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题名黑色素瘤SENP1蛋白质参与达卡巴嗪耐药性的探究
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作者
赵蓓
施小琪
唐雪梅
程石
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机构
四川省医学科学院·四川省人民医院(电子科技大学附属医院)皮肤科(皮肤病性病研究所)
成都中医药大学医学与生命科学学院
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出处
《首都医科大学学报》
CAS
北大核心
2024年第1期97-103,共7页
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基金
四川省自然科学基金青年项目(2023NSFSC1549)
四川省干部保健科研项目(川干研2023-218)
四川省医学青年创新科研课题计划(Q21043)。
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文摘
目的探究与黑色素瘤耐药性相关的基因及信号通路,揭示其与黑色素瘤耐药性的相关性。方法以A375及M14黑色素瘤细胞为研究对象,通过逐渐提高达卡巴嗪(dacarbazine,DTIC)的浓度获得耐药性黑色素瘤细胞株,采用转录物组学研究耐药性黑色素瘤细胞系中显著性变化的基因及通路,利用实时荧光定量聚合酶链反应(real time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)、蛋白质杂交(Western blotting,WB)等对变化的基因进行验证。结果(1)成功构建了黑色素瘤耐药细胞株:通过DTIC小剂量逐步增加的方法成功建立了耐药型的黑色素瘤细胞系A375与M14,通过计算其对DTIC的半抑制浓度值(the half maximal inhibitory concentration,IC50),确定了细胞对DTIC的敏感性发生了显著的变化;通过流式细胞技术检测,发现耐药的黑色素瘤细胞具有显著抗DTIC引发的凋亡的能力。(2)发现了黑色素瘤耐药性相关的基因及信号通路:利用建立的耐DTIC的黑色素瘤细胞系,进行了全基因组转录测序和分析,发现了类泛素特异性蛋白酶1(SUMO-specific protease 1,SENP1)的高表达和蛋白激酶Hippo信号通路的异常活化相关。(3)SENP1异常表达可能参与DTIC耐药:WB检测野生型和耐药型黑色素瘤细胞系发现在耐药的细胞中,SENP1与YAP表达都上调。(4)通过基因敲除证实SENP1参与DTIC耐药,蛋白质相互作用实验初步证实SENP1对YAP存在去泛素化调控作用。结论SENP1与DTIC耐药性存在正相关关系,其异常上调可能导致Hippo信号通路发生变化使得黑色素瘤对DTIC耐受性的提升。
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关键词
黑色素瘤
耐药性
转录物组学
类泛素特异性蛋白酶
Hippo信号通路
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Keywords
melanoma
drug resistance
transcriptome
Ubiquitin-like specific proteases
Hippo signaling pathway
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分类号
R751
[医药卫生—皮肤病学与性病学]
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