猪源大肠杆菌的生物膜形成能力和耐药性分析 被引量：5

1

作者 陈舒怡 王栋 +4 位作者 邬德淑 李迁 孙坚 廖晓萍 方亮星 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第9期30-38,共9页

为明确成膜大肠杆菌的耐药特征及其与生物膜形成能力的关系,本试验对广西南宁地区腹泻猪粪便样品中分离的506株大肠杆菌进行结晶紫染色检测其生物膜形成能力;随机挑选110株大肠杆菌进行药敏试验;进一步针对85株成膜大肠杆菌进行全基因... 为明确成膜大肠杆菌的耐药特征及其与生物膜形成能力的关系,本试验对广西南宁地区腹泻猪粪便样品中分离的506株大肠杆菌进行结晶紫染色检测其生物膜形成能力;随机挑选110株大肠杆菌进行药敏试验;进一步针对85株成膜大肠杆菌进行全基因组测序(WGS)并基于核心单核苷酸多态性(SNP)基因组构建系统发育进化树,进行克莱蒙分型(Clemon typing)、多位点序列分型(MLST)和Pearson相关系数分析。结果显示,387株(76.48%)大肠杆菌能够形成生物膜,其中,32株(6.32%)为强成膜菌。成膜大肠杆菌对β-内酰胺类、四环素类、酰胺醇类和喹诺酮类抗生素的耐药率都较高(78%~95%),且强成膜菌株对头孢噻呋、阿米卡星和多西环素等8种抗菌药的耐药率显著高于弱成膜和无成膜菌株(P<0.05)。系统发育进化树显示,强成膜菌株整体上遗传背景呈现多样性。强成膜菌株的克莱蒙分型主要是A型和B1型,MLST共35种,其中ST 1286和ST 648较为流行;基因分布特征分析结果显示,49株强成膜菌株携带floR、qnrS1和bla_(TEM-1B)等耐药基因以及bcsA、csg、filA和mrk等生物膜形成相关基因;基于Pearson相关系数分析结果发现,耐药基因bla_(OXA-10)(r=0.23,P=0.034)和菌毛基因mrk(r=0.44,P=2.10×10^(-5))检出与生物膜形成能力呈正向线性相关性。本试验明确了猪源大肠杆菌生物膜形成能力和强成膜大肠杆菌的耐药特征以及其复杂的种群结构,为成膜大肠杆菌的防控提供了科学依据。 展开更多

关键词 大肠杆菌 全基因组测序 生物膜 耐药性 猪

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大黄酸衍生物的合成及抗感染活性评价 被引量：1

2

作者 李志鹏 谭露露 +4 位作者 邓尧 任昊 廖晓萍 孙坚 韩璐 《华南农业大学学报》 北大核心 2025年第3期301-310,共10页

【目的】选择羟基癸酸和癸醇作为修饰物对大黄酸进行结构修饰,提高其脂溶性,降低毒副作用,提升抗感染抗氧化活性,以促进临床应用。【方法】首先,基于大黄酸构效关系,选择大黄酸的羧基与十碳羟基癸酸和癸醇进行酯化反应,合成4种大黄酸衍... 【目的】选择羟基癸酸和癸醇作为修饰物对大黄酸进行结构修饰,提高其脂溶性,降低毒副作用,提升抗感染抗氧化活性,以促进临床应用。【方法】首先,基于大黄酸构效关系,选择大黄酸的羧基与十碳羟基癸酸和癸醇进行酯化反应,合成4种大黄酸衍生物——大黄酸−5−癸醇(R-5HD)、大黄酸−癸醇(R-DA)、大黄酸−10−羟基癸酸(R-10HA)、大黄酸−10−羟基−2−癸烯酸(R-10HDA),通过核磁共振氢谱(1H NMR)和傅里叶变换红外光谱(FTIR)确定大黄酸衍生物的化学结构特征。其次,采用CCK-8试剂盒测定大黄酸及其衍生物对小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7存活率的影响,确定大黄酸及其衍生物的适用浓度范围。最后,为了验证大黄酸衍生物的抗感染活性,构建脂多糖(LPS)诱导的RAW 264.7细胞模型,测定其对活性氧(ROS)水平,一氧化氮(NO)释放量,肿瘤坏死因子−α(TNF-α)、白细胞介素−1β(IL-1β)、白细胞介素−6(IL-6)表达量的影响;通过ROS荧光探针双氯荧光黄乙酸乙酯(DCFH-DA)分析大黄酸衍生物的抗氧化活性。【结果】1H NMR和FTIR结果证明4种大黄酸衍生物成功制备。经体外抗感染模型验证,大黄酸经修饰后毒性显著降低。与大黄酸相比,大黄酸衍生物显著提高RAW 264.7细胞存活率。在LPS处理的RAW 264.7细胞模型中,大黄酸衍生物可以更好地发挥抗感染、抗氧化活性。4种大黄酸衍生物均显著降低NO释放量以及TNF-α、IL-6和IL-1β的表达量,R-DA的抗感染效果最优。与大黄酸相比,大黄酸衍生物均显著抑制ROS的产生。【结论】本研究聚焦于利用十碳羟基癸酸或者癸醇对大黄酸进行结构修饰,通过体外试验证实,R-DA具有更强的抗感染、抗氧化活性,为后续大黄酸衍生物的研究和开发提供了理论依据。 展开更多

关键词 大黄酸 羟基癸酸 癸醇 大黄酸衍生物 抗感染 抗氧化

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分离自屠宰场的肺炎克雷伯菌的耐药性分析 被引量：6

3

作者 赵菲菲 李杰 +2 位作者 韩宁 谢仕廷 曾振灵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期3044-3053,共10页

为了解猪源肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)分离株的耐药情况和毒力基因携带情况,本试验对广州市某屠宰场进行采样调查和耐药性分析。通过对猪肺样本进行肺炎克雷伯菌分离鉴定,对分离株进行6种常见的荚膜血清型(K1、K2、K5、K20、... 为了解猪源肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)分离株的耐药情况和毒力基因携带情况,本试验对广州市某屠宰场进行采样调查和耐药性分析。通过对猪肺样本进行肺炎克雷伯菌分离鉴定,对分离株进行6种常见的荚膜血清型(K1、K2、K5、K20、K54、K57)鉴定,并用琼脂扩散法对菌株进行13种抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC)检测;采用PCR方法对分离菌株进行耐药基因(bla_(KPC-2)、bla_(NDM-1)、blaN_(DM-5)、bla_(CTX-M1)、tetA、tetB、sul1、sul2、oqxA、qnrB、aac(6′)-Ib-cr)和毒力基因(rmpA、entB、iucA、iroN、ycfM、fimH、mrkD、wabG)的检测。结果显示,从150份猪肺样本中成功分离鉴定出116株肺炎克雷伯菌,分离率为77.3%;革兰染色镜检菌体呈红色短杆状,荚膜血清分型以K57型(50.9%)为主。药敏试验结果表明,分离株多呈多重耐药表型,对四环素类、β-内酰胺类及磺胺类药物耐药严重,对美罗培南、黏菌素和恩诺沙星敏感。耐药基因检测显示,检出率最高为sul2基因(60.3%)和oqxA基因(59.5%),检出率最低为bla_(NDM-1)与bla_(NDM-5)基因(均为0.9%)。毒力基因检测显示,检出率最高为ycfM基因(87.1%),检出率最低为iroN基因(1.7%)。结果表明,分离自屠宰场的肺炎克雷伯菌检出率较高,多重耐药形势严峻,耐药基因、毒力基因丰富。本研究为猪源肺炎克雷伯菌的防控提供参考依据。 展开更多

关键词 肺炎克雷伯菌 分离鉴定 耐药性 耐药基因 毒力基因

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广东省某屠宰场猪源肠球菌的分离鉴定及耐药性和毒力基因分析 被引量：4

4

作者 张永祥 胡健欣 +5 位作者 陆毅兴 胡悦莹 卢嘉璇 辛琳 曾振灵 曾东平 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期4714-4723,共10页

【目的】了解猪源性肠球菌分离株的耐药情况及毒力因子携带情况,为肠球菌的耐药监测提供数据支持并为制定合理的治疗方案提供科学依据。【方法】本研究对广州市某大型屠宰场屠宰环节156份猪小肠样品进行肠球菌的分离培养、革兰染色、PC... 【目的】了解猪源性肠球菌分离株的耐药情况及毒力因子携带情况,为肠球菌的耐药监测提供数据支持并为制定合理的治疗方案提供科学依据。【方法】本研究对广州市某大型屠宰场屠宰环节156份猪小肠样品进行肠球菌的分离培养、革兰染色、PCR鉴定,采用琼脂扩散法对菌株进行14种抗菌药物和2种消毒剂的最小抑菌浓度(MIC)测定,利用PCR技术检测耐药基因、毒力基因和消毒剂抗性基因的携带情况。【结果】本研究分离到84株肠球菌(分离率为53.85%),包括44株粪肠球菌和40株屎肠球菌;分离培养可见菌落边缘光滑整齐、圆形或卵圆形排列、菌落周围培养基呈现黑色的菌落;疑似菌落革兰染色后呈圆形的革兰阳性球菌,单个或成堆排列在一起。对疑似菌落DNA进行PCR扩增,其中粪肠球菌引物扩增出大小约941 bp的条带,16S rRNA引物扩增出大小约1500 bp的条带。药敏试验结果显示,44株粪肠球菌对克林霉素、多西环素、头孢噻呋、庆大霉素、红霉素、苯扎氯铵和氟苯尼考的耐药率较高,分别为97.7%、90.9%、88.6%、88.6%、81.8%、81.8%和77.3%;40株屎肠球菌对克林霉素、头孢噻呋、多西环素、庆大霉素、氟苯尼考和红霉素的耐药率分别为90.0%、90.0%、85.0%、77.5%、72.5%和67.5%。毒力基因与消毒剂抗性基因检测结果显示,粪肠球菌efa、gelE、fsrC毒力基因的检出率较高,分别为95.5%、84.1%和84.1%;emeA、gsp 65消毒剂抗性基因的检出率较高,分别为95.5%和90.9%。屎肠球菌仅检测到fsrB毒力基因,检出率为2.5%,无消毒剂抗性基因的检出。【结论】本研究分离的猪源肠球菌对大部分抗菌药物具有较高的耐药率,部分菌株还对利奈唑胺产生耐药,亟需加强对猪源肠球菌的流行病学监测。 展开更多

关键词 肠球菌 耐药性 毒力基因 抗菌药物 消毒剂抗性基因

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宠物源大肠埃希菌耐药性及耐药基因调查 被引量：12

5

作者 易梦颖 王晶 +6 位作者 卢沛兰 黄馨仪 夏应碧 黄佳为 严杰聪 庄子琳 刘健华 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期15-21,共7页

【目的】了解广州市宠物源大肠埃希菌Escherichia coli耐药性和耐药基因携带情况。【方法】2016年7月至2017年7月从广州市4家宠物医院采集健康或患病犬猫样品共319份,其中,健康动物127份,患病动物192份。采用选择性培养基分离大肠埃希菌... 【目的】了解广州市宠物源大肠埃希菌Escherichia coli耐药性和耐药基因携带情况。【方法】2016年7月至2017年7月从广州市4家宠物医院采集健康或患病犬猫样品共319份,其中,健康动物127份,患病动物192份。采用选择性培养基分离大肠埃希菌,利用基质辅助激光解析串联飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)鉴定菌种;采用琼脂稀释法测定大肠埃希菌对11种抗菌药物的敏感性,利用PCR和测序检测耐药基因的携带情况。【结果】319份样品共分离得到大肠埃希菌203株,其中,患病动物源109株,健康动物源94株。203株大肠埃希菌中有179株至少对1种抗生素耐药;对氨苄西林耐药率最高(76.85%),对头孢噻肟、四环素、多西环素和磺胺甲噁唑-甲氧苄啶耐药率均高于50%;对阿米卡星最为敏感,耐药率仅为10.84%。患病动物源大肠埃希菌对11种抗菌药物的耐药率均高于健康动物源,除阿米卡星、氟苯尼考和磷霉素外,对其他药物的耐药性均差异极显著(P<0.01)。耐药基因检测结果显示,floR检出率最高(检出率为34.97%),blaCTX-M-9G、blaCTX-M-1G、fos A3、rmt B和bla CMY-2检出率分别为22.66%、20.19%、17.73%、10.34%和1.48%,未检测到blaCTX-M-2G和blaCTX-M-25G。【结论】广州地区宠物源大肠埃希菌耐药状况严峻,且常携带多种重要耐药基因。应当加强对宠物源细菌耐药性的监测。 展开更多

关键词 宠物 大肠埃希菌 耐药性 耐药基因 抗生素

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细菌耐药性的系统性防控:从新机制到新策略 被引量：5

6

作者 孙坚 刘雅红 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1-3,共3页

抗菌药在防治人和动物疾病、促进养殖业持续健康发展中起着举足轻重的作用,然而随着其在临床治疗与农业生产中的广泛使用甚至滥用,细菌耐药性问题日益突出。2015年6月,联合国粮食及农业组织(FAO)继世界动物卫生组织(OIE)与世界卫生组织(... 抗菌药在防治人和动物疾病、促进养殖业持续健康发展中起着举足轻重的作用,然而随着其在临床治疗与农业生产中的广泛使用甚至滥用,细菌耐药性问题日益突出。2015年6月,联合国粮食及农业组织(FAO)继世界动物卫生组织(OIE)与世界卫生组织(WHO)之后,通过了一项关于抗微生物药物耐药性的决议,意味着抗击细菌耐药性已经成为全球性的共识。 展开更多

关键词 世界动物卫生组织 抗微生物药物 细菌耐药性 抗菌药 OIE 持续健康发展 新策略 新机制

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广东省养禽场肠球菌耐药性及毒力因子流行分布特征 被引量：6

7

作者 章婧 蔡萍 +3 位作者 贺奕卓 陈伟涛 黄宇晨 蒋红霞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期2650-2659,共10页

旨在调查和分析广东省养禽场肠球菌的亚型屎肠球菌和粪肠球菌耐药性及其毒力因子流行分布特征,为控制禽源肠球菌耐药性传播、保障公共卫生安全提供理论依据。作者于2018年从广东省4个养禽场采集肠道样品493份,进行屎肠球菌和粪肠球菌的... 旨在调查和分析广东省养禽场肠球菌的亚型屎肠球菌和粪肠球菌耐药性及其毒力因子流行分布特征,为控制禽源肠球菌耐药性传播、保障公共卫生安全提供理论依据。作者于2018年从广东省4个养禽场采集肠道样品493份,进行屎肠球菌和粪肠球菌的分离鉴定;采用琼脂二倍稀释法测定肠球菌的最小抑菌浓度(MIC);PCR方法检测肠球菌的耐药基因和毒力基因。结果显示:1)共分离到125株肠球菌,其中粪肠球菌84株(鸡源66株,鸭源18株);屎肠球菌41株,均来自鸡肠道样本。2)菌株对四环素、多西环素、红霉素几乎全部耐药,对氟苯尼考和氯霉素的耐药率高达89.60%和74.40%。屎肠球菌耐药率普遍高于粪肠球菌,而粪肠球菌对环丙沙星和利奈唑胺的耐药率高于屎肠球菌;鸭源粪肠球菌对利奈唑胺的耐药率(94%)显著高于鸡源粪肠球菌(39.4%),屎肠球菌对利奈唑胺均敏感。从鸡分离的1株粪肠球菌对万古霉素耐药。3)耐药基因在屎肠球菌中的检出率高于粪肠球菌,鸭源分离株检出率高于鸡源。耐药基因tetL、fexA、ermB最为流行,检出率均高于90%。其次是optrA基因,检出率为73.60%,poxtA和fexB的检出率均低于20%。在3株鸭源粪肠球菌中检测出cfr基因。4)已检测的毒力基因中efaA的携带率最高,为63.04%(58/92),其他依次为gelE(54.35%,50/92)、ace(47.83%,44/92)、asa1(44.57%,41/92)。对环丙沙星及高浓度氨基糖苷类耐药的菌株及携带cfr基因的菌株,大多携带agg、asal、gelE或ace。本研究显示养殖场禽源肠球菌耐药严重,鸭源肠球菌对利奈唑胺耐药率高,耐药基因和毒力基因流行且多样,且检测出人医临床重要抗生素耐药基因,应加强对养禽场肠球菌耐药性监测。 展开更多

关键词 粪肠球菌 屎肠球菌 耐药基因 毒力基因

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广东肇庆地区鸭疫里氏杆菌耐药性和毒力基因分析及ERIC-PCR分型研究 被引量：8

8

作者 张旭财 李燕红 +4 位作者 陆毅兴 常依 谢龙飞 曾振灵 熊文广 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第4期39-47,共9页

为了解广东省肇庆市鸭疫里氏杆菌的流行和耐药现状,本试验对当地4个养鸭场疑似传染性浆膜炎的病鸭进行细菌分离纯化、PCR鉴定,并对分离菌株进行了药敏试验、耐药基因、毒力基因检测及ERIC-PCR分型试验。药敏结果表明,14株鸭疫里氏杆菌... 为了解广东省肇庆市鸭疫里氏杆菌的流行和耐药现状,本试验对当地4个养鸭场疑似传染性浆膜炎的病鸭进行细菌分离纯化、PCR鉴定,并对分离菌株进行了药敏试验、耐药基因、毒力基因检测及ERIC-PCR分型试验。药敏结果表明,14株鸭疫里氏杆菌对新霉素、安普霉素、恩诺沙星、替加环素、复方新诺明高度耐药,耐药率均为100%;对阿莫西林、头孢他啶和环丙沙星敏感度较高,敏感率分别为100%、100%和92.86%。耐药基因检测结果显示,所有分离菌均携带tet(X)和floR耐药基因,tet(B)和su l1耐药基因的检出率分别为64.29%和50%,其余9种耐药基因(aac(6′)-Ⅰb、aph(3')-Ⅱ、bla_(SHV)、bla_(DHA)、qnrA、qnr B、tet(A)、tet(C)、sul2)未被检出。毒力基因检测结果显示,AS87_04050、luxE和wza毒力基因的检出率较高,分别为100%、92.86%和100%,而TbdR 1均未被检出。ERIC-PCR分型试验结果表明,14株鸭疫里氏杆菌均成功分型,相似性在90%时,可分为7个基因型。本实验为广东省肇庆市鸭疫里氏杆菌病的治疗措施提供理论依据。 展开更多

关键词 鸭疫里氏杆菌 耐药性 耐药基因 毒力基因 ERIC-PCR

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基于PCR-CRISPR/Cas12a技术的肠炎沙门菌快速检测方法

9

作者 杨天沐 王毅恒 +1 位作者 熊文广 郭剑英 《华南农业大学学报》 北大核心 2025年第3期311-318,共8页

【目的】针对食源性病原菌肠炎沙门菌Salmonella enteritidis,开发一种CRISPR(Clustered regularly interspaced short palindromic repeat)技术结合聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)的检测方法,以实现肠炎沙门菌的早期... 【目的】针对食源性病原菌肠炎沙门菌Salmonella enteritidis,开发一种CRISPR(Clustered regularly interspaced short palindromic repeat)技术结合聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)的检测方法,以实现肠炎沙门菌的早期快速诊断和防控。【方法】根据保守基因sdfI序列,进行PCR引物筛选。使用不同质量浓度的肠炎沙门菌基因组进行灵敏度测试;利用大肠埃希菌Escherichia coli、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、多杀性巴氏杆菌Pasteurella multocida、粪肠球菌Salmonella choleraesuis、猪霍乱沙门氏菌Enterococcus faecalis基因组进行特异性检验。最后,使用建立的方法检测小肠样品中肠炎沙门菌的污染情况。【结果】该方法可检出小肠样品中的肠炎沙门菌,检测限为1.72×100μL^(−1),特异性良好,且与大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、多杀性巴氏杆菌、粪肠球菌、猪霍乱沙门氏菌均无交叉反应。【结论】本研究建立了一种较为轻便、可用于早期诊断肠炎沙门菌的方法,具有良好的灵敏度和特异性,为肠炎沙门菌快速诊断提供了新方法。 展开更多

关键词 肠炎沙门菌 sdfI基因 聚合酶链式反应 CRISPR/Cas12a系统

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纳米药物递送系统在耐药病原菌防控中的研究进展

10

作者 周宇峰 高馨 +3 位作者 戴文青 崔娜 张鸿焱 廖晓萍 《华南农业大学学报》 北大核心 2025年第3期287-300,共14页

抗菌药物的不规范使用和细菌选择性压力进化导致耐药病原菌日益增加,严重威胁畜禽养殖和公共卫生安全。随着纳米技术的发展,纳米药物递送系统在递送抗菌药物方面显示出一系列优势,如提高药物的生物利用度、减少毒副作用、降低药物使用... 抗菌药物的不规范使用和细菌选择性压力进化导致耐药病原菌日益增加,严重威胁畜禽养殖和公共卫生安全。随着纳米技术的发展,纳米药物递送系统在递送抗菌药物方面显示出一系列优势,如提高药物的生物利用度、减少毒副作用、降低药物使用成本等,为克服细菌耐药性提供了新的技术和策略。本文从畜禽耐药病原菌的危害及防治现状切入,综述纳米乳液、脂质体、固体脂质纳米粒、纳米胶束、金属纳米颗粒、纳米凝胶这6种纳米药物递送系统在耐药病原菌防控中的研究进展,以期为纳米药物递送系统在畜禽耐药病原菌防控中的应用提供借鉴,助力畜牧养殖业绿色可持续发展。 展开更多

关键词 抗菌药物 纳米药物递送系统 细菌感染 耐药性 畜禽养殖 可持续发展

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基于CRISPR系统的禽源多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌检测方法的建立

11

作者 李燕红 李鋆涛 +2 位作者 杨天沐 贾梦言 熊文广 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第2期912-921,共10页

[目的]建立禽源多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌的可视化检测方法。[方法]将重组酶聚合酶扩增(RPA)与成簇规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR-Cas)系统相结合,针对两种病原菌设计特异性CRISPR相关RNA(crRNA)序列,筛选RPA引物,并对CRI... [目的]建立禽源多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌的可视化检测方法。[方法]将重组酶聚合酶扩增(RPA)与成簇规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR-Cas)系统相结合,针对两种病原菌设计特异性CRISPR相关RNA(crRNA)序列,筛选RPA引物,并对CRISPR检测体系进行优化,探究单管双靶标扩增体系,评估检测方法的特异性及灵敏度,验证临床样品检测的可行性。[结果]本研究建立的检测方法最优组合为:Buffer中Mg^(2+)浓度20 mmol/L、Cas12a蛋白80 nmol/L、crRNA 400 nmol/L、ROX荧光探针14μmol/L。特异性及灵敏度检测结果显示,本研究建立的检测方法特异性良好,在蓝光下观察,灵敏度与实时荧光定量PCR一致,比普通PCR高100倍。临床样品检测结果显示,巴氏杆菌、大肠杆菌均被有效检出,本研究所建立方法的临床符合率为100%。[结论]本研究成功建立了禽源多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌的可视化检测方法,其特异性及灵敏度较高,可以准确检测临床样品中的目标病原菌。试验结果为监测与防控禽源细菌性疾病提供了新方法。 展开更多

关键词 多杀性巴氏杆菌 大肠杆菌 重组酶聚合酶扩增(RPA) CRISPR-Cas12a 可视化检测

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TLC-生物自显影检测26种植物中的抗细菌和抗氧化活性物质 被引量：5

12

作者 单体江 张伟豪 +4 位作者 王松 白日娜 翁道玥 林希乐 孙坚 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期66-72,共7页

我国华南地区植物资源丰富,为快速筛选和检测具有抗菌和抗氧化活性的植物资源,本研究采用甲醇冷浸提取法制备植物提取物,并采用TLC-生物自显影法快速检测其抗细菌和抗氧化活性。活性测定的结果表明,豺皮樟和桂木的抗细菌活性最强,对所... 我国华南地区植物资源丰富,为快速筛选和检测具有抗菌和抗氧化活性的植物资源,本研究采用甲醇冷浸提取法制备植物提取物,并采用TLC-生物自显影法快速检测其抗细菌和抗氧化活性。活性测定的结果表明,豺皮樟和桂木的抗细菌活性最强,对所有供试细菌均表现出抑制活性,且抑菌斑的最大直径均大于10 mm。红果仔、锡叶藤和山油柑也对所有供试细菌表现出抑制活性,但其活性弱于豺皮樟和桂木。粪箕笃、海金沙和小蜡未表现出任何抗细菌活性,其他供试植物对部分供试细菌表现出抑制活性。白花酸藤子、海南杜英、黄牛木、山油柑和基及树表现出较好的抗氧化活性,抗氧化斑的R_f值范围为0.0～1.0,说明具有较多的活性化合物。TLC-生物自显影法能够快速、有效地筛选和检测具有抗细菌和抗氧化活性的植物提取物,本研究结果为植物资源的开发和利用提供重要的理论依据。 展开更多

关键词 TLC-生物自显影法 抗细菌活性 抗氧化活性

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异丙氧苯胍与黏菌素联用对多杀性巴氏杆菌的体内外抗菌作用 被引量：1

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作者 薛雅茜 谯薇美 +4 位作者 洪晓欣 金宇航 陆毅兴 彭险峰 曾振灵 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期820-828,共9页

[目的]研究异丙氧苯胍与黏菌素联用对多杀性巴氏杆菌的体内外抗菌作用,为开发有效的新型黏菌素增效剂及临床防治多杀性巴氏杆菌病提供数据支持。[方法]通过微量肉汤稀释法测定异丙氧苯胍与黏菌素对多杀性巴氏杆菌的最小抑菌浓度,再通过... [目的]研究异丙氧苯胍与黏菌素联用对多杀性巴氏杆菌的体内外抗菌作用,为开发有效的新型黏菌素增效剂及临床防治多杀性巴氏杆菌病提供数据支持。[方法]通过微量肉汤稀释法测定异丙氧苯胍与黏菌素对多杀性巴氏杆菌的最小抑菌浓度,再通过棋盘法联合药敏试验和时间杀菌曲线评价异丙氧苯胍与黏菌素联用对多杀性巴氏杆菌的体外抗菌作用,并进一步通过建立小鼠肺部感染多杀性巴氏杆菌模型来评价两者联用的体内抗菌效果。[结果]药敏试验结果显示,异丙氧苯胍对多杀性巴氏杆菌无抗菌作用(MIC>256μg/mL),黏菌素对受试菌株的最小抑菌浓度范围为1~8μg/mL。联合药敏试验结果显示,异丙氧苯胍与黏菌素联用时能增强黏菌素的抗菌活性(分级抑菌浓度指数在0.094~0.313),表现出良好的协同抗菌作用。体外时间杀菌曲线结果进一步表明,联合用药组可显著降低细菌数量,当亚抑菌浓度(0.5μg/mL)的黏菌素与异丙氧苯胍联用时即可达到杀菌效果。在小鼠肺部感染模型中,与黏菌素或异丙氧苯胍单药组相比,异丙氧苯胍与黏菌素联合组能显著或极显著降低小鼠肺部多杀性巴氏杆菌的载菌量(P<0.05或P<0.01)。HE染色观察小鼠肺脏病理组织切片发现,异丙氧苯胍与黏菌素联合组小鼠肺脏的肺泡结构正常,肺泡腔清洁,优于异丙氧苯胍和黏菌素单独用药组。[结论]异丙氧苯胍与黏菌素联合使用可增强黏菌素对多杀性巴氏杆菌的体内外抗菌效果,有望进一步开发成为新型抗菌增效剂。 展开更多

关键词 异丙氧苯胍 黏菌素 联合用药 多杀性巴氏杆菌 抗菌作用

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异丙氧苯胍联合黏菌素对肺炎克雷伯菌体外协同抗菌作用

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作者 吴素娟 林昌成 +5 位作者 万鹏 李杰 陆毅兴 胡健欣 彭险峰 曾振灵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期5792-5801,共10页

旨在研究异丙氧苯胍与黏菌素的协同抗菌能力及初步联合作用机制,评估异丙氧苯胍是否能作为一种有效的黏菌素增效剂,增强黏菌素抗菌效果,以期为临床上多重耐药肺炎克雷伯菌感染提供有效治疗的理论依据。本研究通过异丙氧苯胍与黏菌素对... 旨在研究异丙氧苯胍与黏菌素的协同抗菌能力及初步联合作用机制,评估异丙氧苯胍是否能作为一种有效的黏菌素增效剂,增强黏菌素抗菌效果,以期为临床上多重耐药肺炎克雷伯菌感染提供有效治疗的理论依据。本研究通过异丙氧苯胍与黏菌素对肺炎克雷伯菌的最低抑菌浓度、棋盘试验、时间杀菌曲线、耐药性诱导和荧光染料试验对协同抗菌及初步联合机制进行研究。结果显示:异丙氧苯胍单用对肺炎克雷伯菌没有抗菌活性,但与黏菌素联用可对肺炎克雷伯菌产生协同作用,与阿莫西林联用时具有相加作用。时间杀菌曲线表明,两药联合使用时,异丙氧苯胍可增强肺炎克雷伯菌对黏菌素的敏感性,细菌数量与黏菌素单药作用相比下降>2 lg(CFU·mL^(-1)),具有协同作用。在长期诱导耐药性试验中,较黏菌素单药组、联合用药组中黏菌素更不易诱导产生耐药性。协同作用机制试验结果表明,黏菌素与异丙氧苯胍联合使用时,可以破坏细胞质膜通透性,影响细胞膜电势,消散质子动力势能,使细胞膜难以发挥正常功能。本研究发现异丙氧苯胍与低浓度黏菌素联用对肺炎克雷伯菌具有良好协同抗菌活性,增强黏菌素的抗菌作用。综上表明,异丙氧苯胍可以恢复多重耐药肺炎克雷伯菌对黏菌素的敏感性,可作为治疗肺炎克雷伯菌感染的潜在治疗方案。 展开更多

关键词 肺炎克雷伯菌 MCR 异丙氧苯胍 黏菌素 协同抗菌活性

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环境中噬菌体携带耐药基因传播的研究进展 被引量：4

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作者 曾振灵 王勉之 孙永学 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期598-604,共7页

噬菌体是地球上最丰富和最多样化的生物实体,其数量是细菌的10~100倍。它们感染易感细菌宿主,并通过转导作用在宿主细胞内繁殖或以前噬菌体形式整合自身基因至细菌基因组中,从而有助于它们在细菌宿主中的繁殖(短期)或进化(长期)。利用... 噬菌体是地球上最丰富和最多样化的生物实体,其数量是细菌的10~100倍。它们感染易感细菌宿主,并通过转导作用在宿主细胞内繁殖或以前噬菌体形式整合自身基因至细菌基因组中,从而有助于它们在细菌宿主中的繁殖(短期)或进化(长期)。利用荧光定量PCR方法(q PCR)对不同环境来源的噬菌体基因进行定量分析,发现其基因组中携带大量的耐药基因(ARG),其中检出率及丰度最高的为耐β-内酰胺抗生素的基因,主要为blaTEM、blaCTX-M-groups、blaSHV、blaNDM和blaKPC,以及耐氟喹诺酮类药物的基因qnr A、qnr B和qnr S。且随着高通量测序方法的不断改进,用此方法针对不同样品的宏基因组测序结果分析也同样发现了高水平ARG的存在。这些结果表明噬菌体可能成为潜在的储存载体,促进抗生素耐药性的传播。本文将从荧光定量PCR(q PCR)方法和全基因组测序方法两方面综述全球不同环境样本中噬菌体基因组携带ARG的情况以及其多样性和丰度的研究进展,并讨论其潜在危害性,希望引起更多的关注。 展开更多

关键词 噬菌体 转导 耐药基因 基因水平转移

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氨基糖苷类抗生素耐药机制及其对抗策略的研究进展 被引量：13

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作者 刘可欣 周焱洪 +1 位作者 雍燕 方炳虎 《动物医学进展》 北大核心 2020年第10期102-106,共5页

氨基糖苷类抗生素作为临床上使用最广泛的抗生素之一,得到了充分的开发和利用。它的优势十分突出,除了广谱的对革兰阴性菌和阳性菌的杀灭作用外,其还常与β-内酰胺类抗生素联合应用增强药物效果。但细菌的耐药问题也随着氨基糖苷类抗生... 氨基糖苷类抗生素作为临床上使用最广泛的抗生素之一,得到了充分的开发和利用。它的优势十分突出,除了广谱的对革兰阴性菌和阳性菌的杀灭作用外,其还常与β-内酰胺类抗生素联合应用增强药物效果。但细菌的耐药问题也随着氨基糖苷类抗生素的使用慢慢出现。现有的研究已经证明,细菌对氨基糖苷类抗生素的耐药机制主要包括氨基糖苷类修饰酶的修饰作用、细菌靶位突变和药物的摄取积累减少等。论文对氨基糖苷类抗生素主要的几种耐药机制进行了综述,同时针对克服氨基糖苷类耐药机制的策略,进行了总结和探讨。 展开更多

关键词 氨基糖苷类抗生素 修饰酶 靶位突变 细胞膜 外排泵

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基于功能宏基因组学挖掘抗生素耐药基因研究进展 被引量：5

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作者 鲁兆祥 王夕冉 +3 位作者 连新磊 廖晓萍 刘雅红 孙坚 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期17-27,共11页

随着各类抗生素被广泛用于治疗细菌感染以及抗生素在临床上的大量使用,驱动了各类抗生素耐药基因的不断进化,导致了耐药问题日趋严重。耐药基因与耐药细菌的广泛传播与普遍流行严重威胁公共卫生体系并引起了巨大的经济损失。值得注意的... 随着各类抗生素被广泛用于治疗细菌感染以及抗生素在临床上的大量使用,驱动了各类抗生素耐药基因的不断进化,导致了耐药问题日趋严重。耐药基因与耐药细菌的广泛传播与普遍流行严重威胁公共卫生体系并引起了巨大的经济损失。值得注意的是,抗生素的广泛施用不仅造成了动物体内耐药细菌的产生,还提高了对环境中微生物的选择压力,间接推动了耐药基因的发展与进化,使环境微生物成为耐药基因新的储库。因此对耐药细菌的广泛监测与新型耐药基因的提前发掘具有重要的临床意义与研究价值。但是传统的耐药性调查手段过度依赖对耐药细菌的培养,难以全面的展现固定生态位中微生物耐药性的全貌。而功能宏基因组学技术利用其表型筛选和高通量测序相结合的优势,不依赖于对携带目标基因的特定细菌的培养,因此在发掘新型功能基因方面有着巨大的优势。本文综述了功能宏基因组在抗生素耐药方面的研究进展,讨论了功能宏基因组学方法在检测新型基因研究中的意义及存在的问题,为后续深入开展对抗生素耐药机制的探究提供了坚实的理论基础。 展开更多

关键词 功能宏基因组学 环境微生物 新型耐药基因 抗生素

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大肠杆菌Nissle 1917对炎症性肠病治疗作用的研究进展 被引量：1

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作者 陈彩萍 任昊 +3 位作者 龙腾飞 何冰 鲁兆祥 孙坚 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期109-118,共10页

炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)是一组特定的肠道疾病的统称,主要体现为慢性及复发性的肠道炎症。其全球发病率正在迅速上升,严重影响人们生活质量与生命健康,已成为当前的全球性健康问题。在过去的几十年里,大量研究表明... 炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)是一组特定的肠道疾病的统称,主要体现为慢性及复发性的肠道炎症。其全球发病率正在迅速上升,严重影响人们生活质量与生命健康,已成为当前的全球性健康问题。在过去的几十年里,大量研究表明IBD的发病率与肠道菌群失调有关。因此,以肠道益生菌为主的治疗策略成为一大热点,其中大肠杆菌Nissle 1917(Escherichia coli Nissle 1917,EcN)备受关注。本文聚焦肠道益生菌EcN在治疗IBD中的应用与机制,系统地综述了EcN的益生菌特性,概述EcN在临床实践中对IBD的治疗应用,同时从上皮屏障完整性调节、免疫调节、黏液屏障保护和肠道菌群稳态等方面阐述EcN治疗IBD的具体作用机制。此外,结合当前的研究现状,讨论了未来基于工程化EcN新疗法的发展前景,强调EcN在IBD治疗和预防中的适用性和可行性策略,并对该领域未来的研究方向进行了展望,为进一步深入研究EcN治疗IBD提供思路和参考。 展开更多

关键词 炎症性肠病 大肠杆菌Nissle 1917 治疗作用 作用机制

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9种夹竹桃科和大戟科植物抗菌和抗氧化活性测定 被引量：10

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作者 张伟豪 翁道玥 +4 位作者 宋慧云 崔泽华 孙坚 吴玉婷 单体江 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期85-90,共6页

【目的】筛选具有抗菌和抗氧化活性的植物次生代谢产物,为夹竹桃科和大戟科植物资源的开发和利用提供理论依据。【方法】以华南地区常见的5种夹竹桃科植物和4种大戟科植物为研究对象,采用甲醇冷浸提取和乙酸乙酯萃取方法制备植物提取物... 【目的】筛选具有抗菌和抗氧化活性的植物次生代谢产物,为夹竹桃科和大戟科植物资源的开发和利用提供理论依据。【方法】以华南地区常见的5种夹竹桃科植物和4种大戟科植物为研究对象,采用甲醇冷浸提取和乙酸乙酯萃取方法制备植物提取物,以薄层层析(TLC)—生物自显影法测定9种植物提取物的体外抗细菌和抗氧化活性,通过斑点及斑点的迁移率(R_f)初步评价样品中化合物的极性和活性,根据抑菌斑大小评价化合物的活性。【结果】除银柴外,其余8种植物提取物对供试细菌均表现出一定的抑制活性,其中红背桂、红背山麻杆和蝴蝶果对7种供试细菌均表现出较强的抑菌活性,且红背桂和蝴蝶果提取物的抑菌斑直径超过10 mm,R_f集中在0~0.13,说明活性化合物极性偏大。除夹竹桃科的羊角坳外,其余8种植物提取物均表现出一定的抗氧化活性,其中红背山麻杆的抗氧化活性最强,R_f为0~0.52,抗氧化斑直径为5~10 mm。【结论】TLC-生物自显影法能够快速检测和筛选具有抗菌和抗氧化活性的植物提取物。红背山麻杆、红背桂和蝴蝶果可作为抗细菌的候选植物资源利用,红背山麻杆可同时作为优良的抗氧化植物资源利用。 展开更多

关键词 夹竹桃科 大戟科 抗菌活性 抗氧化活性 薄层层析(TLC)—生物自显影法

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广东鹅场大肠杆菌耐药状况及blaCTX-M基因的传播特征 被引量：10

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作者 岑道机 麦嘉琳 +5 位作者 周毓源 耿昊宇 刘昌海 邓国辉 姜琪 方亮星 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第5期1571-1582,共12页

为揭示广东地区鹅场动物和环境源大肠杆菌的耐药情况及超广谱β-内酰胺酶CTX-M的流行与传播特征,本研究从广东省江门及阳江市共10处鹅场采集鹅及环境样品199份,采用MALDI-TOF-MS法分离鉴定大肠杆菌。采用琼脂稀释法对菌株进行耐药性分析... 为揭示广东地区鹅场动物和环境源大肠杆菌的耐药情况及超广谱β-内酰胺酶CTX-M的流行与传播特征,本研究从广东省江门及阳江市共10处鹅场采集鹅及环境样品199份,采用MALDI-TOF-MS法分离鉴定大肠杆菌。采用琼脂稀释法对菌株进行耐药性分析,采用PCR法检测头孢噻肟耐药菌中blaCTX-M基因及其基因环境,采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)、接合转移和质粒复制子分型等方法探究blaCTX-M基因的传播特征。结果显示,共获得196株大肠杆菌,对氨苄西林、多西环素、氟苯尼考和链霉素耐药率均超过50%,第三代头孢菌素耐药率为10%~25%,其中头孢噻肟耐药菌有49株(24.6%)。阳江地区大肠杆菌对受试药物的耐药率高于江门,且动物源高于环境源,尤其是头孢噻肟和头孢噻呋均存在显著差异(P<0.05)。头孢噻肟耐药菌中共检出19株携带blaCTX-M基因,包括blaCTX-M-55(n=17)、blaCTX-M-27(n=1)和blaCTX-M-65(n=1),且blaCTX-M基因阳性菌均可对5~11种药物耐药,呈现多重耐药的表型。blaCTX-M-55基因环境均为ISEcp1-blaCTX-M-55-orf477,且在ISEcp1与blaCTX-M基因之间有3种长度的间隔序列;而blaCTX-M-27和blaCTX-M-65的基因环境均为ISEcp1-blaCTX-M-27/65-IS903。19株blaCTX-M基因阳性菌呈现10种PFGE谱型,存在一种主要流行的谱型(47.4%),其包括多种来源菌株,暗示存在克隆传播现象。12株(63.2%)blaCTX-M基因阳性大肠杆菌中blaCTX-M基因转移成功,blaCTX-M基因阳性接合子携带的复制子型为IncFⅡ(n=10)和IncHⅠ2(n=2),且存在多西环素和氟苯尼考耐药表型与blaCTX-M基因共转移现象。研究发现,阳江鹅场大肠杆菌耐药情况较为严重,blaCTX-M基因存在一定的流行性且以blaCTX-M-55亚型为主,blaCTX-M基因阳性菌的克隆传播和质粒及插入序列ISEcp1介导的水平传播是导致该基因在鹅场大肠杆菌中扩散的主要原因,应引起高度重视。 展开更多

关键词 鹅场 大肠杆菌 耐药性 blaCTX-M基因 第三代头孢菌素

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