为了解我国牛肠道病毒(BEV)流行现状,为其防控提供理论依据,本试验从四川省成都市某牛场的腹泻病牛粪便样本中分离得到1株病毒,将其命名为SC-726并进行后续研究。将SC-726接种牛肾细胞(MDBK)后观察细胞病变效应(CPE),计算病毒含量,使用...为了解我国牛肠道病毒(BEV)流行现状,为其防控提供理论依据,本试验从四川省成都市某牛场的腹泻病牛粪便样本中分离得到1株病毒,将其命名为SC-726并进行后续研究。将SC-726接种牛肾细胞(MDBK)后观察细胞病变效应(CPE),计算病毒含量,使用透射电子显微镜观察该病毒的形态特征,分析其理化特性、核酸型和细胞嗜性,绘制一步生长曲线,最后对该分离株进行5′非翻译区(5′UTR)基因测序以分析其遗传演化。结果显示,SC-726分离株感染MDBK细胞后,细胞发生明显的CPE;病毒最高滴度为1×10^(6.2) TCID_(50)/0.1 m L;电镜下观察到直径约30 nm的无囊膜球形粒子,符合传统小RNA病毒形态学特征;理化特性鉴定结果显示,该分离株几乎不受有机溶剂(乙醚、氯仿)和胰蛋白酶的影响,同时具有一系列与BEV相符的特征,如耐酸、不耐强碱、热敏感;DNA抑制剂阿糖胞苷(Ara-C)对该病毒滴度无影响,判定为RNA病毒;SC-726株能够在MDBK、乳仓鼠肾细胞(BHK-21)、猪肾细胞(PK-15)、非洲绿猴胚胎肾细胞(Marc-145)和犬肾细胞(MDCK)等多种动物细胞上增殖;遗传进化分析结果显示,该分离株为F型牛肠道病毒(BEV-F)。本试验从腹泻牛粪便样本中成功分离出1株BEV-F,进一步丰富了我国BEV资料库,为该病毒病的防治提供了理论依据。展开更多
文摘为了解我国牛肠道病毒(BEV)流行现状,为其防控提供理论依据,本试验从四川省成都市某牛场的腹泻病牛粪便样本中分离得到1株病毒,将其命名为SC-726并进行后续研究。将SC-726接种牛肾细胞(MDBK)后观察细胞病变效应(CPE),计算病毒含量,使用透射电子显微镜观察该病毒的形态特征,分析其理化特性、核酸型和细胞嗜性,绘制一步生长曲线,最后对该分离株进行5′非翻译区(5′UTR)基因测序以分析其遗传演化。结果显示,SC-726分离株感染MDBK细胞后,细胞发生明显的CPE;病毒最高滴度为1×10^(6.2) TCID_(50)/0.1 m L;电镜下观察到直径约30 nm的无囊膜球形粒子,符合传统小RNA病毒形态学特征;理化特性鉴定结果显示,该分离株几乎不受有机溶剂(乙醚、氯仿)和胰蛋白酶的影响,同时具有一系列与BEV相符的特征,如耐酸、不耐强碱、热敏感;DNA抑制剂阿糖胞苷(Ara-C)对该病毒滴度无影响,判定为RNA病毒;SC-726株能够在MDBK、乳仓鼠肾细胞(BHK-21)、猪肾细胞(PK-15)、非洲绿猴胚胎肾细胞(Marc-145)和犬肾细胞(MDCK)等多种动物细胞上增殖;遗传进化分析结果显示,该分离株为F型牛肠道病毒(BEV-F)。本试验从腹泻牛粪便样本中成功分离出1株BEV-F,进一步丰富了我国BEV资料库,为该病毒病的防治提供了理论依据。