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二维相关光谱和导数光谱色谱图法识别及解混高效液相色谱二极管阵列色谱峰
1
作者
芦丽
向健华
+2 位作者
方方
宫旭
孙晶
《化学分析计量》
CAS
2024年第10期86-93,共8页
基于高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)获得的色谱-光谱数据,建立了一种二元完全重叠液相色谱峰的快速解析定量方法:将HPLC-DAD采集的时间t、波长λ、吸光度S的三维光谱色谱数据,光谱经过背景补偿加Savitzky-Golay平滑预处理,得...
基于高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)获得的色谱-光谱数据,建立了一种二元完全重叠液相色谱峰的快速解析定量方法:将HPLC-DAD采集的时间t、波长λ、吸光度S的三维光谱色谱数据,光谱经过背景补偿加Savitzky-Golay平滑预处理,得到光谱波长方向的吸光度强度处理值随时间变化的光谱图,与对照品光谱计算光谱相似度,实现重叠峰的快速智能化识别;利用导数光谱色谱图法对预处理的色谱-光谱矩阵进行解析,获得原点波长,再利用二维相关光谱技术提取特征光谱后,得到基于特征光谱的原点波长的色谱流出曲线,进而得到分离后的色谱峰,实现重叠色谱峰的定量测定。该方法充分利用HPLC-DAD获得的三维色谱-光谱数据信息,能够将二元完全重叠色谱峰有效解析分离和定量测定,明显提高解析结果的准确度,并利用色谱工作站实现了数据采集、解析识别、定量分析一体化智能分析,方法简单高效。
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关键词
二维相关谱技术
导数光谱色谱图法
高效液相色谱-二极管阵列检测器
化妆品
重叠峰
识别
解混
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职称材料
基于超高效液相色谱-质谱法的肽段分析中非特异性吸附评估及通用型最小化策略
2
作者
张莹
杨静
+2 位作者
马跃新
曹玲
黄青
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第7期616-624,共9页
蛋白质组学技术在多肽和蛋白质类新型治疗药物的开发、临床诊断生物标志物的深入发掘中应用广泛。然而,多肽和蛋白质类大分子的非特异性吸附性质给分析方法的开发带来极大挑战,亟须一种通用型的策略去评估和降低非特异吸附对超高效液相...
蛋白质组学技术在多肽和蛋白质类新型治疗药物的开发、临床诊断生物标志物的深入发掘中应用广泛。然而,多肽和蛋白质类大分子的非特异性吸附性质给分析方法的开发带来极大挑战,亟须一种通用型的策略去评估和降低非特异吸附对超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)大分子检测造成的负面影响。研究以牛血清白蛋白(BSA)为模型,探讨其酶解后多肽组理化性质与吸附程度之间的相关性;根据肽段的响应和吸附程度设计分级策略;针对高响应、强吸附的ClassⅡ类肽段,从样品制备中离心管、进样瓶的选择,乃至液相色谱系统中色谱柱固定相、流速、梯度、柱温、洗针液的选择全过程设计试验,探讨非特异吸附的影响因素及其通用型最小化策略。结果显示,肽段的被吸附程度与其理化参数HPLC指数(HPLC Index)、肽段长度等显著相关(p<0.05),但仅凭上述参数仅能解释30%肽段的被吸附程度。改性的聚丙烯材料可使肽段溶液在储存或前处理过程中获得较高的回收率(24 h内回收率大于80%)。在对液相色谱条件的考察和优化过程中发现,C_(8)填料的色谱柱、高流速、缓梯度以及强洗针液,可使残留量降至最低(降低为原来的1/150)。柱温对残留的影响在肽段间存在较大个体差异,需要对不同的肽段具体分析以得到较少量的残留。研究以详实的数据考察并最小化模型肽段组在分析过程中的非特异吸附,提示了蛋白质类大分子药物分析方法建立中应重点关注的影响因素及其有效的解决方案。
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关键词
超高效液相色谱-质谱
蛋白质组学
非特异性吸附
定量
残留
多肽
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职称材料
题名
二维相关光谱和导数光谱色谱图法识别及解混高效液相色谱二极管阵列色谱峰
1
作者
芦丽
向健华
方方
宫旭
孙晶
机构
江苏省食品
药品
监督
检验研究院
国家药品监督管理局化学药杂质谱重点实验室
中国
药
科大学中
药
学院
出处
《化学分析计量》
CAS
2024年第10期86-93,共8页
基金
江苏省药品监督管理局药品监管科学科研计划项目(202314)。
文摘
基于高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)获得的色谱-光谱数据,建立了一种二元完全重叠液相色谱峰的快速解析定量方法:将HPLC-DAD采集的时间t、波长λ、吸光度S的三维光谱色谱数据,光谱经过背景补偿加Savitzky-Golay平滑预处理,得到光谱波长方向的吸光度强度处理值随时间变化的光谱图,与对照品光谱计算光谱相似度,实现重叠峰的快速智能化识别;利用导数光谱色谱图法对预处理的色谱-光谱矩阵进行解析,获得原点波长,再利用二维相关光谱技术提取特征光谱后,得到基于特征光谱的原点波长的色谱流出曲线,进而得到分离后的色谱峰,实现重叠色谱峰的定量测定。该方法充分利用HPLC-DAD获得的三维色谱-光谱数据信息,能够将二元完全重叠色谱峰有效解析分离和定量测定,明显提高解析结果的准确度,并利用色谱工作站实现了数据采集、解析识别、定量分析一体化智能分析,方法简单高效。
关键词
二维相关谱技术
导数光谱色谱图法
高效液相色谱-二极管阵列检测器
化妆品
重叠峰
识别
解混
Keywords
two-dimensional correlation spectroscopy
derivative spectroscopic chromatography
high-performance liquid chromatography-diode array detecto
cosmetics
overlapping peaks
recognition
unmixing
分类号
O657.7 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
基于超高效液相色谱-质谱法的肽段分析中非特异性吸附评估及通用型最小化策略
2
作者
张莹
杨静
马跃新
曹玲
黄青
机构
南京中医
药
大学
药
学院
江苏省食品
药品
监督
检验研究院
出处
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第7期616-624,共9页
基金
江苏省市场监督管理局科技计划项目(KJ21125050)
江苏省研究生科研创新计划(SJCX20_0553).
文摘
蛋白质组学技术在多肽和蛋白质类新型治疗药物的开发、临床诊断生物标志物的深入发掘中应用广泛。然而,多肽和蛋白质类大分子的非特异性吸附性质给分析方法的开发带来极大挑战,亟须一种通用型的策略去评估和降低非特异吸附对超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)大分子检测造成的负面影响。研究以牛血清白蛋白(BSA)为模型,探讨其酶解后多肽组理化性质与吸附程度之间的相关性;根据肽段的响应和吸附程度设计分级策略;针对高响应、强吸附的ClassⅡ类肽段,从样品制备中离心管、进样瓶的选择,乃至液相色谱系统中色谱柱固定相、流速、梯度、柱温、洗针液的选择全过程设计试验,探讨非特异吸附的影响因素及其通用型最小化策略。结果显示,肽段的被吸附程度与其理化参数HPLC指数(HPLC Index)、肽段长度等显著相关(p<0.05),但仅凭上述参数仅能解释30%肽段的被吸附程度。改性的聚丙烯材料可使肽段溶液在储存或前处理过程中获得较高的回收率(24 h内回收率大于80%)。在对液相色谱条件的考察和优化过程中发现,C_(8)填料的色谱柱、高流速、缓梯度以及强洗针液,可使残留量降至最低(降低为原来的1/150)。柱温对残留的影响在肽段间存在较大个体差异,需要对不同的肽段具体分析以得到较少量的残留。研究以详实的数据考察并最小化模型肽段组在分析过程中的非特异吸附,提示了蛋白质类大分子药物分析方法建立中应重点关注的影响因素及其有效的解决方案。
关键词
超高效液相色谱-质谱
蛋白质组学
非特异性吸附
定量
残留
多肽
Keywords
ultra-performance liquid chromatography-mass spectrometry(UPLC-MS)
proteomics
nonspecific adsorption
quantification
carryover
peptides
分类号
O658 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
二维相关光谱和导数光谱色谱图法识别及解混高效液相色谱二极管阵列色谱峰
芦丽
向健华
方方
宫旭
孙晶
《化学分析计量》
CAS
2024
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
基于超高效液相色谱-质谱法的肽段分析中非特异性吸附评估及通用型最小化策略
张莹
杨静
马跃新
曹玲
黄青
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2022
0
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职称材料
已选择
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