为了解云南重楼(Paris polyphylla var. yunnanensis) ITS序列的单核苷酸多态性(SNP)特征与其甾体皂苷构成特征的相关性,并探讨其对药材质量稳定性的影响,利用MegAlign软件对37份云南重楼样本的ITS序列进行对比,根据SNP位点进行分型;采...为了解云南重楼(Paris polyphylla var. yunnanensis) ITS序列的单核苷酸多态性(SNP)特征与其甾体皂苷构成特征的相关性,并探讨其对药材质量稳定性的影响,利用MegAlign软件对37份云南重楼样本的ITS序列进行对比,根据SNP位点进行分型;采用HPLC法测定7种甾体皂苷成分(重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、H和薯蓣皂苷);用SPSS 25.0软件和SIMCA-P15.0软件对各基因型甾体皂苷构成特征进行统计分析。结果表明,云南重楼ITS序列存在40个双等位多态性位点,其中碱基转换32个,碱基颠换8个,根据SNP特征可划分为2类基因型YN-Ⅰ和YN-Ⅱ。6种甾体皂苷(重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ、H、薯蓣皂苷)在云南重楼广泛分布,而重楼皂苷Ⅴ稀少。YN-Ⅰ和YN-Ⅱ的药典指标成分总含量分别为1.070%和0.93%,样本合格率分别为68.42%和77.78%;YN-Ⅰ的甾体皂苷总含量为1.65%,YN-Ⅱ为1.32%。方差分析表明,2类基因型的甾体皂苷特征存在一定程度的区别,但药典指标成分无显著差异,药材应该具有等效性。聚类分析和主成分分析表明,YN-Ⅰ的离散度更高,YN-Ⅱ的聚集度更好,表明YN-Ⅱ的药材质量更加稳定,植株个体的甾体皂苷合成和累积差异更小,YN-Ⅱ的SNP特征对云南重楼良种选育的分子遗传标记筛选具有重要意义。展开更多
目的建立一测多评法同时测定枇杷叶标准汤剂(枇杷叶)中3种绿原酸的含量。方法该药物50%甲醇提取液的分析采用Agilent 5 HC C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm);流动相乙腈-0.4%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温35℃;检测波长...目的建立一测多评法同时测定枇杷叶标准汤剂(枇杷叶)中3种绿原酸的含量。方法该药物50%甲醇提取液的分析采用Agilent 5 HC C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm);流动相乙腈-0.4%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温35℃;检测波长327 nm。以绿原酸为内标,建立新绿原酸、隐绿原酸的相对校正因子,测定其含量。结果绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸在各自范围内线性关系良好(r>0.999 6),平均加样回收率97.22%~97.66%,RSD 1.16%~1.85%。一测多评法所得结果与外标法接近。结论该方法简便可靠,耐用性好,可用于枇杷叶标准汤剂的质量控制。展开更多