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干扰miR-29a抑制氧糖剥夺/复氧诱导的大鼠H9c2心肌细胞线粒体融合与分裂 被引量:3
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作者 熊霞霞 熊卫平 +3 位作者 李林沅 杜娟 王道庄 王旭 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期998-1004,共7页
目的探讨干扰miR-29a对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的心肌细胞线粒体融合与分裂的影响。方法将H9c2细胞分为正常对照组、模型组、阴性对照组和miR-29a干扰组。采用OGD/R法诱导大鼠H9c2心肌细胞损伤模型,阴性对照组细胞转染anti-NC,miR-29... 目的探讨干扰miR-29a对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的心肌细胞线粒体融合与分裂的影响。方法将H9c2细胞分为正常对照组、模型组、阴性对照组和miR-29a干扰组。采用OGD/R法诱导大鼠H9c2心肌细胞损伤模型,阴性对照组细胞转染anti-NC,miR-29a干扰组转染anti-miR-29a,正常对照组细胞不转染。反转录PCR检测miR-29a干扰效率,CCK-8法检测细胞增殖倍数,流式细胞术检测细胞凋亡率和线粒体膜电位变化,试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)含量,Western blot法检测Bcl2相关X蛋白(BAX)、Bcl2拮抗剂/杀伤因子(BAK)、胱天蛋白酶9(caspase-9)、线粒体分裂蛋白1(Fis1)、线粒体融合蛋白1(Mfn1)、线粒体融合蛋白2(Mfn2)、视神经萎缩蛋白1(OPA1)、磷酸化的胞外信号调节激酶(p-ERK)和磷酸化的线粒体动力蛋白相关蛋白(p-Drp1)水平。结果与OGD/R组比较,anti-miR-29a处理的OGD/R组H9c2细胞miR-29a表达水平显著降低,细胞增殖倍数显著增高,细胞凋亡率显著降低,SOD含量增高,MDA和LDH含量降低,线粒体膜电位显著增高,BAX、BAK、caspase-9、Fis1、Mfn1、Mfn2、OPA1、p-ERK和p-Drp1蛋白水平均显著降低。结论干扰miR-29a表达可促进OGD/R诱导的H9c2细胞增殖,抑制细胞凋亡,降低线粒体氧化应激水平及增强线粒体膜电位,抑制心肌细胞线粒体过度融合与分裂。 展开更多
关键词 miR-29a H9C2心肌细胞 线粒体融合 线粒体分裂
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