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金钗石斛多糖的酶解工艺优化及其抗氧化活性 被引量:1
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作者 王筱玥 刘学 +2 位作者 刘春环 刘晶 杨成 《精细化工》 北大核心 2025年第4期837-848,共12页
采用α-半乳糖苷酶对金钗石斛多糖30%醇沉(30%为乙醇水溶液中乙醇的质量分数)组分(DNP-30)进行了酶解。以酶解产物(DNP-30E)对2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS+)自由基清除率为指标,通过单因素和响应面实验确定了最佳... 采用α-半乳糖苷酶对金钗石斛多糖30%醇沉(30%为乙醇水溶液中乙醇的质量分数)组分(DNP-30)进行了酶解。以酶解产物(DNP-30E)对2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS+)自由基清除率为指标,通过单因素和响应面实验确定了最佳酶解条件。采用FTIR、NMR、高效凝胶渗透色谱仪对DNP-30和DNP-30E进行了表征。基于体外和细胞内抗氧化活性实验、建立十二烷基硫酸钠(SDS)刺激HaCaT细胞氧化应激模型,探究了DNP-30和DNP-30E的抗氧化能力。结果表明,在α-半乳糖苷酶加酶量20 U/mL、pH=7.0、酶解温度46℃、酶解时间11 h的最佳酶解条件下,DNP-30E对ABTS+自由基清除率平均值为85.62%。与DNP-30相比,DNP-30E还原糖含量由0.63%±0.35%升至48.66%±0.51%,重均相对分子质量由7.95×10^(5)Da降至2083 Da。酶解过程造成多糖中的葡萄糖(1α→6)-甘露糖〔Glu(1α→6)-Man〕键发生断裂,并引起葡萄糖端基氢构型翻转。当多糖质量浓度为2.0 g/L时,DNP-30E提高了ABTS+自由基、羟基自由基、超氧自由基清除率;当多糖质量浓度为5.0~10.0 g/L时,DNP-30E细胞毒性比DNP-30显著降低。多糖质量浓度为0.5 g/L时,DNP-30E组比DNP-30组的活性氧含量降低了34.21%,丙二醛含量降低了50.2%,超氧化物歧化酶活力提升了84.17%,表现出更强的抗氧化能力。 展开更多
关键词 金钗石斛多糖 Α-半乳糖苷酶 酶解工艺优化 抗氧化活性 HACAT细胞 中药现代化技术
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破壁松花粉对镉中毒大鼠的保护作用
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作者 邢岩 邵帅 +2 位作者 和晓贤 宋曙辉 张丽梅 《食品工业科技》 北大核心 2025年第14期412-418,共7页
目的:研究破壁松花粉对镉中毒大鼠的保护作用。方法:雄性SD大鼠50只,随机分为对照组、模型组、松花粉低、中、高剂量组。模型组和松花粉各干预组每日腹腔注射氯化镉(0.2 mg/kg体重),松花粉低、中、高剂量组大鼠每日喂饲破壁松花粉1、2、... 目的:研究破壁松花粉对镉中毒大鼠的保护作用。方法:雄性SD大鼠50只,随机分为对照组、模型组、松花粉低、中、高剂量组。模型组和松花粉各干预组每日腹腔注射氯化镉(0.2 mg/kg体重),松花粉低、中、高剂量组大鼠每日喂饲破壁松花粉1、2、3 g,持续28 d。观察并检测大鼠血液、肝脏、肾脏、股骨、睾丸、粪尿中镉、锌含量、相关理化指标与基因表达水平,以及组织形态学变化。结果:与对照组相比,模型组大鼠睾丸指数显著下降(P<0.05),血清、股骨、肝、肾、睾丸中镉含量均显著增高(P<0.05),大鼠肾脏和睾丸产生严重的组织形态学改变。松花粉各给药组可不同程度改善肾和睾丸的病理损伤,高剂量组效果优于低中剂量组。与模型组相比,高剂量松花粉干预后可显著提高染毒大鼠血清超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)水平,降低脂质过氧化物(Lipid Peroxidation,LPO)水平(P<0.05),上调睾丸核转录因子E2相关因子2(Nuclear Factor Erythroid 2-Related Factor 2,Nrf2)、血红素加氧酶1(Heme Oxygenase 1,HO-1)和B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)表达水平,下调半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)基因表达(P<0.05),增加镉在粪尿中排出,显著减少镉在大鼠体内蓄积,增加锌水平(P<0.05)。结论:破壁松花粉可通过激活Nrf2/HO-1通路,提高机体抗氧化能力,同时增加锌的摄入,促进镉排出,有效降低镉对机体损害。 展开更多
关键词 松花粉 氧化应激 排镉 保护作用
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杏鲍菇复合花粉发酵膏改善小鼠光老化损伤作用
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作者 王思凡 张丽梅 +5 位作者 贺韦衡 洪佳瑞 邢岩 王玥 唐宁 程永强 《保鲜与加工》 北大核心 2025年第5期129-135,共7页
探究一种杏鲍菇复合花粉发酵膏对小鼠皮肤光老化损伤的改善作用。构建小鼠皮肤中波紫外线(UVB)光老化模型,以维生素E为对照,灌胃不同剂量的杏鲍菇复合花粉发酵膏,通过小鼠体质量变化、皮肤含水量、羟脯氨酸含量、皮肤苏木精-伊红(HE)染... 探究一种杏鲍菇复合花粉发酵膏对小鼠皮肤光老化损伤的改善作用。构建小鼠皮肤中波紫外线(UVB)光老化模型,以维生素E为对照,灌胃不同剂量的杏鲍菇复合花粉发酵膏,通过小鼠体质量变化、皮肤含水量、羟脯氨酸含量、皮肤苏木精-伊红(HE)染色及小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)抗氧化水平和血常规、血生化指标来评价杏鲍菇复合花粉发酵膏对小鼠光老化损伤的改善作用。结果表明,UVB小鼠皮肤光老化模型和杏鲍菇复合花粉发酵膏对小鼠体质量和血常规无影响;光老化处理会显著降低小鼠皮肤含水量、羟脯氨酸含量和小鼠血清SOD、GSH-Px、MDA抗氧化水平;灌胃中、高剂量的杏鲍菇复合花粉发酵膏可以显著增加小鼠皮肤含水量和羟脯氨酸含量,提高血清SOD、GSH-Px、MDA抗氧化水平,使小鼠痂皮形成和痂下炎性细胞浸润现象减少;血生化结果显示,杏鲍菇复合花粉发酵膏可显著升高小鼠血液中钾离子浓度,降低乳酸脱氢酶含量,减少炎症反应。综上,杏鲍菇复合花粉发酵膏具有良好改善光老化损伤作用和抗氧化能力。 展开更多
关键词 杏鲍菇 花粉发酵 光老化损伤 抗氧化
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松茸的发酵条件优化及其对酪氨酸酶的抑制机理研究 被引量:4
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作者 郭璟煊 刘学 +2 位作者 刘春环 李颖 杨成 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第13期64-71,共8页
为了提高松茸的抗酪氨酸酶活性,利用嗜酸乳杆菌对其进行发酵,并探究其活性变化机理。通过单因素试验法优化了发酵条件,采用苯酚-硫酸法、二喹啉甲酸法和HPLC分析发酵前后物质含量变化,通过酶反应动力学分析、铜离子螯合实验和酪氨酸酶... 为了提高松茸的抗酪氨酸酶活性,利用嗜酸乳杆菌对其进行发酵,并探究其活性变化机理。通过单因素试验法优化了发酵条件,采用苯酚-硫酸法、二喹啉甲酸法和HPLC分析发酵前后物质含量变化,通过酶反应动力学分析、铜离子螯合实验和酪氨酸酶荧光猝灭实验研究发酵样品和酪氨酸酶之间的相互作用。结果表明,在嗜酸乳杆菌接种量5%,松茸添加量4%,发酵时间4 d时发酵样品有最大的酪氨酸酶抑制率,IC_(50)值从发酵前的>10 mg/mL降低至(4.74±0.21)mg/mL。发酵提高了总蛋白和寡肽(<1000 Da)的含量,促进了具有生物活性的寡肽和游离氨基酸的释放。进一步的机理研究表明,发酵样品通过混合型可逆抑制的方式降低酪氨酸酶活性,并能够螯合铜离子,半螯合浓度为(9.14±0.04)mg/mL,且能猝灭酪氨酸酶内源性荧光,说明发酵样品可能通过与铜离子结合,占据酪氨酸酶的活性位点,从而抑制其活性。嗜酸乳杆菌的发酵处理能显著提高松茸的酪氨酸酶抑制能力,研究结果为其在化妆品和功能性食品领域的应用提供了科学依据。 展开更多
关键词 发酵 嗜酸乳杆菌 松茸 酪氨酸酶抑制 机理探究
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复合花粉灵芝发酵工艺优化及活性物质组分分析
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作者 洪佳瑞 张丽梅 +5 位作者 王思凡 陈思逸 贺韦衡 王玥 唐宁 程永强 《保鲜与加工》 CAS 北大核心 2024年第11期107-117,共11页
对复合花粉灵芝液体发酵工艺进行优化并对发酵液中的活性物质进行分析,为花粉发酵加工提供一定的理论基础和数据支持。使用灵芝对复合花粉进行液体发酵,通过单因素及正交试验对发酵工艺进行优化,并采用高效液相色谱法分析发酵液中多糖... 对复合花粉灵芝液体发酵工艺进行优化并对发酵液中的活性物质进行分析,为花粉发酵加工提供一定的理论基础和数据支持。使用灵芝对复合花粉进行液体发酵,通过单因素及正交试验对发酵工艺进行优化,并采用高效液相色谱法分析发酵液中多糖的单糖组成,利用超高效液相色谱质谱联用法分析发酵液中的酚酸。结果表明,最优发酵工艺条件为花粉添加量1.5%、初始pH为7、发酵时间11 d,获得的复合花粉灵芝发酵液多糖含量为(393.69±4.09)mg/100 mL,总黄酮含量为(5.63±0.20)mg/100 mL,铁离子还原抗氧化能力达到(2.303±0.143)μmol/mL;发酵液中的多糖由甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖10种单糖组成,其中葡萄糖含量(49.42%)最高;发酵液中含有5种酚酸类物质,分别为槲皮素、对羟基苯甲酸、木犀草素、芹菜酸和山奈酚,其中山奈酚含量(683.71 mg/kg)最高。综上,复合花粉灵芝发酵液富含多糖和黄酮类物质,抗氧化能力较高,具有潜在的保健功效。 展开更多
关键词 花粉 灵芝 发酵工艺 活性物质
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基于气相色谱-声表面波传感器联用技术的中医脾胃证候辨识 被引量:8
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作者 陈星 陈璟 +7 位作者 陈超 董浩 傅炜 李莹 陈泽涛 卢妍利 刘军 刘清君 《世界中医药》 CAS 2020年第11期1540-1545,共6页
目的:建立以呼出气为检测目标的基于气相色谱-声表面波传感器联用的中医闻诊系统,用于中医脾胃证候的辨识。方法:通过气相色谱-声表面波传感器联用的方法建立中医闻诊系统,采用气袋收集112例临床脾胃异常与162例脾胃无异常被试者的呼出... 目的:建立以呼出气为检测目标的基于气相色谱-声表面波传感器联用的中医闻诊系统,用于中医脾胃证候的辨识。方法:通过气相色谱-声表面波传感器联用的方法建立中医闻诊系统,采用气袋收集112例临床脾胃异常与162例脾胃无异常被试者的呼出气,利用该中医闻诊系统对所收集的呼出气进行检测分析,并通过116例受试者进行模型验证,建立呼出气与脾胃证候的关系模型。结果:利用人工神经网络建立了被试呼出气与脾胃异常的关系模型,该模型的ROC曲线下面积达到了0.930,对脾气虚、脾胃湿热和脾胃虚寒等证候的辨识准确率均达84%以上。结论:通过所建立的中医闻诊系统,建立了一种可经由检测呼出气的手段对脾胃异常进行中医证候辨识的新型临床辅助诊断系统。 展开更多
关键词 气相色谱 声表面波传感器 中医脾胃 呼出气 中医闻诊
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碘酸钠诱导大鼠视网膜退行性改变的作用机制 被引量:1
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作者 邢岩 张丽梅 +2 位作者 赵圆圆 侯思远 金锋 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2023年第11期853-857,共5页
目的 探讨碘酸钠(NaIO3)诱导大鼠视网膜退行性改变的作用机制。方法 取雄性SD大鼠20只,随机分为对照组和模型组。采用30 mg·kg^(-1)NaIO3尾静脉注射,建立大鼠干性年龄相关性黄斑变性病变模型。继续饲养21 d,检测大鼠视网膜电图(ER... 目的 探讨碘酸钠(NaIO3)诱导大鼠视网膜退行性改变的作用机制。方法 取雄性SD大鼠20只,随机分为对照组和模型组。采用30 mg·kg^(-1)NaIO3尾静脉注射,建立大鼠干性年龄相关性黄斑变性病变模型。继续饲养21 d,检测大鼠视网膜电图(ERG),观察大鼠视网膜组织病理学变化,检测大鼠视网膜组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量,采用液相色谱-质谱联用分析差异蛋白情况。结果 ERG检测结果显示,模型组大鼠暗适应0.01ERG、暗适应3.0ERG、暗适应3.0振荡电位以及明适应3.0ERG和明适应3.0闪烁光反应b波振幅分别比对照组降低79.98%、81.64%、76.08%、61.68%、57.25%,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与对照组相比,模型组大鼠视网膜组织细胞层数减少,尤其是外核层、内核层结构紊乱,呈现明显的波浪形变化。与对照组相比,模型组大鼠视网膜组织SOD和CAT活性分别下降12.51%和14.08%,MDA含量增加57.96%,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。GO分析显示,模型组较对照组上调的80个蛋白,所参与的生物学过程在调控基因表达(positive regulation of gene expression)、炎症反应(inflammatory response)、衰老(aging)以及对白细胞介素(IL)-6的细胞反应(cellular response to interleukin-6)等方面具有显著性。18个下调蛋白参与的生物学过程非常集中,主要表现在视觉感知(visual perception)、对光刺激的反应(response to light stimulus)、光转导(phototransduction)。KEGG分析结果显示,差异蛋白主要富集于光转导(phototransduction)、蛋白酶体(proteasome)、JAK-STAT信号通路(JAK-STAT signaling pathway)、细胞内吞(endocytosis)、补体及凝血级联反应(complement and coagulation cascades)等通路。结论 NaIO3可通过特异性氧化应激引发炎症与免疫过程,同时抑制视网膜光转导通路,诱导视网膜退行性改变。 展开更多
关键词 视网膜退行性改变 碘酸钠 蛋白质组学 年龄相关性黄斑变性
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松花粉提取物对胰岛素抵抗HepG2细胞糖脂代谢的影响 被引量:7
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作者 赵可心 夏凯 +4 位作者 苑鹏 温霖 李爱民 李永强 段盛林 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期83-90,共8页
研究松花粉提取物对胰岛素抵抗Hep G2细胞糖脂代谢的影响,探究其潜在分子机制。采用游离脂肪酸构建Hep G2细胞胰岛素抵抗模型,经油红O染色确认模型成功后,采用MTT法研究不同极性的松花粉提取物对细胞增殖的影响。测定各组上清葡萄糖,胞... 研究松花粉提取物对胰岛素抵抗Hep G2细胞糖脂代谢的影响,探究其潜在分子机制。采用游离脂肪酸构建Hep G2细胞胰岛素抵抗模型,经油红O染色确认模型成功后,采用MTT法研究不同极性的松花粉提取物对细胞增殖的影响。测定各组上清葡萄糖,胞内糖原,上清甘油三酯(TG),胞内TG以及胞内总胆固醇(TC)的含量,实时荧光PCR定量检测细胞裂解液中的调控糖脂代谢关键基因In SR、PI3K以及GLUT-4的mRNA表达水平。结果表明,不同极性的松花粉提取物在质量浓度为100~500μg/m L时,对细胞无明显毒性;不同极性的松花粉提取物能够促进细胞吸收葡萄糖,抑制糖原降解,抑制TG和TC的形成,促进TG向细胞外转运,从而改善Hep G2胰岛素抵抗状况。各松花粉处理组细胞PI3K以及GLUT-4 mRNA表达量均上调,说明松花粉能够激活PI3K/Akt/GLUT-4通路从而促进糖代谢;乙酸乙酯相(AE),正丁醇相(BU)和水相(WT)组细胞In SR mRNA表达量显著上调,说明这3种提取物能够通过提高胰岛素的敏感性改善胰岛素抵抗。 展开更多
关键词 松花粉 糖脂代谢 Q-RT-PCR INSR PI3K GLUT-4
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