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芹菜素对糖尿病肾病小鼠肾损伤的保护作用 被引量:2
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作者 覃春美 李刚 +2 位作者 卢华 王茜茜 赵艳 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2048-2052,共5页
目的探讨芹菜素对糖尿病肾病(DKD)小鼠肾损伤的保护作用。方法体内实验,通过高脂饮食联合链脲佐菌素腹腔注射建立DKD小鼠模型并分为模型组、芹菜素组,同时设正常组,芹菜素组灌胃给予50 mg/kg芹菜素干预8周后处死小鼠,检测小鼠尿白蛋白... 目的探讨芹菜素对糖尿病肾病(DKD)小鼠肾损伤的保护作用。方法体内实验,通过高脂饮食联合链脲佐菌素腹腔注射建立DKD小鼠模型并分为模型组、芹菜素组,同时设正常组,芹菜素组灌胃给予50 mg/kg芹菜素干预8周后处死小鼠,检测小鼠尿白蛋白肌酐比(UACR)、空腹血糖(FBG)、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)和总胆固醇(TC)水平,采用HE、PAS及Masson染色观察小鼠肾脏组织病理改变,ELISA法检测肾组织炎症因子TNF-α和IL-6水平,免疫组化检测肾组织Sirt6及Nrf2表达情况,Western blot法检测肾组织Sirt6、Nrf2、TNF-α和IL-6蛋白表达。体外实验,人肾小球内皮细胞分为对照组、高糖组、si-Sirt6组、芹菜素组、芹菜素+si-Sirt6组,Western blot法检测细胞Sirt6、Nrf2、TNF-α和IL-6蛋白表达。结果动物实验结果显示,与模型组比较,芹菜素组小鼠UACR、FBG、SCr、BUN和TC水平均降低(P<0.05),肾组织病理损伤减轻;肾组织Sirt6、Nrf2蛋白表达升高(P<0.05),TNF-α、IL-6表达降低(P<0.05)。细胞实验结果显示,与模型组比较,芹菜素组Sirt6、Nrf2蛋白表达升高(P<0.05),TNF-α、IL-6蛋白表达降低(P<0.05),而沉默Sirt6可逆转芹菜素对高糖诱导的Nrf2表达及炎性损伤的作用(P<0.05)。结论芹菜素可通过靶向Sirt6/Nrf2信号通路,改善DKD肾小球内皮细胞炎性损伤。 展开更多
关键词 芹菜素 糖尿病肾病 肾小球内皮细胞 Sirt6 NRF2
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重组真核表达载体pEGFP-N1/PDGF-A的构建及真皮干细胞的转染 被引量:6
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作者 闫国和 粟永萍 +5 位作者 王军平 汪代杰 艾国平 王锋超 冉新泽 程天民 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第20期2005-2008,共4页
目的克隆血小板衍生生长因子A链(plateletderivedgrowthfactorAchain,PDGFA)基因,以增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)载体pEGFPN1为骨架,携带PDGFA基因进入真皮间充质干细胞(dermisdrivedmesenchymalstemcells... 目的克隆血小板衍生生长因子A链(plateletderivedgrowthfactorAchain,PDGFA)基因,以增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)载体pEGFPN1为骨架,携带PDGFA基因进入真皮间充质干细胞(dermisdrivedmesenchymalstemcells,DMSCs),为采用转入PDGFA基因的DMSCs修复创面奠定基础。方法采用RTPCR二步分离法,以人肝癌细胞系(SMC7721)的总RNA为模板,扩增PDGFA基因的全长cDNA编码序列,克隆入载体pMD18T,随后又将PDGFA基因亚克隆入pEGFPN1载体中,构建PDGFA基因的真核表达载体pEGFPN1/PDGFA,并采用Fugene6介导转染技术将PDGFA基因导入DMSCs。结果克隆到PDGFA基因的全长cDNA序列,经测序验证,其序列与GenBank所报告的该基因的序列完全一致。结论成功地将PDGFA基因克隆到pEGFPN1载体中,并实现了PDGFA基因在DMSCs的表达。 展开更多
关键词 克隆 真核表达载体 血小板衍生生长因子A链基因 绿色荧光蛋白 真皮间充质干细胞
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