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基于TaqMan探针的柑橘黄龙病菌亚洲种实时荧光PCR快速检测方法: 1; 作者杨小龙滕少娜 +5 位作者何玲周林高文娜王溪桥孔德英孙涛《山地农业生物学报》 2025年第3期74-78,共5页; 柑橘黄龙病是我国目前柑橘生产中危害最严重的病害之一。根据柑橘黄龙病菌亚洲种rplj基因的种内保守序列,设计并合成了一对特异性引物和一条TaqMan探针,建立了柑橘黄龙病菌亚洲种的实时荧光PCR检测方法。该方法能够特异性检测柑橘黄龙... 展开更多; 关键词柑橘黄龙病柑橘黄龙病菌亚洲种快速检测实时荧光PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

基于ITS2条形码的人参属物种鉴定研究被引量：7: 2; 作者孙涛孔德英 +4 位作者滕少娜蒋丹邓朝晖陆丽华何玲《湖北农业科学》 2016年第19期5072-5074,共3页; 人参属植物种类繁多,多数具有重要的生物学及药用价值。采用植物DNA条形码候选序列之一的ITS2片段鉴定人参属药用植物。结果表明,ITS2基因区通用性强,序列在人参属物种间差异较大,属内变异位点为41个,保守位点189个,种内遗传距离为0-0.0... 展开更多; 关键词人参属 DNA条形码 ITS2 鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

基于ITS2序列的黄连及其伪混品的分子鉴定被引量：8: 3; 作者孙涛孔德英 +3 位作者滕少娜陆丽华邓朝晖李应国《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2013年第9期20-22,共3页; 为建立重要中药材黄连及其伪混品的DNA条形码鉴定方法,采用国际通用的条形码序列ITS2对黄连属3个物种6份样品的ITS2序列进行PCR扩增与测序,同时从GenBank下载黄连及其常见混伪品共8个物种18个样本的序列信息。采用MEGA5.05计算黄连及其... 展开更多; 关键词黄连 DNA条形码 ITS2 鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

五倍子蜂蜜TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：11: 4; 作者孙涛夏明星 +5 位作者孔德英张学健滕少娜邓朝晖夏晓华李应国《贵州农业科学》 CAS 2016年第8期15-18,共4页; 为五倍子蜂蜜的鉴定检测提供技术支撑,利用TaqMan探针实时荧光定量PCR技术,以五倍子树基因组中ITS基因为靶序列,设计并筛选出特异性引物探针,通过特异性、灵敏度和重复性等试验,建立五倍子蜂蜜TaqMan探针实时荧光PCR检测方法。结果表明... 展开更多; 关键词五倍子树蜂蜜检测 TaqMan实时荧光定量PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

喀斯特炭疽菌TaqMan探针实时荧光PCR检测方法的建立: 5; 作者孙涛孔德英 +1 位作者滕少娜邓朝晖《贵州农业科学》 CAS 2017年第2期5-9,共5页; 为寻求喀斯特炭疽菌的快速检测方法,利用TaqMan探针实时荧光定量PCR技术,以喀斯特炭疽菌基因组中的ACT基因为靶序列设计并筛选特异性引物探针,通过特异性、灵敏度、重复性试验建立喀斯特炭疽菌TaqMan探针实时荧光PCR检测方法。结果表明... 展开更多; 关键词喀斯特炭疽菌检疫鉴定 TaqMan实时荧光PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

亚洲梨火疫病菌入侵风险分析及防控建议: 6; 作者孙涛滕少娜 +6 位作者周林覃海文高文娜陈力何玲杨小龙孔德英《中国南方果树》北大核心 2025年第5期200-204,共5页; 由革兰氏阴性菌Erwinia pyrifoliae引起的亚洲梨火疫病是一种为害梨、苹果等果树的毁灭性病害,对我国水果产业构成巨大威胁。该病菌是我国进境植物检疫性有害生物和重点管理外来入侵物种。文章从亚洲梨火疫病菌E.pyrifoliae的生物学特... 展开更多; 关键词梨火疫病亚洲梨火疫病菌风险分析风险管理综合防控; 在线阅读下载PDF 职称材料

人参实时荧光定量PCR鉴定方法的建立被引量：5: 7; 作者周林孙涛 +5 位作者滕少娜陈亭旭何玲刘静远付海滨孔德英《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期70-75,共6页; 根据人参和人参属其他物种的18S rRNA基因序列差异设计特异引物和探针,建立人参TaqMan实时荧光PCR鉴定方法.应用该方法测试58个样品,包括30个不同来源的人参样品、 15个其他人参属样品以及13个形态近似样品.结果表明:所有供试的人参样... 展开更多; 关键词人参实时荧光定量PCR 鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

双重实时荧光PCR快速鉴别人参和西洋参被引量：5: 8; 作者孙涛周林 +5 位作者滕少娜何玲陈亭旭任风鸣潘英文孔德英《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2022年第8期2986-2994,共9页; 目的建立一种能够快速鉴定人参和西洋参的双重实时荧光PCR方法。方法通过对人参属及其近似种基因序列的分析比对,设计特异性的引物探针,建立双重实时荧光PCR检测方法。PCR反应体系为Premix Ex Taq(Probe qPCR)10μL,人参上下游引物各0.5... 展开更多; 关键词人参西洋参双重实时荧光PCR 快速鉴别; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于TaqMan探针的柑橘黄龙病菌亚洲种实时荧光PCR快速检测方法: 1; 作者杨小龙滕少娜何玲周林高文娜王溪桥孔德英孙涛; 机构重庆海关技术中心国家中药材物种鉴定及质量安全检测重点实验室中国海洋科学技术研究中心兰州海关技术中心; 出处《山地农业生物学报》 2025年第3期74-78,共5页; 基金海关总署科研项目(2020HK176)。; 文摘柑橘黄龙病是我国目前柑橘生产中危害最严重的病害之一。根据柑橘黄龙病菌亚洲种rplj基因的种内保守序列,设计并合成了一对特异性引物和一条TaqMan探针,建立了柑橘黄龙病菌亚洲种的实时荧光PCR检测方法。该方法能够特异性检测柑橘黄龙病菌亚洲种,具有良好的特异性。灵敏度试验结果表明,在20μL反应体系中,检测的最低DNA浓度为0.01 ng/μL。对实际样品检测结果表明,该方法可有效检出受柑橘黄龙病菌亚洲种侵染的柑橘。本文所建立的检测方法具有特异性强、灵敏度高的优点,可用于疑似柑橘黄龙病菌亚洲种的检测和初筛。; 关键词柑橘黄龙病柑橘黄龙病菌亚洲种快速检测实时荧光PCR; Keywords Citrus Huanglongbing Candidatus Liberibacter asiaticus rapid detection real-time fluorescence PCR; 分类号 S436.66 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于ITS2条形码的人参属物种鉴定研究被引量：7: 2; 作者孙涛孔德英滕少娜蒋丹邓朝晖陆丽华何玲; 机构重庆出入境检验检疫局国家中药材物种鉴定及质量安全检测重点实验室辽宁出入境检验检疫局; 出处《湖北农业科学》 2016年第19期5072-5074,共3页; 基金国家质检总局科技计划项目(2013IK291) 国家质检总局科技计划项目(2015IK336) "十二五"国家科技支撑计划项目(2012BAK11B03); 文摘人参属植物种类繁多,多数具有重要的生物学及药用价值。采用植物DNA条形码候选序列之一的ITS2片段鉴定人参属药用植物。结果表明,ITS2基因区通用性强,序列在人参属物种间差异较大,属内变异位点为41个,保守位点189个,种内遗传距离为0-0.004,种间遗传距离为0.006-0.098,平均遗传距离为0.044。基于K2P模型构建的系统发育树（NJ树）显示,同一物种均聚为一类。因此,ITS2作为DNA条形码能够有效地区别人参属物种,为人参属药材及其伪混品的鉴定提供基础。; 关键词人参属 DNA条形码 ITS2 鉴定; Keywords Panax sp DNA barcode ITS2 identification; 分类号 Q789 [生物学—分子生物学] R282.5 [医药卫生—中药学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于ITS2序列的黄连及其伪混品的分子鉴定被引量：8: 3; 作者孙涛孔德英滕少娜陆丽华邓朝晖李应国; 机构重庆出入境检验检疫局国家中药材物种鉴定及质量安全检测重点实验室; 出处《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2013年第9期20-22,共3页; 基金质检公益性行业科研专项"中药材进出口贸易问题及对策研究"(201010045); 文摘为建立重要中药材黄连及其伪混品的DNA条形码鉴定方法,采用国际通用的条形码序列ITS2对黄连属3个物种6份样品的ITS2序列进行PCR扩增与测序,同时从GenBank下载黄连及其常见混伪品共8个物种18个样本的序列信息。采用MEGA5.05计算黄连及其伪混品的种内、种间K2P距离,并基于K2P模型构建NJ树。结果显示:ITS2种间遗传距离大于种内遗传距离,黄连属及其伪混品不同种样品分别聚类在一起,能很好地区分开来。故ITS2序列可以作为黄连及其伪混品鉴定用的条形码。; 关键词黄连 DNA条形码 ITS2 鉴定; Keywords rhizoma coptidis DNA barcode ITS2 identification; 分类号 Q754 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名五倍子蜂蜜TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：11: 4; 作者孙涛夏明星孔德英张学健滕少娜邓朝晖夏晓华李应国; 机构重庆出入境检验检疫局国家中药材物种鉴定及质量安全检测重点实验室万州出入境检验检疫局重庆峰谷美地生态养蜂有限公司; 出处《贵州农业科学》 CAS 2016年第8期15-18,共4页; 基金重庆市科技计划项目"秦巴山区特色蜂蜜(五倍子)基因真伪鉴别技术研究"(cstc2014yykfA80022) 国家质检总局科技计划项目"基于DNA条形码的三种重要炭疽菌快速检测技术研究"(2015IK336); 文摘为五倍子蜂蜜的鉴定检测提供技术支撑,利用TaqMan探针实时荧光定量PCR技术,以五倍子树基因组中ITS基因为靶序列,设计并筛选出特异性引物探针,通过特异性、灵敏度和重复性等试验,建立五倍子蜂蜜TaqMan探针实时荧光PCR检测方法。结果表明:建立的方法特异性良好,生成的标准曲线有良好的线性关系,相关系数(R2)为0.998,最低检测限为0.2pg DNA/反应。该方法特异性强、灵敏度高、结果可靠。; 关键词五倍子树蜂蜜检测 TaqMan实时荧光定量PCR; Keywords nutgall tree honey detection TaqMan real-time PCR; 分类号 Q754 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名喀斯特炭疽菌TaqMan探针实时荧光PCR检测方法的建立: 5; 作者孙涛孔德英滕少娜邓朝晖; 机构重庆出入境检验检疫局国家中药材物种鉴定及质量安全检测重点实验室; 出处《贵州农业科学》 CAS 2017年第2期5-9,共5页; 基金国家质量监督检验检疫总局科技计划项目"基于DNA条形码的三种重要炭疽菌快速检测技术研究"(2015IK336); 文摘为寻求喀斯特炭疽菌的快速检测方法,利用TaqMan探针实时荧光定量PCR技术,以喀斯特炭疽菌基因组中的ACT基因为靶序列设计并筛选特异性引物探针,通过特异性、灵敏度、重复性试验建立喀斯特炭疽菌TaqMan探针实时荧光PCR检测方法。结果表明:建立方法的特异性较强、灵敏度较高、重复性稳定性较好,最低检测限为0.2pg DNA/反应,标准曲线的线性关系良好,相关系数为0.998。该方法操作简便,可用于进出境口岸喀斯特炭疽菌的检疫。; 关键词喀斯特炭疽菌检疫鉴定 TaqMan实时荧光PCR; Keywords Colletotrichum karstii quarantine identification TaqMan real-time fluorescence PCR; 分类号 S41-30 [农业科学—植物保护]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名亚洲梨火疫病菌入侵风险分析及防控建议: 6; 作者孙涛滕少娜周林覃海文高文娜陈力何玲杨小龙孔德英; 机构重庆海关技术中心国家中药材物种鉴定及质量安全检测重点实验室(重庆) 中国海关科学技术研究中心重庆市万州区经济作物发展中心; 出处《中国南方果树》北大核心 2025年第5期200-204,共5页; 基金重庆市技术创新与应用发展专项(CSTB2022TIAD-GPX0056) 海关总署科研项目(2020HK176)资助。; 文摘由革兰氏阴性菌Erwinia pyrifoliae引起的亚洲梨火疫病是一种为害梨、苹果等果树的毁灭性病害,对我国水果产业构成巨大威胁。该病菌是我国进境植物检疫性有害生物和重点管理外来入侵物种。文章从亚洲梨火疫病菌E.pyrifoliae的生物学特性、为害特性、入侵扩散风险等方面进行了总结和综合分析评估,提出了风险管理措施,以期为亚洲梨火疫病的研究和防治提供参考。; 关键词梨火疫病亚洲梨火疫病菌风险分析风险管理综合防控; Keywords Asian pear fire blight Erwinia pyrifoliae risk analysis risk management integrated control; 分类号 S436.6 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人参实时荧光定量PCR鉴定方法的建立被引量：5: 7; 作者周林孙涛滕少娜陈亭旭何玲刘静远付海滨孔德英; 机构重庆海关技术中心国家中药材物种鉴定及质量安全检测重点实验室上海海关动植物与食品检验检疫技术中心沈阳海关技术中心; 出处《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期70-75,共6页; 基金国家重点研发计划项目(2017YFF0210303)。; 文摘根据人参和人参属其他物种的18S rRNA基因序列差异设计特异引物和探针,建立人参TaqMan实时荧光PCR鉴定方法.应用该方法测试58个样品,包括30个不同来源的人参样品、 15个其他人参属样品以及13个形态近似样品.结果表明:所有供试的人参样品均表现为阳性扩增,非人参及空白对照均未出现阳性扩增.灵敏度检测结果显示:此实时荧光PCR方法的最低检测限为0.03 pg/μL反应.此方法可快速、准确、灵敏地鉴定人参及其加工产品,适用于口岸进出口鉴定.; 关键词人参实时荧光定量PCR 鉴定; Keywords Panax ginseng real-time PCR identification; 分类号 S567.51 [农业科学—中草药栽培]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名双重实时荧光PCR快速鉴别人参和西洋参被引量：5: 8; 作者孙涛周林滕少娜何玲陈亭旭任风鸣潘英文孔德英; 机构重庆海关技术中心国家中药材物种鉴定及质量安全检测重点实验室重庆市药物种植研究所特色生物资源研究与利用川渝共建重点实验室海口海关热带植物隔离检疫中心; 出处《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2022年第8期2986-2994,共9页; 基金国家科学技术部国家重点研发计划(2017YFF0210303):珍贵动植物种质活性鉴别及溯源技术研究,负责人:孔德英重庆海关科技项目(2021CQKY09):西洋参鉴定方法研究,负责人:周林; 文摘目的建立一种能够快速鉴定人参和西洋参的双重实时荧光PCR方法。方法通过对人参属及其近似种基因序列的分析比对,设计特异性的引物探针,建立双重实时荧光PCR检测方法。PCR反应体系为Premix Ex Taq(Probe qPCR)10μL,人参上下游引物各0.5μL,西洋参上下游引物各0.3μL,人参与西洋参特异性探针各0.4μL,DNA模板2μL,灭菌去离子水补至20μL。反应条件为95℃预变性30 s;然后以95℃变性5 s,60℃退火延伸30 s进行40个循环。应用该方法测试了27份DNA样品,包括7份人参、6份西洋参、4份人参与西洋参混合样、10份其他人参属样品及其他常见中药材样品的DNA,以确定该方法的特异性。将人参与西洋参样品DNA混合后10倍稀释成不同浓度后进行检测,用以确定该方法的灵敏度。结果人参及西洋参样品均在特定的荧光通道下出现典型的阳性扩增曲线,人参与西洋参混合样品均同时出现两条阳性扩增曲线,其它对照样品及空白对照均没有出现阳性扩增曲线。灵敏度检测结果显示该方法检测人参及西洋参的最低检测限均为2 pg DNA/反应。结论本实验建立的双重实时荧光PCR方法能够同时快速、准确、灵敏地鉴别出人参和西洋参。; 关键词人参西洋参双重实时荧光PCR 快速鉴别; Keywords Panax ginseng Panax quinquefolium duplex real-time PCR rapid identification; 分类号 R282.5 [医药卫生—中药学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	基于TaqMan探针的柑橘黄龙病菌亚洲种实时荧光PCR快速检测方法	杨小龙滕少娜何玲周林高文娜王溪桥孔德英孙涛	《山地农业生物学报》	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	基于ITS2条形码的人参属物种鉴定研究	孙涛孔德英滕少娜蒋丹邓朝晖陆丽华何玲	《湖北农业科学》	2016	7	在线阅读下载PDF 职称材料
3	基于ITS2序列的黄连及其伪混品的分子鉴定	孙涛孔德英滕少娜陆丽华邓朝晖李应国	《贵州农业科学》 CAS 北大核心	2013	8	在线阅读下载PDF 职称材料
4	五倍子蜂蜜TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立	孙涛夏明星孔德英张学健滕少娜邓朝晖夏晓华李应国	《贵州农业科学》 CAS	2016	11	在线阅读下载PDF 职称材料
5	喀斯特炭疽菌TaqMan探针实时荧光PCR检测方法的建立	孙涛孔德英滕少娜邓朝晖	《贵州农业科学》 CAS	2017	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	亚洲梨火疫病菌入侵风险分析及防控建议	孙涛滕少娜周林覃海文高文娜陈力何玲杨小龙孔德英	《中国南方果树》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	人参实时荧光定量PCR鉴定方法的建立	周林孙涛滕少娜陈亭旭何玲刘静远付海滨孔德英	《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2022	5	在线阅读下载PDF 职称材料
8	双重实时荧光PCR快速鉴别人参和西洋参	孙涛周林滕少娜何玲陈亭旭任风鸣潘英文孔德英	《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心	2022	5	在线阅读下载PDF 职称材料