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人胚胎干细胞与急性早幼粒细胞白血病细胞的拉曼光谱特征研究 被引量:3
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作者 梁昊岳 程雪莲 +5 位作者 杨晚竹 于文颖 李长虹 董树旭 赵轼轩 茹永新 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2020年第1期1-9,共9页
急性早幼粒细胞白血病(APL)属于急性髓系白血病(AML),是FAB分型中的M3亚型。部分APL患者形成早幼粒细胞白血病/维甲酸受体融合基因,即PML-RARα融合基因。在内外界多种因素的共同作用下,早幼粒细胞白血病发病。胚胎干细胞(ESCs)具有多... 急性早幼粒细胞白血病(APL)属于急性髓系白血病(AML),是FAB分型中的M3亚型。部分APL患者形成早幼粒细胞白血病/维甲酸受体融合基因,即PML-RARα融合基因。在内外界多种因素的共同作用下,早幼粒细胞白血病发病。胚胎干细胞(ESCs)具有多向分化的能力,在一定诱导条件下, ESCs可以向造血系统分化。早幼粒细胞位于ESCs分化下游,为粒系分化阶段的一种细胞。探索一种非标记的技术方法鉴别不同分化阶段造血细胞具有重要的科研和实践意义。拉曼光谱技术可用于多种类型疾病的鉴别诊断研究,近年来应用前景愈加广阔。实验研究人胚胎干细胞系(ES)、急性早幼粒细胞白血病细胞系(NB4)和急性早幼粒细胞白血病患者(M3)白血病细胞的拉曼光谱特征,建立拉曼光谱非标记鉴别不同分化阶段白血病的方法,为临床实验研究提供基础。分别收集胚胎干细胞系(ES)、急性早幼粒细胞白血病细胞系(NB4)和4例M3患者白血病细胞,使用Horiba Xplora拉曼光谱仪获取拉曼光谱,每组或每例患者采集25~30个白血病细胞光谱。结合应用主成分分析法(PCA)、判别函数分析(DFA)、系统聚类分析和偏最小二乘判别分析(PLS-DA),对三类细胞的光谱进行分析并建立模型,进而对三类细胞进行鉴别,应用交互验证法对模型进行验证。同时结合细胞超微结构分析三种细胞的拉曼光谱特征。M3, NB4和ES细胞的拉曼光谱差别显著,主要表现为M3和NB4细胞光谱中对应核酸、蛋白质及脂类物质的谱峰明显高于ES细胞,其生物学机制包含了APL与PI3K/Akt/mTOR通路的密切关系。PI3K/Akt/mTOR通路在急性早幼粒细胞白血病细胞中存在异常激活,影响白血病细胞的生物大分子代谢;鉴别建模的总体分类准确率达100%(181/181),交互验证的分类准确率达98.9%(179/181),表明鉴别模型预测能力良好。拉曼光谱分析显示M3细胞和NB4细胞增殖代谢明显高于ES细胞,根据PCA-DFA、聚类分析及PLS-DA建立的拉曼光谱鉴别模型能够准确区分3种不同分化阶段白血病相关细胞,其结果与电镜结果相符。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞 急性早幼粒细胞白血病 拉曼光谱 超微结构
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Navitoclax联合柔红霉素促进红白血病细胞系K562、HEL和TF-1的凋亡
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作者 段永娟 刘超 +4 位作者 陈晓燕 吴文齐 郑佳睿 张英驰 竺晓凡 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期724-730,共7页
目的:研究促凋亡药物Navitoclax(NTX)联合化疗药物柔红霉素(Daunorubicin,DNR)对红白血病细胞凋亡的影响。方法:取对数生长期的K562、HEL和TF-1细胞,给予NTX、DNR以及2药联合,CCK-8检测细胞生长,Annexin V-DAPI双染流式细胞术检测细胞... 目的:研究促凋亡药物Navitoclax(NTX)联合化疗药物柔红霉素(Daunorubicin,DNR)对红白血病细胞凋亡的影响。方法:取对数生长期的K562、HEL和TF-1细胞,给予NTX、DNR以及2药联合,CCK-8检测细胞生长,Annexin V-DAPI双染流式细胞术检测细胞的凋亡,real-time RT-PCR检测凋亡相关基因BAX,BAK,BCL-2、BCL-xl、BIM的表达,对比分析NTX、DNR与2药联合对K562、HEL和TF-1细胞凋亡的影响。结果:NTX联合DNR能明显抑制K562、HEL和TF-1细胞的生长;凋亡检测结果显示,联合用药组K562、HEL和TF-1细胞凋亡率明显高于NTX、DNR单用药组(P<0.05);凋亡相关基因检测结果显示,K562细胞前凋亡蛋白基因BAK、BAX的表达水平在联合用药组明显高于2个单药组,抗凋亡蛋白基因BCL-2、BCL-xl的表达水平明显低于2个单药组(P<0.05);HEL细胞联合用药24 h BAK的表达水平高于DNR单药组(P<0.05);TF-1细胞联合用药24 h BCL-2的表达低于2个单用药组,48 h BAK的表达联合用药组最高,BCL-2、BCL-xl的表达水平在联合用药组低于NTX单药组(P<0.05)。结论:NTX联合DNR能明显促进红白血病细胞系K562、HEL和TF-1细胞凋亡,诱导凋亡相关基因的表达。本研究期待为红白血病的临床治疗提供新方案。 展开更多
关键词 Navitoclax 柔红霉素 凋亡
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PDGFR α^+细胞来源的SCF对小鼠成体造血的调控作用
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作者 郑昭烽 苟芳琳 +1 位作者 程涛 程辉 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期1349-1356,共8页
目的:探究PDGFRα+基质细胞来源的SCF对小鼠成体造血的影响。方法:构建Pdgfrα-CreER;tdTomato小鼠,应用流式细胞术和共聚焦显微镜分析该模型小鼠的肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和骨髓中PDGFRα+细胞的比例和分布情况;构建Pdgfrα-CreER;Scff... 目的:探究PDGFRα+基质细胞来源的SCF对小鼠成体造血的影响。方法:构建Pdgfrα-CreER;tdTomato小鼠,应用流式细胞术和共聚焦显微镜分析该模型小鼠的肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和骨髓中PDGFRα+细胞的比例和分布情况;构建Pdgfrα-CreER;Scfflox/flox条件性敲除小鼠,在PDGFRα+基质细胞中特异敲除Scf,采用流式细胞术检测敲除Scf对小鼠骨髓造血干/祖细胞(HSPC)比例的影响;通过全血细胞分析仪分析SCF对小鼠外周血细胞比例和数目的影响。结果:在PDGFRα+细胞中敲除Scf后,小鼠骨髓LKS-、LKS+、HSC、MPP1、MKP、PreGM、PreMegE、CFU-E细胞比例、数目减少;外周血红细胞数目、血红蛋白浓度下降。然而,在PDGFRα+细胞中敲除Scf对脾脏造血没有影响。结论:在小鼠成体造血过程中,特异敲除PDGFRα+细胞Scf会降低骨髓中HSPC的比例和外周血中红细胞数量,导致小鼠出现贫血状况。 展开更多
关键词 血小板源性生长因子受体α 干细胞因子 造血干细胞
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