基于肠道菌群研究瘀血痹片对类风湿关节炎的作用 被引量：1

1

作者 邵平 韩凌 +4 位作者 齐沐爽 任颖 朱婉君 代春美 胡相卡 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2024年第3期358-368,共11页

目的基于肠道菌群探讨瘀血痹片对类风湿关节炎的作用。方法36只SD大鼠随机分为正常对照组、胶原诱导型类风湿关节炎(CIA)组、甲氨蝶呤0.002 g·kg^(-1)剂量组、瘀血痹片0.4、0.8、1.6 g·kg^(-1)(YXBL、YXBM、YXBH)剂量组,后5... 目的基于肠道菌群探讨瘀血痹片对类风湿关节炎的作用。方法36只SD大鼠随机分为正常对照组、胶原诱导型类风湿关节炎(CIA)组、甲氨蝶呤0.002 g·kg^(-1)剂量组、瘀血痹片0.4、0.8、1.6 g·kg^(-1)(YXBL、YXBM、YXBH)剂量组,后5组采用牛Ⅱ型胶原乳剂诱导类风湿关节炎模型,除正常组和CIA组大鼠给予三蒸水外,其余各组按上述剂量灌胃给药。30 d后,测量各组大鼠脾脏、胸腺质量,计算脾脏、胸腺指数;HE染色观察滑膜组织、脾脏和结肠病理变化;16S rRNA高通量测序技术测定各组大鼠肠道菌群变化。结果瘀血痹片可使CIA大鼠脾脏指数、胸腺指数下降(P>0.05),足爪体积、踝周长、关节炎评分减少(P<0.01),滑膜组织增生减轻、炎性细胞浸润减少,改善脾脏和结肠病理变化,降低CIA大鼠肠道菌群中Fusicatenibacter、Erysipelotrichaceae_UCG-003、Monoglobus、UCG-005菌属的相对丰度(P<0.05),增加Prevotellaceae_UCG-003菌属的相对丰度(P<0.05)。结论瘀血痹片对类风湿关节炎具有改善作用,可能与其调控肠道菌群有关。 展开更多

关键词 瘀血痹片 类风湿关节炎 16S rRNA高通量测序技术 肠道菌群 物种差异性分析

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岗梅种苗质量分级标准研究 被引量：15

2

作者 李俊仁 陈秀珍 +4 位作者 梁凌玲 张振山 邢建永 詹若挺 何瑞 《种子》 北大核心 2016年第3期115-118,共4页

目的：研究岗梅种苗质量分级标准。方法：测量1年生岗梅种子实生苗的株高、株径、根长等参数,通过多种方法进行分级获得分级标准,以不同级别存活苗分布情况来评价3种质量分级方法。结果：确定以种苗参数K-聚类法进行质量分级,将岗梅种... 目的：研究岗梅种苗质量分级标准。方法：测量1年生岗梅种子实生苗的株高、株径、根长等参数,通过多种方法进行分级获得分级标准,以不同级别存活苗分布情况来评价3种质量分级方法。结果：确定以种苗参数K-聚类法进行质量分级,将岗梅种苗分为三级,其中一级种苗株高≥59cm,根长≥22cm,株径≥6.96mm;二级种苗株高43～59cm,根长18～22cm,株径4.88～6.96mm;三级种苗株高15.5～43cm,根长10～18cm,株径2.18～4.88mm。结论：建立了适用于生产实践的岗梅种苗质量分级标准。 展开更多

关键词 岗梅 种苗 分级标准 聚类分析

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具胁迫“记忆”特征的白木香离体根的miRNA分析

3

作者 庄婷婷 李佳欣 +1 位作者 詹若挺 马新业 《热带作物学报》 北大核心 2025年第4期820-830,共11页

本研究以白木香离体根为材料,在经过连续三代盐胁迫处理后,使用EASYspin Plus植物快速提取试剂盒提取样品的总RNA,利用HiSeq 2500高通量测序平台进行测序,旨在探讨miRNA在白木香三代离体根盐胁迫中发挥的作用及可能参与调控的代谢途径,... 本研究以白木香离体根为材料,在经过连续三代盐胁迫处理后,使用EASYspin Plus植物快速提取试剂盒提取样品的总RNA,利用HiSeq 2500高通量测序平台进行测序,旨在探讨miRNA在白木香三代离体根盐胁迫中发挥的作用及可能参与调控的代谢途径,为揭示白木香抵御盐胁迫机制的研究提供参考。取白木香三代盐胁迫的离体根为材料,通过使用高通量测序平台及生物信息学技术,获得第一代、第二代、第三代的miRNA表达谱,筛选三代离体根中的差异miRNA,对差异miRNA进行靶基因预测,之后进行靶基因分析,从而获得可能参与白木香次生代谢产物及响应盐胁迫相关的miRNA。结果显示:第一代样品中共检测出508个已知miRNA和764个新预测miRNA,第二代样品中共检测出444个已知miRNA和673个新预测miRNA,第三代样品中共检测出904个已知miRNA和1100个新预测miRNA。三代样品中共获得59个差异表达miRNA及275个靶基因,上调的miRNA靶基因主要参与类黄酮生物合成、谷胱甘肽代谢等信号通路,下调的miRNA靶基因则主要涉及苯丙烷类生物合成、植物激素信号传导、植物病原相互作用等信号通路。选取关键miRNA进行NR注释,结果发现,miR8020-x和novel-m0628-5p可能参与白木香离体根次生代谢产物合成;miR7494-y、miR477-y、miR5185-y、miR7757-y、miR408-z和novel-m0628-5p可能响应白木香离体根盐胁迫。本研究利用高通量测序得到白木香离体根盐胁迫的miRNA表达谱,并利用生物信息学分析得到可能参与白木香次生代谢产物及响应盐胁迫相关的miRNA,研究结果将有助于增强对白木香在盐胁迫条件下miRNA调控机制的认识,并为白木香次生代谢产物合成提供新的途径。 展开更多

关键词 白木香 胁迫记忆 MIRNA HiSeq 2500高通量测序

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气滞胃痛颗粒治疗反流性胃炎药效学初步研究 被引量：6

4

作者 张跃飞 于婷 +2 位作者 王帅 孟宪生 包永睿 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2015年第8期1570-1572,I0006,共4页

目的:根据气滞胃痛颗粒处方组成,探讨气滞胃痛颗粒对大鼠实验性反流性胃炎的药效作用。方法:采用灌服自制反流液法复制反流性胃炎模型;将大鼠随机分为空白组、枸橼酸莫沙必利组、气滞胃痛颗粒高、中、低剂量组,考察各组中胃黏膜病理损... 目的:根据气滞胃痛颗粒处方组成,探讨气滞胃痛颗粒对大鼠实验性反流性胃炎的药效作用。方法:采用灌服自制反流液法复制反流性胃炎模型;将大鼠随机分为空白组、枸橼酸莫沙必利组、气滞胃痛颗粒高、中、低剂量组,考察各组中胃黏膜病理损伤程度及胃酸度,并采用ELISA法测定血清GAS、MTL、PGE2、尿素酶指标的含量。结果:模型组较空白组胃酸度降低,胃黏膜损伤严重,血清GAS、PGE2显著降低(P<0.05),MTL、尿素酶显著升高(P<0.05);气滞胃痛复方中、高剂量组,阳性对照组较模型组小,损伤程度低,血清GAS、PGE2含量升高,MTL、尿素酶含量降低,有显著性差异,且与空白对照组相近。结论:气滞胃痛颗粒通过调节GAS、MTL、PGE2、尿素酶含量,从保护胃黏膜,促进胃肠蠕动角度,发挥治疗反流性胃炎的药效作用,进而为临床的广泛应用及开发奠定基础。 展开更多

关键词 气滞胃痛颗粒 反流性胃炎 GAS MTL PGE2 尿素酶

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三叉苦质量标准的研究 被引量：6

5

作者 甘杰华 严萍 +2 位作者 马庆 韩正洲 詹若挺 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期511-515,共5页

目的建立三叉苦Melicope pteleifolia(Champion ex Bentham) T.G.Hartley的质量标准。方法 TLC法定性鉴别20批样品;《中国药典》方法测定水分、浸出物、总灰分、酸不溶性灰分含有量;HPLC法测定N-反式-对香豆酰酪胺、茵芋碱、白鲜碱、吴... 目的建立三叉苦Melicope pteleifolia(Champion ex Bentham) T.G.Hartley的质量标准。方法 TLC法定性鉴别20批样品;《中国药典》方法测定水分、浸出物、总灰分、酸不溶性灰分含有量;HPLC法测定N-反式-对香豆酰酪胺、茵芋碱、白鲜碱、吴茱萸春碱含有量。结果 TLC斑点清晰,分离度良好;20批样品中水分、浸出物、总灰分、酸不溶性灰分含有量范围分别为3.68%～8.83%、3.28%～7.29%、0.89%～1.41%、0.02%～0.13%;4种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 7),平均加样回收率96.95%～103.16%,RSD 1.60%～1.92%。结论该方法稳定可靠,可用于三叉苦的质量控制。 展开更多

关键词 三叉苦 N-反式-对香豆酰酪胺 茵芋碱 白鲜碱 吴茱萸春碱 TLC HPLC

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凉粉草不同极性部位抗氧化及对α-葡萄糖苷酶抑制作用研究 被引量：5

6

作者 宋晓娟 卢晓莹 +4 位作者 曾唯雅 伍铭坤 庄伟权 严萍 詹若挺 《医药导报》 CAS 北大核心 2020年第3期286-291,共6页

目的研究凉粉草醇提物不同极性部位抗氧化活性及对α-葡萄糖苷酶抑制作用,并筛选最优部位。方法制备凉粉草醇提液,依次用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取得到不同极性部位,测定1,1-二苯基-2苦基肼自由基(DPPH自由基)、2,2... 目的研究凉粉草醇提物不同极性部位抗氧化活性及对α-葡萄糖苷酶抑制作用,并筛选最优部位。方法制备凉粉草醇提液,依次用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取得到不同极性部位,测定1,1-二苯基-2苦基肼自由基(DPPH自由基)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS自由基)清除能力及铁离子抗氧化能力(FRAP)值,根据清除率计算半数抑制率(IC50值),考察不同部位抗氧化能力。通过比较不同部位对α-葡萄糖苷酶抑制能力,考察不同部位对α-葡萄糖苷酶抑制作用。测定各部位多酚含量。结果凉粉草提取物不同极性部位均有抗氧化活性,其中乙酸乙酯部位抗氧化活性最强,DPPH·清除率IC50为19.13μg·mL^-1,ABTS+清除率IC50为18.20μg·mL^-1,FRAP值平均相当于Fe2+392.07μg·mL^-1。不同部位对α-葡萄糖苷酶抑制作用比较,正丁醇部位最优。结论凉粉草提取物及不同极性部位均具有一定抗氧化活性及对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。该研究可为凉粉草开发利用提供实验依据。 展开更多

关键词 凉粉草 极性部位 抗氧化活性 Α-葡萄糖苷酶

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黄芪破壁饮片的DNA条形码鉴别与黄酮类成分HPLC指纹图谱研究 被引量：2

7

作者 王艳 彭丽华 +1 位作者 郑夏生 成金乐 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2018年第5期789-797,共9页

目的:利用DNA条形码技术对黄芪破壁饮片进行物种鉴定,再建立其黄酮类成分HPLC指纹图谱,为其质量控制和鉴定提供依据。方法:提取15批样品的DNA进行序列分析和物种鉴定。物种鉴定后采用高效液相色谱法,色谱柱:Agilent ZORBAX SB-Aq C18(25... 目的:利用DNA条形码技术对黄芪破壁饮片进行物种鉴定,再建立其黄酮类成分HPLC指纹图谱,为其质量控制和鉴定提供依据。方法:提取15批样品的DNA进行序列分析和物种鉴定。物种鉴定后采用高效液相色谱法,色谱柱:Agilent ZORBAX SB-Aq C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.15%甲酸溶液梯度洗脱;流速0.6 m L/min;检测波长254 nm;柱温25℃;结果:经DNA条形码鉴定,实验所用的15批样品均被鉴定为蒙古黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao。在此基础上建立了15批样品的HPLC指纹图谱,标定11个共有峰,15批样品的相似度在0.9-1.0之间。结论:DNA条形码和指纹图谱两种方法可对黄芪破壁饮片进行物种鉴定和全面反映黄芪破壁饮片中的成分信息,可用于黄芪破壁饮片的真伪鉴定和批间一致性评价。 展开更多

关键词 黄芪破壁饮片 DNA条形码 HPLC指纹图谱

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等离子体处理对不同含水量穿心莲种子萌发的影响 被引量：4

8

作者 童家赟 唐诗韵 +1 位作者 汤小婷 何瑞 《种子》 北大核心 2019年第1期54-59,共6页

为探究大气压等离子体处理对不同含水量穿心莲(Andrographis paniculata)种子萌发的影响,通过调节穿心莲种子含水量分别为6.3%、8.6%、12.9%、18.6%、24.0%和33.4%,再进行等离子体处理,经过发芽试验,以发芽势、发芽率、发芽指数、胚根... 为探究大气压等离子体处理对不同含水量穿心莲(Andrographis paniculata)种子萌发的影响,通过调节穿心莲种子含水量分别为6.3%、8.6%、12.9%、18.6%、24.0%和33.4%,再进行等离子体处理,经过发芽试验,以发芽势、发芽率、发芽指数、胚根长、活力指数、霉变率、正常幼苗百分比等指标,比较不同含水量的种子受到等离子体处理后的萌发效果。结果表明,穿心莲种子的含水量在12.9%、18.6%、24.0%时,经过大气等离子体处理后种子发芽率、发芽指数得到显著提高;同时种子和幼苗霉变坏死率显著下降,正常幼苗百分比提高。然而,对含水量为6.3%、8.6%和33.4%的种子进行处理,达不到促进萌发的效果。因此,不同含水量穿心莲种子的萌发对等离子体处理的响应不同,说明含水量是影响处理效果的重要因素。结合前期研究结果,在农业生产中,建议以含水量为11.6%～24.0%的穿心莲种子进行等离子体处理效果最佳。本研究为实际播种前处理和进一步研究等离子体技术在农业生产中的应用提供参考。 展开更多

关键词 穿心莲 种子 含水量 等离子体 萌发

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治疗荨麻疹中药小复方筛选的思路与方法 被引量：2

9

作者 张宏 梁茂新 +9 位作者 李显华 向绍杰 杜佳林 李坤 包玉龙 李为理 曲艳国 张文涛 李提宝 金凤环 《世界科学技术-中医药现代化》 2005年第4期54-60,共7页

本文以治疗荨麻疹中药小复方筛选为示范,介绍建立小复方筛选的技术平台。小复方的初筛,充分利用“《普济方》数据库管理系统”,结合现代研究成果,按照中医辨证论治和组方原则拟定;对不同处方及不同制备工艺进行药效学评价,以确定最佳组... 本文以治疗荨麻疹中药小复方筛选为示范,介绍建立小复方筛选的技术平台。小复方的初筛,充分利用“《普济方》数据库管理系统”,结合现代研究成果,按照中医辨证论治和组方原则拟定;对不同处方及不同制备工艺进行药效学评价,以确定最佳组合和最佳制备工艺;再用均匀设计法对选定处方进行不同剂量配比的药效学评价,最终确定后续开发的精选小复方。 展开更多

关键词 中药 小复方 荨麻疹 技术平台 中药小复方 筛选 治疗 数据库管理系统 药效学评价 中医辨证论治

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仙草总黄酮提取纯化工艺优化及其抗氧化活性 被引量：13

10

作者 魏星任 宋晓娟 +3 位作者 龙洁怡 张娇 严萍 詹若挺 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期1185-1188,共4页

目的优化仙草总黄酮提取纯化工艺,并评价其抗氧化活性。方法在单因素试验基础上,以乙醇体积分数、料液比、提取时间为影响因素,总黄酮提取量为评价指标,正交试验优化提取工艺;以总黄酮吸附率、解吸附率为指标,考察不同型号大孔树脂对纯... 目的优化仙草总黄酮提取纯化工艺,并评价其抗氧化活性。方法在单因素试验基础上,以乙醇体积分数、料液比、提取时间为影响因素,总黄酮提取量为评价指标,正交试验优化提取工艺;以总黄酮吸附率、解吸附率为指标,考察不同型号大孔树脂对纯化效果的影响。然后,通过测定总黄酮DPPH清除能力考察纯化产物抗氧化活性。结果最佳提取条件为乙醇体积分数50%,料液比1∶50,提取时间1.5 h,总黄酮提取量1 335 mg。X-5型大孔树脂最适合纯化总黄酮,吸附量为12.73 mg/g,解吸率为58.84%,最佳纯化条件为0.3 mg/m L、p H 2~4的粗提物静态吸附24 h,以2 BV/h速率用10%、20%、30%、40%乙醇进行梯度洗脱。纯化后总黄酮对DPPH自由基的清除能力增强,IC50为21μg/m L。结论该工艺稳定可靠,仙草总黄酮纯化后抗氧化活性显著提高。 展开更多

关键词 仙草总黄酮 提取 纯化 抗氧化活性 正交试验 DPPH

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广藿香FPPS重组蛋白表达及互作蛋白筛选分析 被引量：3

11

作者 钟李婷 陈秀珍 +6 位作者 唐云 李俊仁 王小兵 刘彦婷 周璇璇 詹若挺 陈立凯 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期10-15,共6页

对广藿香的法尼基焦磷酸酶(PatFPPS)进行重组蛋白的原核表达,并筛选与之互相作用的蛋白。利用PCR扩增PatFPPS编码区并连接到pGEX-6P-1表达载体,测序验证后将质粒转化BL21(DE3)表达菌株,并用IPTG诱导表达蛋白,最终得到带有GST标签的PatF... 对广藿香的法尼基焦磷酸酶(PatFPPS)进行重组蛋白的原核表达,并筛选与之互相作用的蛋白。利用PCR扩增PatFPPS编码区并连接到pGEX-6P-1表达载体,测序验证后将质粒转化BL21(DE3)表达菌株,并用IPTG诱导表达蛋白,最终得到带有GST标签的PatFPPS融合蛋白。利用GST Pull-Down技术,将GST-PatFPPS融合蛋白分别与广藿香叶片总蛋白进行体外孵育,洗脱得到蛋白复合物,经SDS-PAGE及LC-MS/MS鉴定。结果表明,PatFPPS原核表达体系成功建立,获得纯化重组蛋白,并且筛选得到一些候选PatFPPS互作蛋白。利用优化的原核表达体系,可获得可溶性的PatFPPS蛋白,并鉴定得到与之互作的候选蛋白。 展开更多

关键词 广藿香 蛋白表达 广藿香醇 互作蛋白 茉莉酸甲酯

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岗梅种子生活力测定方法的优化 被引量：8

12

作者 李炎坤 卓一南 +2 位作者 曾湘达 詹若挺 何瑞 《种子》 北大核心 2018年第11期128-131,共4页

以石正、仁居、仁居苗圃3个不同产地的岗梅种子为实验材料,分别用TTC法、BTB法、红墨水染色法进行生活力测定的条件优化,以发芽率评价生活力测定的最佳方法及条件。结果表明,TTC法是岗梅种子测定生活力的最佳方法,最佳条件为1%TTC浓度... 以石正、仁居、仁居苗圃3个不同产地的岗梅种子为实验材料,分别用TTC法、BTB法、红墨水染色法进行生活力测定的条件优化,以发芽率评价生活力测定的最佳方法及条件。结果表明,TTC法是岗梅种子测定生活力的最佳方法,最佳条件为1%TTC浓度于35℃染色9h,该方法较其余2种测定方法更简便、直观可靠。 展开更多

关键词 岗梅种子 生活力 发芽率 TTC法

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氢化物发生—无色散原子荧光分析法进展及在中药微量元素分析中的应用 被引量：5

13

作者 李为理 侯海鸽 +1 位作者 梁克利 董艳萍 《世界科学技术-中医药现代化》 2005年第4期44-48,共5页

根据国内外文献,对氢化物发生—无色散原子荧光分析法的进展进行了评述,列举了该方法应用于中药中砷、汞、铅、镉、锑等微量元素分析的实例,并对HG-AFS分析法在中药分析中的应用前景进行了展望。

关键词 荧光光谱法 重金属 氢化物发生 中药分析 原子荧光分析法 微量元素分析 色散 HG-AFS 方法应用 国内外

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凉粉草DNA条形码通用序列的筛选及其混伪品分子鉴定 被引量：1

14

作者 魏星任 叶清莲 +5 位作者 马新业 龙洁怡 张娇 严萍 詹若挺 陈蔚文 《江苏农业科学》 北大核心 2017年第13期32-35,共4页

提取凉粉草基因组总DNA,使用通用引物扩增核基因ITS1、ITS2序列和叶绿体psbA-trnH、rbcL、matK序列并进行测序,使用CodonCode Aligner软件对完整序列进行拼接并对其进行比对,使用MEGA 7.0邻接法(neighborjoining,NJ)法构建系统聚类树。... 提取凉粉草基因组总DNA,使用通用引物扩增核基因ITS1、ITS2序列和叶绿体psbA-trnH、rbcL、matK序列并进行测序,使用CodonCode Aligner软件对完整序列进行拼接并对其进行比对,使用MEGA 7.0邻接法(neighborjoining,NJ)法构建系统聚类树。结果表明,matK序列扩增成功率低;ITS1序列存在单一变异位点且测序成功率低;ITS2、rbcL和psbA-trnH等3个序列无变异位点,序列扩增成功率、测序成功率高,序列长度在233~671 bp,从系统聚类树上得出ITS2序列可以将凉粉草与其他3种混伪品区分开,而rbcL和psbA-trnH序列在区分时存在一定的混淆。ITS2序列可以考虑作为鉴别凉粉草的优选序列。 展开更多

关键词 凉粉草 DNA条形码 分子鉴定 ITS2 混伪品

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橘红胎商品规格等级评价 被引量：2

15

作者 方媛 杨惠琳 +3 位作者 莫穗芬 袁丽娴 严萍 詹若挺 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期148-154,共7页

目的对橘红胎的性状特征及黄酮类成分进行测定,为制定橘红胎商品规格等级划分提供参考。方法收集54批样品,观察其果实形状特征,测定总黄酮、柚皮苷、野漆树苷、柚皮素含量。通过相关性分析、主成分分析、聚类分析探究橘红胎状特征与其... 目的对橘红胎的性状特征及黄酮类成分进行测定,为制定橘红胎商品规格等级划分提供参考。方法收集54批样品,观察其果实形状特征,测定总黄酮、柚皮苷、野漆树苷、柚皮素含量。通过相关性分析、主成分分析、聚类分析探究橘红胎状特征与其黄酮类成分的相关性。结果K-均值聚类分析可将橘红胎分为一等、二等、三等,其中一等品果实直径<20.00 mm,质量<5.00 g,总黄酮、柚皮苷、柚皮素、野漆树苷含量分别大于38.00%、35.00%、1.12%、0.09%;二等品果实直径20.00~50.00 mm,质量5~25 g,4种成分含量分别为38.00%~30.00%、35.00%~25.00%、1.12%~0.99%、0.09%~0.08%;三等品果实直径>50.00 mm,果实质量>25.00 g,4种成分含量分别为30.00%~10.00%、25.00%~7.49%、0.99%~0.47%、0.08%~0.04%。结论本实验将橘红胎形状特征与黄酮类成分含量相结合,可为该药材商品等级评价提供参考。 展开更多

关键词 橘红胎 商品规格等级 形状特征 黄酮

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青天葵独脚金内酯信号转导关键基因D14的克隆与亚细胞定位分析 被引量：3

16

作者 李炎坤 卓一南 +1 位作者 曾湘达 何瑞 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2019年第3期504-513,共10页

D14基因是独脚金内酯信号转导途径的关键基因,其编码的蛋白能够使SLs释放出活性小分子物质而发挥调节腋芽起始的功能。本研究根据其他物种的D14基因从青天葵转录组数据中筛选获得2条高度同源的片段,命名为NfD14a和NfD14b。应用RT-PCR和R... D14基因是独脚金内酯信号转导途径的关键基因,其编码的蛋白能够使SLs释放出活性小分子物质而发挥调节腋芽起始的功能。本研究根据其他物种的D14基因从青天葵转录组数据中筛选获得2条高度同源的片段,命名为NfD14a和NfD14b。应用RT-PCR和RACE技术,克隆获得NfD14a和NfD14b的cDNA全长序列,GenBank登录号分别为MH028026、MH028027。NfD14a基因全长1206 bp,ORF为861 bp,编码286个氨基酸;NfD14b基因全长1082 bp,ORF为813bp,编码270个氨基酸。对NfD14的编码蛋白序列进行了生物信息学分析,结果表明:NfD14a和NfD14b均属于a/b折叠蛋白水解酶超家族成员(Abhydrolase superfamily),但系统进化分析结果表明两者同源性不高。利用一步快速克隆的方法构建了植物表达载体35S::NfD14a-EGFP和35S::NfD14b-EGFP,并分别获得其工程菌。瞬时表达结果表明,NfD14a和NfD14b均定位在烟草原生质体的细胞核和细胞质。本研究通过对NfD14基因全长cDNA序列的克隆与亚细胞定位分析,为青天葵独脚金内酯信号转导途径调控植物分枝生长发育机制的研究奠定基础。 展开更多

关键词 青天葵 独脚金内酯 D14 RACE克隆

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基于主成分分析的不同产地凉粉草质量评价 被引量：6

17

作者 赖志明 宋晓娟 +5 位作者 魏星任 莫穗芬 卢晓莹 曾唯雅 严萍 詹若挺 《安徽农业科学》 CAS 2022年第10期172-176,共5页

[目的]利用主成分分析法对不同产地的凉粉草中总黄酮、总酚酸、总糖、紫云英苷、迷迭香酸、咖啡酸含量进行评价,验证其含量测定方法。[方法]采用HPLC法测定凉粉草中咖啡酸、迷迭香酸、紫云英苷含量;采用紫外-可见分光光度法测定总黄酮... [目的]利用主成分分析法对不同产地的凉粉草中总黄酮、总酚酸、总糖、紫云英苷、迷迭香酸、咖啡酸含量进行评价,验证其含量测定方法。[方法]采用HPLC法测定凉粉草中咖啡酸、迷迭香酸、紫云英苷含量;采用紫外-可见分光光度法测定总黄酮、总酚酸和总糖的含量;对6个成分含量进行主成分分析,评价不同产地质量差异。[结果]建立的含量测定方法稳定、可靠;主成分分析提取3个成分,累计贡献率87.395%,酚酸类和黄酮类物质对于凉粉草的质量评价有重要贡献。通过综合评分,来自广东平远及福建长汀凉粉草质量较好。[结论]20批不同产地的凉粉草质量具有差异性,且产地距离较近的凉粉草表现出成分含量特征相似性;建立的主成分分析方法可对测定指标进行全面分析,适用于凉粉草质量评价。 展开更多

关键词 凉粉草 不同产地 质量评价 主成分分析

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毛冬青三萜C-28位氧化修饰相关CYP450基因的发掘和功能鉴定 被引量：1

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作者 陈媛媛 赖美红 +2 位作者 贠小芸 王魁 徐晖 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期459-467,共9页

药用植物毛冬青Ilex pubescens Hook.et Arn.含有大量的五环三萜及三萜皂苷,化学结构复杂多样。三萜类化合物骨架的修饰与其生物合成途径下游的一类关键酶——细胞色素P450单加氧酶(CYP450)密切相关。本研究通过分析毛冬青转录组数据,... 药用植物毛冬青Ilex pubescens Hook.et Arn.含有大量的五环三萜及三萜皂苷,化学结构复杂多样。三萜类化合物骨架的修饰与其生物合成途径下游的一类关键酶——细胞色素P450单加氧酶(CYP450)密切相关。本研究通过分析毛冬青转录组数据,筛选到1个可能具有五环三萜C-28位氧化功能的CYP450基因(IpAO2)。克隆IpAO2基因并将其通过质粒转化法导入能高效合成amyrin的酿酒酵母工程菌中,GC-MS分析重组酵母代谢产物,发现IpAO2基因编码的蛋白可以将α-amyrin和β-amyrin分别氧化为熊果酸和齐墩果酸,确定IpAO2是一个五环三萜C-28位氧化酶基因。IpAO2基因的鉴定对全面阐明毛冬青三萜及三萜皂苷的生物合成机制具有重要意义,为后期开展毛冬青活性三萜类化合物的代谢工程研究奠定了基础。 展开更多

关键词 毛冬青 三萜 生物合成 C-28氧化酶 熊果酸 酿酒酵母

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基于植物代谢组学和网络药理学分析预测鸡骨草药材的质量标志物 被引量：7

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作者 徐月阳 史军杰 +3 位作者 彭丽华 方碧烟 陈炜璇 成金乐 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2023年第6期1972-1986,共15页

目的基于植物代谢组学分析鸡骨草药材的次生代谢产物,并结合多元统计学和网络药理学预测分析鸡骨草药材的质量标志物(Q-Marker)。方法建立UPLC-Q-TOF-MS分析方法,分析11批次鸡骨草药材的化学成分,确定其共有成分。通过聚类分析(HCA)、... 目的基于植物代谢组学分析鸡骨草药材的次生代谢产物,并结合多元统计学和网络药理学预测分析鸡骨草药材的质量标志物(Q-Marker)。方法建立UPLC-Q-TOF-MS分析方法,分析11批次鸡骨草药材的化学成分,确定其共有成分。通过聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)确认造成11批次鸡骨草药材分类的主要差异成分,再运用网络药理学构建“核心成分-核心靶点-核心通路”网络,筛选预测鸡骨草药材的潜在Q-Marker,并进行分子对接验证其活性。结果11批次鸡骨草药材中含有39个共有成分,主要为三萜皂苷类、黄酮类、生物碱类等。经聚类分析和主成分分析显示11批次鸡骨草药材分为4类,后经偏最小二乘判别分析发现其中9个化学成分在分类中起重要作用。网络药理学分析结果表明,以上9个成分为活性成分,作用于166个靶点,通过蛋白质互作(PPI)筛选得到29个核心靶点,其中4个化学成分相思子碱、下箴刺桐碱、大豆皂苷Ⅰ、精氨酸与核心靶点的关联度高,结合QMarker理念及分子对接结果,初步预测相思子碱和下箴刺桐碱为鸡骨草药材的Q-Marker。结论利用植物代谢组学结合多元统计学和网络药理学预测分析鸡骨草药材的Q-Marker,为鸡骨草药材的质量控制与评价提供数据参考,为进一步科学开发鸡骨草药材提供研究思路。 展开更多

关键词 鸡骨草药材 质量标志物 植物代谢组学 网络药理学 相思子碱 下箴刺桐碱

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HPLC测定乙肝养阴活血颗粒中芍药苷的含量 被引量：2

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作者 金凤环 周雪梅 杨东才 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1090-1091,共2页

关键词 HPLC法 芍药苷 乙肝养阴活血颗粒

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