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蟾酥对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响及其机制 被引量:10
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作者 冯静 邓菲 +2 位作者 张萍 张允 段华 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期340-343,353,共5页
目的研究蟾酥对肝癌Hep G2细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法采用细胞活性CCK-8法检测蟾酥对肝癌细胞增殖的影响;采用Hoechst 33258染色技术观察蟾酥对细胞核型的影响,并用流式双染法检测其凋亡情况;采用Rhodamine 123染色法在流... 目的研究蟾酥对肝癌Hep G2细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法采用细胞活性CCK-8法检测蟾酥对肝癌细胞增殖的影响;采用Hoechst 33258染色技术观察蟾酥对细胞核型的影响,并用流式双染法检测其凋亡情况;采用Rhodamine 123染色法在流式细胞仪中检测蟾酥对线粒体膜电位的影响;利用凋亡因子caspase 8/9/3的特异性抑制剂预处理细胞,然后检测蟾酥对细胞活性的影响。结果细胞活性检测结果发现,蟾酥对肝癌细胞的杀伤作用具有明显的时间和浓度依赖性。共聚焦显微镜观察发现蟾酥能够明显引起细胞核皱缩,并形成凋亡小体。20μg/m L蟾酥处理24 h后导致56.4%的细胞凋亡,并引起细胞线粒体膜电位下降51.9%。Caspase 9和caspase 3的抑制剂预处理细胞后,相比单独蟾酥处理的细胞,明显引起细胞活性的上升。结论蟾酥能明显抑制肝癌Hep G2细胞增殖,并促进其凋亡。凋亡机制与诱发线粒体膜电位下降及活化caspase 9/3分子有关。 展开更多
关键词 蟾酥 凋亡 肝癌 HEP G2细胞 线粒体膜电位 CASPASE 8/9/3
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c-Myc调控PIK3R3抑制黑色素瘤B16-F10细胞的迁移和侵袭 被引量:6
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作者 杨镓宁 邓菲 潘宁 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期66-71,共6页
目的:探讨c-Myc调控PIK3R3对黑色素瘤B16-F10细胞的迁移和侵袭的影响。方法:运用免疫组化检测PIK3R3在正常皮肤组织和黑色素瘤组织的表达;检测慢病毒(LV3-c-Myc和LV3-PIK3R3)对c-Myc和PIK3R3基因的沉默效率;使用Ed U增殖实验检测沉默c-... 目的:探讨c-Myc调控PIK3R3对黑色素瘤B16-F10细胞的迁移和侵袭的影响。方法:运用免疫组化检测PIK3R3在正常皮肤组织和黑色素瘤组织的表达;检测慢病毒(LV3-c-Myc和LV3-PIK3R3)对c-Myc和PIK3R3基因的沉默效率;使用Ed U增殖实验检测沉默c-Myc和PIK3R3后黑色素瘤细胞株B16-F10的增殖情况;Transwell侵袭实验检测c-Myc和PIK3R3的表达对黑色素瘤细胞B16-F10的侵袭能力的影响;划痕实验检测c-Myc和PIK3R3的表达对黑色素瘤细胞B16-F10迁移能力的影响;q PCR检测沉默c-Myc和PIK3R3后miR-199a的表达;q PCR检测转染miR-199a mimics和miR-199a inhibitor后c-Myc和PIK3R3的表达;双荧光素酶报告基因系统检测miR-199a对c-Myc和PIK3R3转录活性的影响。结果:和正常皮肤组织比较,PIK3R3在黑色素瘤组织中表达明显增加;沉默c-Myc和PIK3R3基因后,黑色素瘤细胞株B16-F10的增殖、侵袭和转移能力明显降低;沉默c-Myc和PIK3R3基因后,miR-199a表达上调;转染miR-199a mimics后,c-Myc和PIK3R3表达降低;转染miR-199a inhibitor后,c-Myc和PIK3R3表达上调;双荧光素酶报告基因系统检测结果显示,miR-199a可以直接调控c-Myc和PIK3R3的转录活性。结论:c-Myc可以通过miR-199a调控PIK3R3的表达,从而促进黑色素瘤细胞的增殖、侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 miR-199a C-MYC 黑色素瘤 WESTERN BLOT TRANSWELL 划痕实验 PIK3R3
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祛风活络法辨证治疗分水岭脑梗死恢复期临床观察 被引量:3
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作者 冯静 邓菲 +2 位作者 张萍 张允 段华 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2016年第2期341-344,共4页
目的:研究祛风活络法对分水岭脑梗死患者恢复期神经功能恢复的疗效、血液流变学及动力学的影响。方法:62例分水岭脑梗死恢复期患者按排列表随机分为对照组30例和观察组32例。两组均按常规抗血小板聚集,降脂稳定斑块等基础治疗。观察组... 目的:研究祛风活络法对分水岭脑梗死患者恢复期神经功能恢复的疗效、血液流变学及动力学的影响。方法:62例分水岭脑梗死恢复期患者按排列表随机分为对照组30例和观察组32例。两组均按常规抗血小板聚集,降脂稳定斑块等基础治疗。观察组以祛风活络法进行辨证论治。汤药1剂/d。两组疗程均为4周。治疗前后进行中医证候疗效、神经功能缺损程度(NIHSS)评分、经颅超声多普勒(TCD)检查各项指标的变化、血液流变学、血脂三项、纤维蛋白原水平检测。结果:观察组中医证候疗效总有效率为93.75%,显著优于对照组的73.33%(P<0.01);治疗后观察组NIHSS评分低于对照组(P<0.01);治疗后观察组甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、血流变(高切、血浆黏度)、纤维蛋白原(FIB)改善优于对照组(P<0.05);治疗后TCD血流速度改善优于对照组(P<0.05)。结论:祛风活络法辨证治疗分水岭脑梗死恢复期能促进患者中医证候改善,神经缺损功能的恢复,其作用机制可能改善患者血液高凝状态,优化颅内动脉系统血流速度有关。 展开更多
关键词 分水岭脑梗死 恢复期 祛风活络法 血液流变性 TCD
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多酚氧化酶抑制剂高良姜素抗黑色素瘤机制研究 被引量:2
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作者 杨镓宁 邓菲 潘宁 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1000-1004,共5页
目的:研究高良姜素对多酚氧化酶(PPO)的抑制作用机制,并探讨了高良姜素与多酚氧化酶的结合机制,以期获得高良姜素抗人恶性黑色素瘤细胞株A375机理。方法:分光光度法检测高良姜素对PPO的抑制作用和抑制作用类型;荧光光谱法和分子对接法... 目的:研究高良姜素对多酚氧化酶(PPO)的抑制作用机制,并探讨了高良姜素与多酚氧化酶的结合机制,以期获得高良姜素抗人恶性黑色素瘤细胞株A375机理。方法:分光光度法检测高良姜素对PPO的抑制作用和抑制作用类型;荧光光谱法和分子对接法检测高良姜素与PPO酶的结合方式;MTT法测定高良姜素人恶性黑色素瘤细胞株A375增殖的抑制作用,Transwell法检测高良姜素对A375细胞侵袭的抑制作用。结果:高良姜素是一种竞争型的PPO抑制剂,对PPO氧化酶的半抑制率IC_(50)为(47.86±3.33)μmol/L,抑制常数Ki为(24.83±1.45)μmol/L;高良姜素能够有效猝灭PPO的荧光,高良姜素与PPO的结合常数Ka为(4.67±0.43)×10~4L/mol;高良姜素能够与PPO的活性中心铜离子发生结合作用,并与催化基团His259形成氢键;高良姜素能够明显的抑制A375细胞的增殖和转移,且细胞中的PPO活性和黑色素的合成量降低。结论:高良姜素是一个竞争性的PPO酶抑制剂,对调节黑色素水平起到重要作用,为临床抗皮肤癌提供了理论基础。 展开更多
关键词 高良姜素 多酚氧化酶 抑制作用 荧光光谱 螯合金属铜离子 人恶性黑色素瘤细胞株A375 凋亡
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淫羊藿苷介导Nrf2/HO-1信号通路减轻大鼠肾缺血再灌注损伤和氧化应激 被引量:20
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作者 牟俊杰 冯静 +6 位作者 张文松 关欣 陈琴 蒋飞飞 甘措 刘瑶 邓菲 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第3期449-453,457,共6页
目的探究淫羊藿苷对肾缺血再灌注大鼠病理损伤和氧化应激的影响。方法建立肾缺血再灌注大鼠模型,将大鼠随机分为5组:Control组、RIRI组、RIRI+icariin 25 mg/kg组、RIRI+icariin 50 mg/kg组和RIRI+icariin 100 mg/kg组进行后续实验。试... 目的探究淫羊藿苷对肾缺血再灌注大鼠病理损伤和氧化应激的影响。方法建立肾缺血再灌注大鼠模型,将大鼠随机分为5组:Control组、RIRI组、RIRI+icariin 25 mg/kg组、RIRI+icariin 50 mg/kg组和RIRI+icariin 100 mg/kg组进行后续实验。试剂盒检测蛋白尿、血清肌酐、尿素氮水平;HE染色检测病理损伤程度;ELISA检测外周血和肾组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素-10(IL-10)含量;试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)含量;Western blot检测Caspase-3、Caspase-9、Bax、Bcl-2、Nrf2、p-Nrf2、HO-1蛋白表达水平。结果与Control组比较,RIRI组大鼠蛋白尿、血清肌酐、尿素氮水平升高(P<0.05),呈现明显肾缺血再灌注损伤;cleaved Caspase-3/Caspase-3、cleaved Caspase-9/Caspase-9、Bax/Bcl-2比值升高(P<0.05);外周血和肾组织中iNOS、IL-10含量升高(P<0.05);SOD、GSH含量降低(P<0.05);p-Nrf2/Nrf2比值和HO-1蛋白水平降低(P<0.05)。与RIRI组比较,RIRI+icariin 50、100 mg/kg组大鼠蛋白尿、血清肌酐、尿素氮水平降低(P<0.05),病理损伤程度明显改善,cleaved Caspase-3/Caspase-3、cleaved Caspase-9/Caspase-9、Bax/Bcl-2比值降低(P<0.05),iNOS含量降低(P<0.05),IL-10含量升高(P<0.05),SOD、GSH含量升高(P<0.05)p-Nrf2/Nrf2比值和HO-1蛋白水平升高(P<0.05)。结论淫羊藿苷通过介导Nrf2/HO-1信号通路减轻大鼠肾缺血再灌注损伤和氧化应激。 展开更多
关键词 肾缺血再灌注 淫羊藿苷 氧化应激 Nrf2/HO-1信号通路
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