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核糖体工程技术选育米尔贝霉素高产菌株
被引量：
5
1
作者
鲁凤娟
侯燕燕
+4 位作者
李晓广
何林凌
褚以文
夏海洋
田永强
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
2018年第7期811-816,共6页
本实验室中保存的一株从土壤中分离得到的米尔贝链霉菌(Streptomyces milbemycinicus)27号菌株所产米尔贝霉素A3和A4的初始产量分别为61.0和23.8μg/m L。以该菌株为出发菌株,采用核糖体工程技术,结合紫外诱变技术,对米尔贝霉素产生菌...
本实验室中保存的一株从土壤中分离得到的米尔贝链霉菌(Streptomyces milbemycinicus)27号菌株所产米尔贝霉素A3和A4的初始产量分别为61.0和23.8μg/m L。以该菌株为出发菌株,采用核糖体工程技术,结合紫外诱变技术,对米尔贝霉素产生菌米尔贝链霉菌进行诱变,并以链霉素耐受为筛选压力进行筛选。经过诱变后对单菌落进行摇瓶复筛,其中正突变株中米尔贝霉素产量最高的菌株编号是R2-6-5,其米尔贝霉素A3和A4的产量分别是105.2和38.8μg/m L,较原始菌株分别提高了72.5%和63.3%,且遗传稳定。最后,对产量变化较大的11株突变株基因组中rsm G基因和rsp L基因进行突变位点分析,发现在rsp L基因内均未发生突变,rsm G基因均发生突变。本研究表明,链霉素抗性降低的突变菌株确实都在相关基因内发生突变,且核糖体工程结合紫外诱变的诱变方式效果良好,能够快速有效的提高米尔贝链霉菌生物合成米尔贝霉素的能力。
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关键词
核糖体工程
复合诱变
链霉素
米尔贝霉素
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职称材料
一株具有抗菌活性耐盐芽孢杆菌B-11的分离鉴定及发酵工艺优化
被引量：
2
2
作者
张帅
邱鹏
+4 位作者
龙秀锋
侯燕燕
鲁凤娟
张鹤铭
田永强
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第7期531-537,540,共8页
目的旨在从盐碱土壤中分离获得一株耐盐细菌B-11,对其进行分类鉴定及抗菌活性优化及抗菌特性研究。方法基于形态学分析和16S rRNA基因序列对菌株进行分类鉴定。以金黄色葡萄球菌为指示菌,采用双层平板法对菌株B-11发酵液特性进行研究,...
目的旨在从盐碱土壤中分离获得一株耐盐细菌B-11,对其进行分类鉴定及抗菌活性优化及抗菌特性研究。方法基于形态学分析和16S rRNA基因序列对菌株进行分类鉴定。以金黄色葡萄球菌为指示菌,采用双层平板法对菌株B-11发酵液特性进行研究,并通过发酵培养基的正交优化试验,获得菌株产抗菌活性物质最佳的发酵培养条件。通过对菌株B-11基因组次级代谢产物合成基因的分析,研究其基因组上的功能基因。结果结合形态学和分子鉴定表明该菌为Bacillus属成员,在0-4%的Na Cl浓度范围内生长良好,为耐盐细菌。该细菌发酵上清液对蛋白酶K和链霉蛋白酶敏感,对pH、温度和紫外光具有良好的耐受性。通过正交优化得到菌株B-11最适发酵条件为:可溶性淀粉15g/L,黄豆粉15g/L,NaCl 15g/L,p H为自然pH,接种量为1.5%,发酵温度为34℃或37℃,优化后发酵液对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径较优化前提高25.5%。利用基因组测序及次级代谢产物合成相关基因分析,发现Bacillus sp.B-11基因组中含有非核糖体肽合成酶(NRPS)基因,并结合该菌次级代谢产物对蛋白酶的敏感性,表明该菌具有产多肽类化合物的潜力。结论盐碱土壤中的极端微生物资源可作为抗菌活性物质的潜在新来源。
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关键词
耐盐芽孢杆菌
金黄色葡萄球菌
抗菌活性
正交优化
功能基因
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职称材料
响应面法优化超声波辅助提取米尔贝链霉菌中米尔贝霉素A3和A4的工艺研究（英文）
3
作者
鲁凤娟
侯燕燕
+2 位作者
张鹤铭
夏海洋
田永强
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
2018年第2期189-197,共9页
本文报道了超声波辅助提取米尔贝链霉菌中米尔贝霉素A3和A4的产量的方法,采用反向高效液相表征米尔贝霉素A3和A4的产量,并通过响应面法来优化提取工艺。对提取时间(X_1)、超声功率(X_2)和占空比(X_3)进行了三因素三水平BoxBehnken设计,...
本文报道了超声波辅助提取米尔贝链霉菌中米尔贝霉素A3和A4的产量的方法,采用反向高效液相表征米尔贝霉素A3和A4的产量,并通过响应面法来优化提取工艺。对提取时间(X_1)、超声功率(X_2)和占空比(X_3)进行了三因素三水平BoxBehnken设计,以获得米尔贝霉素A3(Y_1)和A4(Y_2)的最佳产量。研究表明,最佳超声波辅助提取条件为:溶剂为乙酸乙酯,料液比0.8,提取时间30min,超声功率110W,占空比40%和提取温度10℃。在此提取条件下米尔贝霉素A3和A4的最大产量分别为312.5和174mg/g,分别是传统提取方法产量的2.3和2.5倍。
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关键词
响应面方法学
超声辅助提取
优化
米尔贝霉素
米尔贝链霉菌
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职称材料
题名
核糖体工程技术选育米尔贝霉素高产菌株
被引量：
5
1
作者
鲁凤娟
侯燕燕
李晓广
何林凌
褚以文
夏海洋
田永强
机构
四川大学轻纺与食品学院教育部皮革化学与工程重点实验室
成都
大学
四川
抗菌素工业研究所抗生素研究与再评价
四川
省
重点
实验室
中国科
学院
上海生命科学研究院植物生理生态研究所中国科
学院
合成生物学
重点
实验室
出处
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
2018年第7期811-816,共6页
基金
中国科学院合成生物学重点实验室开放课题(No.SYN201612)
四川省科技计划项目(No.2017GZ0430)
文摘
本实验室中保存的一株从土壤中分离得到的米尔贝链霉菌(Streptomyces milbemycinicus)27号菌株所产米尔贝霉素A3和A4的初始产量分别为61.0和23.8μg/m L。以该菌株为出发菌株,采用核糖体工程技术,结合紫外诱变技术,对米尔贝霉素产生菌米尔贝链霉菌进行诱变,并以链霉素耐受为筛选压力进行筛选。经过诱变后对单菌落进行摇瓶复筛,其中正突变株中米尔贝霉素产量最高的菌株编号是R2-6-5,其米尔贝霉素A3和A4的产量分别是105.2和38.8μg/m L,较原始菌株分别提高了72.5%和63.3%,且遗传稳定。最后,对产量变化较大的11株突变株基因组中rsm G基因和rsp L基因进行突变位点分析,发现在rsp L基因内均未发生突变,rsm G基因均发生突变。本研究表明,链霉素抗性降低的突变菌株确实都在相关基因内发生突变,且核糖体工程结合紫外诱变的诱变方式效果良好,能够快速有效的提高米尔贝链霉菌生物合成米尔贝霉素的能力。
关键词
核糖体工程
复合诱变
链霉素
米尔贝霉素
Keywords
Ribosomal engineering
Combination mutagenesis
Streptomycin
Milbemycins
分类号
R978.1 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
一株具有抗菌活性耐盐芽孢杆菌B-11的分离鉴定及发酵工艺优化
被引量：
2
2
作者
张帅
邱鹏
龙秀锋
侯燕燕
鲁凤娟
张鹤铭
田永强
机构
四川大学轻纺与食品学院教育部皮革化学与工程重点实验室
出处
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第7期531-537,540,共8页
基金
中央高校基本科研业务费专项资金资助(No.SCU2015D008)
四川应用基础研究计划项目(No.2014JY0199)
文摘
目的旨在从盐碱土壤中分离获得一株耐盐细菌B-11,对其进行分类鉴定及抗菌活性优化及抗菌特性研究。方法基于形态学分析和16S rRNA基因序列对菌株进行分类鉴定。以金黄色葡萄球菌为指示菌,采用双层平板法对菌株B-11发酵液特性进行研究,并通过发酵培养基的正交优化试验,获得菌株产抗菌活性物质最佳的发酵培养条件。通过对菌株B-11基因组次级代谢产物合成基因的分析,研究其基因组上的功能基因。结果结合形态学和分子鉴定表明该菌为Bacillus属成员,在0-4%的Na Cl浓度范围内生长良好,为耐盐细菌。该细菌发酵上清液对蛋白酶K和链霉蛋白酶敏感,对pH、温度和紫外光具有良好的耐受性。通过正交优化得到菌株B-11最适发酵条件为:可溶性淀粉15g/L,黄豆粉15g/L,NaCl 15g/L,p H为自然pH,接种量为1.5%,发酵温度为34℃或37℃,优化后发酵液对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径较优化前提高25.5%。利用基因组测序及次级代谢产物合成相关基因分析,发现Bacillus sp.B-11基因组中含有非核糖体肽合成酶(NRPS)基因,并结合该菌次级代谢产物对蛋白酶的敏感性,表明该菌具有产多肽类化合物的潜力。结论盐碱土壤中的极端微生物资源可作为抗菌活性物质的潜在新来源。
关键词
耐盐芽孢杆菌
金黄色葡萄球菌
抗菌活性
正交优化
功能基因
Keywords
Salt-tolerant bacillus
Staphylococcus aureus
Antimicrobial activity
Orthogonal optimization
Functional gene
分类号
R978 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
响应面法优化超声波辅助提取米尔贝链霉菌中米尔贝霉素A3和A4的工艺研究（英文）
3
作者
鲁凤娟
侯燕燕
张鹤铭
夏海洋
田永强
机构
四川大学轻纺与食品学院教育部皮革化学与工程重点实验室
中国科
学院
上海生命科学研究院植物生理生态研究所中国科
学院
合成生物学
重点
实验室
出处
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
2018年第2期189-197,共9页
基金
中国科学院合成生物学重点实验室开放课题(No.SYN201612)
四川省科技计划项目(No.2017GZ0430)
文摘
本文报道了超声波辅助提取米尔贝链霉菌中米尔贝霉素A3和A4的产量的方法,采用反向高效液相表征米尔贝霉素A3和A4的产量,并通过响应面法来优化提取工艺。对提取时间(X_1)、超声功率(X_2)和占空比(X_3)进行了三因素三水平BoxBehnken设计,以获得米尔贝霉素A3(Y_1)和A4(Y_2)的最佳产量。研究表明,最佳超声波辅助提取条件为:溶剂为乙酸乙酯,料液比0.8,提取时间30min,超声功率110W,占空比40%和提取温度10℃。在此提取条件下米尔贝霉素A3和A4的最大产量分别为312.5和174mg/g,分别是传统提取方法产量的2.3和2.5倍。
关键词
响应面方法学
超声辅助提取
优化
米尔贝霉素
米尔贝链霉菌
Keywords
Response surface methodology
Ultrasonic-assisted extraction
Optimization
Milbemycins
Streptomyces milbemycinicus
分类号
R978.1 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
核糖体工程技术选育米尔贝霉素高产菌株
鲁凤娟
侯燕燕
李晓广
何林凌
褚以文
夏海洋
田永强
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
2018
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
一株具有抗菌活性耐盐芽孢杆菌B-11的分离鉴定及发酵工艺优化
张帅
邱鹏
龙秀锋
侯燕燕
鲁凤娟
张鹤铭
田永强
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
响应面法优化超声波辅助提取米尔贝链霉菌中米尔贝霉素A3和A4的工艺研究（英文）
鲁凤娟
侯燕燕
张鹤铭
夏海洋
田永强
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
2018
0
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职称材料
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