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乳铁蛋白胃蛋白酶水解物分离纯化抗菌肽的研究
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作者 张晨玥 郝刚 +2 位作者 蔡寅川 唐善虎 李思宁 《中国调味品》 CAS 北大核心 2022年第10期47-51,72,共6页
文章以乳铁蛋白胃蛋白酶水解液为原料,依次用DA201型大孔吸附树脂、Sephadex G-25、Sephadex G-15凝胶树脂对乳铁蛋白抗菌肽进行分离纯化。结果表明,乳铁蛋白酶解原液抗菌活性为MIC _(E.coli)=0.5 mg/mL和MIC_( S.aureus)=0.5 mg/mL;通... 文章以乳铁蛋白胃蛋白酶水解液为原料,依次用DA201型大孔吸附树脂、Sephadex G-25、Sephadex G-15凝胶树脂对乳铁蛋白抗菌肽进行分离纯化。结果表明,乳铁蛋白酶解原液抗菌活性为MIC _(E.coli)=0.5 mg/mL和MIC_( S.aureus)=0.5 mg/mL;通过大孔吸附树脂的静态吸附、解吸实验,确定分离条件:以85%乙醇溶液为洗脱剂,上样浓度为30 mg/mL,上样流速为2 mL/min,洗脱流速为1 mL/min,分离组分的抑菌活性为MIC _(E.coli)=0.25 mg/mL和MIC _(S.aureus)=0.25 mg/mL。Sephadex G-25凝胶柱分离条件:以去离子水为洗脱剂,洗脱速度为0.25 mL/min,上样浓度为20 mg/mL,上样体积为1 mL,纯化后得到3个主峰,其中组分b的抑菌活性相对较强,MIC _(E.coli)=0.125 mg/mL,MIC _(S.aureus)=0.125 mg/mL。组分b再经Sephadex G-15凝胶过滤色谱分离出2个峰,其中组分b-1具有较强抑菌活性,MIC _(E.coli)=0.125 mg/mL,MIC _(S.aureus)=0.0625 mg/mL。经分离纯化后的乳铁蛋白抗菌肽对E.coli的抗菌活性提高4倍,对S.aureus的抗菌活性提高8倍。 展开更多
关键词 乳铁蛋白 抗菌肽 分离纯化 大孔吸附树脂 葡聚糖凝胶
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天竺葵组织培养研究进展 被引量:2
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作者 蔡寅川 李懿 《福建农业科技》 2015年第3期47-50,共4页
对天竺葵组织培养的研究进展进行了综述,包括外植体的选择、培养基的选择、植物生长调节剂的使用、组培条件、褐化和玻璃化的控制等方面内容,分析了目前天竺葵组织培养中存在的问题,并对天竺葵组织培养发展进行了展望。
关键词 天竺葵 组织培养 研究进展 存在问题 建议
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DA201-C大孔吸附树脂对乳铁蛋白抗菌肽的分离纯化 被引量:1
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作者 张林 蔡寅川 +2 位作者 郝刚 胡婷 蒋思雨 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第22期213-219,共7页
该研究以吸附量、树脂动态吸附和不同乙醇浓度(体积分数)梯度洗脱为考察指标,优化了DA201-C大孔树脂对超滤处理后的乳铁蛋白抗菌肽溶液(分子质量<3000 Da)分离纯化的工艺条件。静态吸附结果表明,当树脂吸附12 h后,吸附量为479.7 mg/... 该研究以吸附量、树脂动态吸附和不同乙醇浓度(体积分数)梯度洗脱为考察指标,优化了DA201-C大孔树脂对超滤处理后的乳铁蛋白抗菌肽溶液(分子质量<3000 Da)分离纯化的工艺条件。静态吸附结果表明,当树脂吸附12 h后,吸附量为479.7 mg/g、吸附率为95.94%;对吸附饱和的树脂使用不同浓度的乙醇静态解吸,结果显示,75%(体积分数)乙醇解吸率达到95.35%。该研究还确定了最优吸附条件:NaCl浓度0.6 mol/L、上样流速1.5 mL/min和上样质量浓度20 mg/mL。以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抑菌率为指标,用不同浓度乙醇对乳铁蛋白抗菌肽进行梯度洗脱,结果表明,75%乙醇洗脱组分抑菌活性最强,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌率分别达到80.95%和74.42%,与未纯化前相比提高了12.2%左右。对不同洗脱组分的氨基酸分析,结果显示,抗菌肽的疏水性及正电荷性越大,抗菌活性越强。 展开更多
关键词 乳铁蛋白 抗菌肽 大孔吸附树脂 超滤 分离纯化
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月桂酰精氨酸乙酯的抗菌活性及对牦牛鲜肉肠贮藏品质的影响 被引量:3
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作者 彭美玲 郝刚 +2 位作者 唐善虎 李思宁 蔡寅川 《中国调味品》 CAS 北大核心 2022年第8期51-56,共6页
该研究考察了月桂酰精氨酸乙酯(LAE)的抗菌保鲜活性,得出其对大肠杆菌、绿脓杆菌、弗氏柠檬酸杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、英诺克李斯特菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉的最低抑菌浓度(MIC)分别为32,32,64,32,16,16,8,... 该研究考察了月桂酰精氨酸乙酯(LAE)的抗菌保鲜活性,得出其对大肠杆菌、绿脓杆菌、弗氏柠檬酸杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、英诺克李斯特菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉的最低抑菌浓度(MIC)分别为32,32,64,32,16,16,8,16,32μg/mL。将LAE单独及与乳酸链球菌素(Nisin)、壳聚糖(CS)复配用于牦牛鲜肉肠的保鲜,考察15 d贮藏期内肉肠色差(亮度值L^(*)、红度值a^(*)、黄度值b^(*))、持水性、硫代巴比妥酸值、酸价的变化。结果显示保鲜效果为:对照<LAE(0.1 g/kg)<LAE(0.3 g/kg)<LAE+Nisin<LAE+CS<LAE+CS+Nisin(P<0.05)。最优保鲜配方为0.2 g/kg LAE+5 g/kg CS+0.3 g/kg Nisin,在贮藏15 d时其酸价、红度值、亮度值、硫代巴比妥酸分别为0.423 mg/g、10.86 mg/g、39.05 mg/g、0.702 mg/kg,第15天时仍保持良好品质。结果表明LAE及其复配保鲜可显著抑制牦牛鲜肉肠脂肪氧化酸败,保证肉肠品质,延长贮藏期。 展开更多
关键词 牦牛鲜肉肠 月桂酰精氨酸乙酯 壳聚糖 乳酸链球菌素 抗菌活性
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鮰鱼蛋白ACE抑制肽的酶法制备及分离纯化 被引量:7
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作者 李佳伶 关诗琦 +2 位作者 蒋思雨 蔡寅川 郝刚 《中国调味品》 CAS 北大核心 2023年第9期69-74,93,共7页
以脱脂后的鮰鱼肉为原料,采用分步酶解法制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽,通过正交试验优化酶解条件。最佳酶解工艺:调节pH为8,温度为37℃,底物浓度为0.17 g/mL,先加胰蛋白酶,酶活/底物量为6 U/mg,水解1 h后再调节pH为9,温度为55℃,再... 以脱脂后的鮰鱼肉为原料,采用分步酶解法制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽,通过正交试验优化酶解条件。最佳酶解工艺:调节pH为8,温度为37℃,底物浓度为0.17 g/mL,先加胰蛋白酶,酶活/底物量为6 U/mg,水解1 h后再调节pH为9,温度为55℃,再加入碱性蛋白酶,酶活/底物量为6 U/mg,水解4 h。在此条件下,鮰鱼肉蛋白水解度为12.63%,酶解液ACE抑制率为18.7%。分子量分布分析发现酶解产物分子量主要分布在500 Da以下,占多肽的98.23%。酶解产物经超滤(3 000 Da)分离后ACE抑制率提高至35.4%,再用DA201-C大孔吸附树脂脱盐后ACE抑制率为56.6%,最后用葡聚糖凝胶G-15柱层析进行纯化后得到3个组分,组分G2的ACE抑制率为66.9%。经过分离纯化后的ACE抑制肽活性相比原酶解液提高了3.6倍。 展开更多
关键词 鮰鱼 ACE抑制肽 酶解 分子量分布 分离纯化
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抗菌肽TachyplesinⅠ的分子设计、结构与活性分析 被引量:2
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作者 孙栋 蔡寅川 +2 位作者 蒋思雨 李璇 郝刚 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1905-1913,共9页
本研究旨在抗菌肽TachyplesinⅠ(TPⅠ)的结构活性基础上,重新设计一种全新的抗菌肽TPⅠ-Y4。保持母肽链长与电荷数不变,将序列中形成TPⅠ两个二硫键的4个半胱氨酸用酪氨酸进行替换后得到TPⅠ-Y4。经生物信息学软件分析,与TPⅠ相比,TPⅠ... 本研究旨在抗菌肽TachyplesinⅠ(TPⅠ)的结构活性基础上,重新设计一种全新的抗菌肽TPⅠ-Y4。保持母肽链长与电荷数不变,将序列中形成TPⅠ两个二硫键的4个半胱氨酸用酪氨酸进行替换后得到TPⅠ-Y4。经生物信息学软件分析,与TPⅠ相比,TPⅠ-Y4的热稳定性更好,亲水性更强,同时具有与母肽相似的结构与抗菌活性。化学合成后经圆二色谱检测发现,TPⅠ-Y4在水相及在模拟细胞膜疏水环境的50%三氟乙醇中都表现出β-折叠结构,疏水环境中TPⅠ-Y4的β-折叠含量高于水相,也高于不同环境中的TPⅠ。抑菌试验表明,TPⅠ-Y4对细菌和真菌都有较强抑菌活性,且对细菌的抑菌活性强于TPⅠ。TPⅠ-Y4对小鼠红细胞溶血性降低,并保留了很强的内毒素中和能力,浓度为40μg·mL^(-1)时中和率可达50%以上。TPⅠ-Y4抗菌活性的提高以及溶血活性的降低,可能与β-折叠强形成者酪氨酸的替代有关,进而导致抗菌肽分子中β-折叠结构增强。 展开更多
关键词 抗菌肽 TachyplesinⅠ 分子设计 圆二色谱 抑菌活性
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