凝胶电泳法纯化的pfs25蛋白保留了其免疫反应性,丧失了免疫原性。
关键词
pfs25
SDS-PAGE
免疫原性
Keywords
pfs25
SDS-PAGE
Immunogenicity
分类号
R392.1 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
Pfs25蛋白单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA的建立
被引量：
11
2
作者
李萍
马亚茹
陆俭
雷清
陈勇
蒋琳
机构
国药集团兰州生物制品研究所
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第12期1330-1334,共5页
文摘
目的:制备恶性疟原虫子孢子囊表面膜蛋白Pfs25的单克隆抗体(mAb),建立检测Pfs25蛋白的双抗体夹心ELISA方法。方法:纯化毕赤酵母表达的重组Pfs25蛋白,并免疫BALB/c小鼠,采用骨髓瘤细胞Sp2/0与免疫BALB/c鼠脾细胞杂交的细胞融合技术,通过间接ELISA检测获得分泌抗Pfs25抗体的阳性杂交瘤细胞株,通过免疫F1鼠诱生腹水,纯化腹水,并进行mAb的各项生物学鉴定。辣根过氧化物酶(HRP)标记纯化后的抗体,以4B7为包被抗体,1B4为酶标抗体,建立了双抗体夹心ELISA法。结果:获得3株抗Pfs25的杂交瘤细胞株,其中2株有良好的稳定性和特异性。并建立了双抗体夹心ELISA检测法,检测有效范围在0.07～1 mg/mL,其检测灵敏度为41.6 ng/mL。结论:成功制备抗Pfs25蛋白的单克隆抗体,并建立了一种可用于Pfs25蛋白检测的双抗体夹心ELISA法,为Pfs25蛋白制备传播阻断型疟疾疫苗奠定了基础。
关键词
Pfs25蛋白
单克隆抗体
双抗体夹心ELISA
传播阻断型疟疾疫苗
Keywords
Pfs25 protein
monoclonal antibody
double antibodies sandwich ELISA
transmissionblocking malaria vaccine
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
聚丙烯酰胺凝胶电泳分离恶性疟原虫pfs25膜蛋白的免疫原性研究
陈勇
李萍
张予超
雷清
蒋琳
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
0
在线阅读
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职称材料
2
Pfs25蛋白单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA的建立
李萍
马亚茹
陆俭
雷清
陈勇
蒋琳
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011
11
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