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利用流式细胞仪建立牦牛X、Y精子分选体系的研究 被引量:6
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作者 熊显荣 张雁 +5 位作者 熊燕 闵星宇 吴锦波 郝振宇 张贺 李键 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期399-407,共9页
旨在探索与优化牦牛精子分选条件,建立高效的牦牛X、Y精子分选技术体系。本研究制备了牦牛精液细胞悬液,采用不同量的DNA染料Hoechst33342和诱惑红共孵育精子细胞。利用流式细胞仪分选牦牛X、Y精子,通过比较分选效率、分选后精子活力及... 旨在探索与优化牦牛精子分选条件,建立高效的牦牛X、Y精子分选技术体系。本研究制备了牦牛精液细胞悬液,采用不同量的DNA染料Hoechst33342和诱惑红共孵育精子细胞。利用流式细胞仪分选牦牛X、Y精子,通过比较分选效率、分选后精子活力及发育潜能,优化分选条件。运用RT-PCR检测分选精子的纯度,利用精子分析系统检测分选后精子的活力。将分选后的精子与体外成熟的卵母细胞进行体外受精,统计分选后精子的发育潜力,并采用SRY片段的PCR法检测早期胚胎的性别。结果显示,10μL Hoechst33342染色40 min后的分选效果最佳,其分选产物的准确度和分选效率显著优于其他组,分选后的X、Y精子活力与20μL Hoechest33342染色20 min组相当,显著高于其他组(P<0.05)。添加5μmol·L^-1的诱惑红对分选的纯度无显著影响(P>0.05),但能显著提高分选后精子的活力(P<0.05)。分选后X、Y精子分别与卵母细胞进行体外受精,受精率和囊胚形成率与未分选组差异不显著(P>0.05),且胚胎性别比例与分选后精子纯度吻合。综上,本研究建立并优化了流式细胞仪分选牦牛X、Y精子的方法,添加诱惑红有助于改善分选后牦牛精子的活力,为后期牦牛性控精液的制备及生产奠定了基础。 展开更多
关键词 牦牛 流式细胞仪 分选 精子活力 胚胎性别
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影响牦牛种间杂交受胎率的免疫学因素 被引量:1
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作者 何世明 吴贤智 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2000年第1期4-6,共3页
普通牛(冻精)与牦牛种间杂交表现的低受胎率不仅与参配母牦牛的质量,饲养管理,冻精品质,输配技术以及某些生殖器官疾患等因素有关,而且涉及免疫学因素,即存在免疫不孕。研究结果表明:黑白花公牛精液经人工授精多次注入母牦牛生... 普通牛(冻精)与牦牛种间杂交表现的低受胎率不仅与参配母牦牛的质量,饲养管理,冻精品质,输配技术以及某些生殖器官疾患等因素有关,而且涉及免疫学因素,即存在免疫不孕。研究结果表明:黑白花公牛精液经人工授精多次注入母牦牛生殖道内,能使母耗牛机体产生精子免疫应答;精子抗原存在于精子的头部和尾部;精子免疫以体液免疫反应为主,精子抗体的产生致精子再次进入生殖道时知活甚至凝集,使精子难以上行和受精。 展开更多
关键词 牦牛 种间杂交 受胎率 免疫学 杂交
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免疫技术提高牦牛种间杂交受胎率 被引量:1
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作者 何世明 余忠华 +2 位作者 冯吉安 王蓉芳 吴贤智 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2000年第2期8-10,共3页
用黑白花公牛精液经皮下注射家兔或牦牛犊,均可获得较高滴度的血清精子抗体;用分离纯化获得的精子抗体(IgG)强化免疫异种或同种家畜可获得血清精子抗抗体。精子抗体和精子抗抗体均具有较强的专一性。用精子抗体和精子抗抗体分别进行主... 用黑白花公牛精液经皮下注射家兔或牦牛犊,均可获得较高滴度的血清精子抗体;用分离纯化获得的精子抗体(IgG)强化免疫异种或同种家畜可获得血清精子抗抗体。精子抗体和精子抗抗体均具有较强的专一性。用精子抗体和精子抗抗体分别进行主动免疫或被动免疫防治母牦牛免疫不孕能显著提高牦牛种间杂交的受胎率(分别提高27.95%和22.21%),获得显著的经济效益。 展开更多
关键词 牦牛 种间杂交 肥胎率 免疫技术
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