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Wnt3a和Activin A共同促进人胚胎干细胞向限定性内胚层细胞分化被引量：6: 1; 作者周静李进 +1 位作者林戈卢光琇《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第4期37-41,共5页; 【目的】研究Wnt3a和ActivinA存限定性内胚层诱导中共同作用的最佳时间窗。【方法】在无饲养层体系培养的人胚胎于细胞中，加入25ng／mLWnt3a和100ng／mLActivinA，共同作用不同时间（1～4d），收集不同作用时间点（0，1，2，3，4，5d... 展开更多; 关键词人胚胎干细胞限定性内胚层 WNT3A ACTIVIN A; 在线阅读下载PDF 职称材料

Activin A特异性对人胚胎干细胞向限定性内胚层诱导分化的促进作用被引量：1: 2; 作者孙懿周静 +1 位作者林戈卢光琇《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2012年第6期13-18,共6页; 【目的】研究Activin A对人胚胎干细胞(hESCs)向限定性内胚层(DE)诱导分化的促进作用及其信号通路分子,为hESCs向DE诱导分化体系的优化提供参考。【方法】在人饲养层体系培养的hESCs中,收集100ng/mL Activin A分别诱导0,6,12,24,48,72,9... 展开更多; 关键词干细胞工程学人胚胎干细胞限定性内胚层 ACTIVIN A; 在线阅读下载PDF 职称材料

人促血液血管细胞生成素的原核表达及兔抗体的制备被引量：1: 3; 作者任倩刘拥军 +5 位作者徐斌韩之波卢士红马凤霞陈钟韩忠朝《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期801-803,共3页; 目的:表达人促血液血管细胞生成素(hemangiopoi-etin,HAPO)蛋白并制备兔抗HAPO抗体。方法:利用硫氧还原蛋白TrxA融合表达载体(pET32c),表达可溶性HAPO。表达的HAPO融合蛋白经亲和层析快速纯化,并通过Westernblot进行鉴定。以纯化的人HAP... 展开更多; 关键词人促血液血管细胞生成素 pET32C 抗体制备兔; 在线阅读下载PDF 职称材料

β—葡萄糖醛酸苷酶基因转染人胆管癌细胞的生物学观察被引量：3: 4; 作者戴辉仇凯《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第4期S024-S026,共3页; 目的建立高表达β－葡萄糖醛酸苷酶（以下简称βＧ）基因的胆管癌模型，并观察转染βＧ基因的胆管癌细胞的超微结构及基因表达产物的定位。方法构建真核表达的逆转录病毒载体ｐＤＯＲ－βＧ。利用阳离子脂质体将其转入人胆管癌细胞... 展开更多; 关键词 Β-葡萄糖醛酸苷酶胆管癌基因转染脂质体; 在线阅读下载PDF 职称材料

三株肝癌单克隆抗体的Western免疫印迹实验: 5; 作者黄宝成陈志南 +1 位作者吴有盛姜绍谆《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第4期313-314,共2页; 关键词肝癌单克隆抗体 WESTERN 免疫印迹; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Wnt3a和Activin A共同促进人胚胎干细胞向限定性内胚层细胞分化被引量：6: 1; 作者周静李进林戈卢光琇; 机构中南大学生殖与干细胞研究所国家干细胞工程研究中心; 出处《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第4期37-41,共5页; 基金国家"973"项目(2005CB522705 2007CB948103) +1 种基金国家"863"计划项目(2006AA02A102) 国家自然科学基金项目(30800659); 文摘【目的】研究Wnt3a和ActivinA存限定性内胚层诱导中共同作用的最佳时间窗。【方法】在无饲养层体系培养的人胚胎于细胞中，加入25ng／mLWnt3a和100ng／mLActivinA，共同作用不同时间（1～4d），收集不同作用时间点（0，1，2，3，4，5d）细胞，对原条、内中胚层前体标记Brachyury及限定性内胚层标记Sox17分别进行免疫荧光染色，统计阳性细胞总数，计算阳性细胞率。以看家基阕β-actin作为对照，采用RTPCR方法对原肠作用基因（Goosecoid（GSC）、Mixll）及三胚层发育相关基因（内胚层基因Sox17、Foxa2，内中胚层前体基因Braarchyury，中胚层基因Flk-1，外胚层基闪Pax6，胚外内胚层基因Sox7、CDX2）的表达进行检测。【结果]Wnt3a与ActivinA共同作用1～4d，均能获得限定性内胚层细胞，其中二者共同作用1d分别能获得（78．9±7．3）％Brachyury阳性细胞和（85．2±3．8）％的Sox17阳性细胞。RTPCR结果显示，在Wnt3a与ActivinA共同作用下，原肠作用基因及三胚层发育相关基因表达的时间有差异。【结论】Wnt3a和ActivinA共同作用1d，是有效促进人胚胎干细胞向限定性内胚层细胞分化的最佳作用时间窗。; 关键词人胚胎干细胞限定性内胚层 WNT3A ACTIVIN A; Keywords human embryonic stem cell definitive endoderm Wnt3a Activin A; 分类号 Q813.1 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Activin A特异性对人胚胎干细胞向限定性内胚层诱导分化的促进作用被引量：1: 2; 作者孙懿周静林戈卢光琇; 机构中南大学生殖与干细胞研究所国家干细胞工程研究中心; 出处《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2012年第6期13-18,共6页; 基金高等学校博士学科点专项科研基金新教师基金项目(200805331133) 国家"863"计划项目(2006AA02A102) +3 种基金国家自然科学基金项目(81101510 30800659) 中央高校基本科研业务费青年教师助推基金项目(201012200219); 文摘【目的】研究Activin A对人胚胎干细胞(hESCs)向限定性内胚层(DE)诱导分化的促进作用及其信号通路分子,为hESCs向DE诱导分化体系的优化提供参考。【方法】在人饲养层体系培养的hESCs中,收集100ng/mL Activin A分别诱导0,6,12,24,48,72,96,120h的细胞,用实时荧光定量RT-PCR检测原条标记Gsc和Mixl1、中内胚层共同前体标记Brachyury、内胚层标记Foxa2和Sox17、中胚层标记Flk1、外胚层基因Pax6、多能性相关基因Oct4与Nanog表达水平的变化,用细胞免疫荧光检测Brachyury和Sox17蛋白表达水平的变化。【结果】在人饲养层(HEF)培养体系上,高浓度Activin A能更快地促进中内胚层基因的表达并提高其表达水平;Brachyury和Sox17蛋白的细胞免疫荧光检测表明,Activin A诱导12和48h就可检测二者的表达明显增加,且二者的表达水平分别在诱导48和96h时达到高峰;hESCs高效分化为限定性内胚层细胞,DE细胞分化率为(81.7±5.4)%,并且体外的内胚层分化过程遵循从原条开始、经过中内胚层共同前体阶段、再到内胚层的发育过程,与体内发育规律相似。【结论】Activin A能特异性地诱导人胚胎干细胞向限定性内胚层分化,转录调控Brachyury和Sox17蛋白的表达。; 关键词干细胞工程学人胚胎干细胞限定性内胚层 ACTIVIN A; Keywords stem cell engineering human embryonic stem cell definitive endoderm Activin A; 分类号 Q254 [生物学—细胞生物学] Q813.11 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人促血液血管细胞生成素的原核表达及兔抗体的制备被引量：1: 3; 作者任倩刘拥军徐斌韩之波卢士红马凤霞陈钟韩忠朝; 机构中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室国家干细胞工程研究中心; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期801-803,共3页; 基金国家科技部"十五"重大科技专项(2002AA2Z3354) 国家自然科学基金(30300186) +1 种基金中国博士点基金(2003023002) 天津市基础重点项目(05YFJZJC01500); 文摘目的:表达人促血液血管细胞生成素(hemangiopoi-etin,HAPO)蛋白并制备兔抗HAPO抗体。方法:利用硫氧还原蛋白TrxA融合表达载体(pET32c),表达可溶性HAPO。表达的HAPO融合蛋白经亲和层析快速纯化,并通过Westernblot进行鉴定。以纯化的人HAPO免疫新西兰大白兔,制备抗体并测定其效价。结果:获得高效表达并纯化的HAPO蛋白。制备的兔抗人HAPO抗体的免疫双扩散的效价为1∶8。结论:建立了HAPO基因的原核表达载体和快速纯化体系并制备出兔抗HAPO的抗体,为研制检测HAPO的ELISA试剂盒奠定了基础。; 关键词人促血液血管细胞生成素 pET32C 抗体制备兔; Keywords hemangiopoietin pET32c antibody preparation rabbit; 分类号 R318.12 [医药卫生—生物医学工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名β—葡萄糖醛酸苷酶基因转染人胆管癌细胞的生物学观察被引量：3: 4; 作者戴辉仇凯; 机构第四军医大学西京医院肝胆外科国家细胞工程研究中心; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第4期S024-S026,共3页; 文摘目的建立高表达β－葡萄糖醛酸苷酶（以下简称βＧ）基因的胆管癌模型，并观察转染βＧ基因的胆管癌细胞的超微结构及基因表达产物的定位。方法构建真核表达的逆转录病毒载体ｐＤＯＲ－βＧ。利用阳离子脂质体将其转入人胆管癌细胞株，经免疫组化染色和免疫电镜等检测其表达，并用民镜观察转染细胞超微结构的变化。结果经Ｇ４１８筛选后的阳性细胞克隆，为高表达βＧ的胆管癌模型。免疫组织化学染色和免疫电镜证实。; 关键词 Β-葡萄糖醛酸苷酶胆管癌基因转染脂质体; 分类号 R735.8 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名三株肝癌单克隆抗体的Western免疫印迹实验: 5; 作者黄宝成陈志南吴有盛姜绍谆; 机构第四军医大学国家细胞工程研究中心; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第4期313-314,共2页; 基金国家863 课题资助!项目 No-863 -102 -09- 01; 关键词肝癌单克隆抗体 WESTERN 免疫印迹; 分类号 R735.7 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	Wnt3a和Activin A共同促进人胚胎干细胞向限定性内胚层细胞分化	周静李进林戈卢光琇	《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2010	6	在线阅读下载PDF 职称材料
2	Activin A特异性对人胚胎干细胞向限定性内胚层诱导分化的促进作用	孙懿周静林戈卢光琇	《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2012	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	人促血液血管细胞生成素的原核表达及兔抗体的制备	任倩刘拥军徐斌韩之波卢士红马凤霞陈钟韩忠朝	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2006	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	β—葡萄糖醛酸苷酶基因转染人胆管癌细胞的生物学观察	戴辉仇凯	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD	2000	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	三株肝癌单克隆抗体的Western免疫印迹实验	黄宝成陈志南吴有盛姜绍谆	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD	1999	0	在线阅读下载PDF 职称材料