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题名核桃过敏原成分PCR方法的建立
被引量：1
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作者
吴玉双
杨倩
黄淑迪
陈艳
姬华
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机构
石河子大学食品学院
国家食品安全风险评估中心中国医学科学院创新单位(
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出处
《农产品加工》
2023年第10期55-59,66,共6页
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基金
中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目(2019-I2M-5-024)。
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文摘
建立核桃过敏原成分的PCR检测方法,经查阅文献,并根据核桃中主要的过敏原基因Jug r 1设计出3对引物(Jur 1 primer,Jur 2 primer,Jur 3 primer),建立检测核桃过敏原成分的PCR方法并对其进行优化。3对引物可在核桃DNA中扩增出158 bp,145 bp,199 bp的DNA片段,依据引物的Tm值预测引物的最佳退火温度,一般退火温度要比Tm值低5℃,依据预测的退火温度设立温度梯度,进一步确定最佳退火温度;为了检测3对引物是否适用于加工食品,依据各引物的最佳退火温度建立各自的PCR反应条件,配制含不同植物DNA样品的反应体系,分别进行PCR检测;为提高精确度,将核桃DNA梯度稀释,制备出核桃含量为100.00%,10.00%,1.00%,0.10%,0.01%的DNA,分别进行PCR检测。结果表明,3对引物的最佳退火温度分别为50.7,64.0,64.0℃;各引物的特异性良好;3对引物检测的最低含量为0.10%,0.10%,0.01%。建立了一种食品中核桃过敏原的PCR检测方法,该方法特异性良好,精确度高。
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关键词
核桃过敏原
PCR检测
食品安全
食物过敏
特异性
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Keywords
walnut allergen
PCR detection
food safety
food allergy
specificity
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分类号
S664.1
[农业科学—果树学]
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