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类鼻疽伯克霍尔德氏菌UDPE检测方法的建立和应用
被引量：
1
1
作者
宋亚军
王津
+2 位作者
张敏丽
郭兆彪
杨瑞馥
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2001年第2期35-37,共3页
目的 建立防止产物污染的UDPE(UDG -DuplexPCR -EIA)技术 ,用于检测类鼻疽伯克霍尔德氏菌。方法 选择类鼻疽伯克霍尔德氏菌FUR(FerricUptakeRegulator)基因为靶序列 ,设计两对引物进行PCR扩增 ,用UDG(尿嘧啶糖基化酶 )防止PCR产物污...
目的 建立防止产物污染的UDPE(UDG -DuplexPCR -EIA)技术 ,用于检测类鼻疽伯克霍尔德氏菌。方法 选择类鼻疽伯克霍尔德氏菌FUR(FerricUptakeRegulator)基因为靶序列 ,设计两对引物进行PCR扩增 ,用UDG(尿嘧啶糖基化酶 )防止PCR产物污染 ,并用微孔板杂交 -酶联显色检测扩增的PCR产物片段 ;用不同的模板考察方法的特异性和灵敏度。结果 该检测系统可以特异性地检测类鼻疽伯克霍尔德氏菌 ;对于纯DNA模板 ,检测灵敏度可以达到 10fg/ μl;对于系列稀释菌液提取的模板 ,灵敏度可达 0 1个菌 / μl;对于模拟污水标本、模拟组织标本和模拟土壤标本的检测灵敏度分别为 10个菌 / μl,10 0个菌 / μl和 10 0个菌 / μl;检测系统可以防止 10 9个PCR产物分子的污染 ;检测系统可以在 37℃下稳定保存 7d。结论 本研究建立了稳定的 ,防止产物污染 。
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关键词
类鼻疽伯克霍尔德氏菌
尿嘧啶糖基化酶
UDG
PCR
微孔板杂交
UDPE
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题名
类鼻疽伯克霍尔德氏菌UDPE检测方法的建立和应用
被引量：
1
1
作者
宋亚军
王津
张敏丽
郭兆彪
杨瑞馥
机构
国家生物医学分析中心分析微生物实验室
出处
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2001年第2期35-37,共3页
文摘
目的 建立防止产物污染的UDPE(UDG -DuplexPCR -EIA)技术 ,用于检测类鼻疽伯克霍尔德氏菌。方法 选择类鼻疽伯克霍尔德氏菌FUR(FerricUptakeRegulator)基因为靶序列 ,设计两对引物进行PCR扩增 ,用UDG(尿嘧啶糖基化酶 )防止PCR产物污染 ,并用微孔板杂交 -酶联显色检测扩增的PCR产物片段 ;用不同的模板考察方法的特异性和灵敏度。结果 该检测系统可以特异性地检测类鼻疽伯克霍尔德氏菌 ;对于纯DNA模板 ,检测灵敏度可以达到 10fg/ μl;对于系列稀释菌液提取的模板 ,灵敏度可达 0 1个菌 / μl;对于模拟污水标本、模拟组织标本和模拟土壤标本的检测灵敏度分别为 10个菌 / μl,10 0个菌 / μl和 10 0个菌 / μl;检测系统可以防止 10 9个PCR产物分子的污染 ;检测系统可以在 37℃下稳定保存 7d。结论 本研究建立了稳定的 ,防止产物污染 。
关键词
类鼻疽伯克霍尔德氏菌
尿嘧啶糖基化酶
UDG
PCR
微孔板杂交
UDPE
Keywords
Burkholderia pseudomallei
UDG(Uracil DNA Glycosylase)
PCR
Microwell plate
分类号
R754.3 [医药卫生—皮肤病学与性病学]
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出处
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1
类鼻疽伯克霍尔德氏菌UDPE检测方法的建立和应用
宋亚军
王津
张敏丽
郭兆彪
杨瑞馥
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2001
1
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