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鸡粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的克隆与真核表达 被引量:2
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作者 谭兵 王红宁 +1 位作者 张毅 樊汶樵 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期516-522,共7页
为了研究鸡粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的生物学功能,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从刀豆蛋白(ConA)刺激的四川山地乌骨鸡外周血淋巴细胞中扩增出GM-CSF基因,进一步通过PCR等方法将该基因亚克隆入真核表达载体pCI-n... 为了研究鸡粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的生物学功能,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从刀豆蛋白(ConA)刺激的四川山地乌骨鸡外周血淋巴细胞中扩增出GM-CSF基因,进一步通过PCR等方法将该基因亚克隆入真核表达载体pCI-neo,构建出重组表达质粒pCI-GM-CSF,将pCI-GM-CSF转染COS-7细胞,提取表达产物进行活性检测.序列测定表明,四川山地乌骨鸡GM-CSF全基因长为435 bp,编码144个氨基酸,与GenBank上公布的瓦赫宁鸡GM-CSF基因(AJ621740)氨基酸序列同源性达95.1%,与其他哺乳动物GM-CSF基因的氨基酸序列同源性低于30%.骨髓细胞增殖实验证实四川山地乌骨鸡GM-CSF能明显促进鸡骨髓细胞的增殖.以上结果表明,本实验成功克隆了四川山地乌骨鸡GM-CSF基因,证实四川山地乌骨鸡GM-CSF重组蛋白具有明显的生物学活性. 展开更多
关键词 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 四川山地乌骨鸡 真核表达 生物学活性
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人畜共患病的分类、流行及研究方向 被引量:4
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作者 唐俊妮 王红宁 《四川畜牧兽医》 2010年第10期23-25,共3页
人畜共患病不仅对人类健康造成巨大的威胁,也会对畜牧养殖业带来毁灭性打击。如何有效预防、控制和消灭人畜共患病已成为全人类面临的巨大挑战。本文主要概述了人畜共患病的分类、流行现状及危害,并针对一些重大人畜共患病病原体,如SAR... 人畜共患病不仅对人类健康造成巨大的威胁,也会对畜牧养殖业带来毁灭性打击。如何有效预防、控制和消灭人畜共患病已成为全人类面临的巨大挑战。本文主要概述了人畜共患病的分类、流行现状及危害,并针对一些重大人畜共患病病原体,如SARS病毒、H5N1禽流感病毒所取得的一些重要进展加以阐述,提出了今后的研究方向。 展开更多
关键词 人畜共患病 分类 流行
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猪源肠球菌中氟苯尼考耐药性调查及fexA基因环境研究 被引量:13
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作者 张平 彭琳瑶 +2 位作者 徐昌文 李云霞 张安云 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第6期1700-1707,共8页
本研究旨在调查猪场中肠球菌对氟苯尼考的耐药性,检测氟苯尼考耐药基因,并测定肠球菌中氟苯尼考耐药基因fexA的基因环境,从而分析其可能的传播机理。以四川某猪场分离鉴定的50株肠球菌为研究材料,开展分离株对氟苯尼考的药物敏感性试验... 本研究旨在调查猪场中肠球菌对氟苯尼考的耐药性,检测氟苯尼考耐药基因,并测定肠球菌中氟苯尼考耐药基因fexA的基因环境,从而分析其可能的传播机理。以四川某猪场分离鉴定的50株肠球菌为研究材料,开展分离株对氟苯尼考的药物敏感性试验。运用PCR技术检测分离株中氟苯尼考耐药基因cfr、fexB、fexA、floR和estDL136。运用热不对称性PCR(TAIL-PCR)技术获得fexA基因周围序列信息,分析其基因环境。运用反向PCR技术验证序列中环化结构的存在,同时运用交叉PCR技术检测20株猪源肠球菌fexA基因的基因环境。结果显示,在分离出的50株肠球菌中,有34株对氟苯尼考耐药(MIC≥16mg/L),耐药率为68%。PCR结果显示,20株含有fexA基因,28株含有fexB基因,14株同时含有这两种基因。TAIL-PCR和测序结果显示,分离株DKC5中fexA基因存在于12 945bp的Tn554转座子中。Tn554转座子可形成环化结构,其中的重复序列可形成含有2 395bp的环化结构。本试验结果表明,猪源肠球菌对氟苯尼考耐药率较高,主要由fexA和fexB基因介导,fexA基因存在于Tn554结构中。预测fexA基因是经两次插入整合后进入DKC5分离株基因组序列的,这为fexA基因的水平传播提供了遗传依据。 展开更多
关键词 肠球菌 氟苯尼考 耐药性 fexA基因 TAIL-PCR 基因环境
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