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粗毛栓菌产生木质纤维素酶及其降解植物生物质的研究 被引量:5
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作者 谢君 孙迅 +1 位作者 任路 张义正 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第8期11-16,共6页
对在液体培养基中产生木质纤维素降解酶酶能力强且产酶速度较快的粗毛栓菌(Trametesgallic) ,进行了最佳产酶液体培养基组分的研究 ,并对其在液体培养基、固体培养基中产生木质纤维素降解酶能力和行为进行了分析。结果表明 ,该菌株在高... 对在液体培养基中产生木质纤维素降解酶酶能力强且产酶速度较快的粗毛栓菌(Trametesgallic) ,进行了最佳产酶液体培养基组分的研究 ,并对其在液体培养基、固体培养基中产生木质纤维素降解酶能力和行为进行了分析。结果表明 ,该菌株在高氮低碳高无机盐培养基中的漆酶和木质素过氧化物酶的活性最高 ,在低氮高碳高无机盐培养基中的锰过氧化物酶和半纤维素酶的活性最高。该菌株培养在含有高氮无碳高无机盐和低氮无碳高无机盐液体培养基的麦草粉中 ,锰过氧化物酶在 10d、漆酶和半纤维素酶在 4 0d、木质素过氧化物酶在 5 0d时分别达到峰值 ,该菌株使麦草生物质的失重率大于 6 4 %。对半纤维素的降解达 71.96 % ,对纤维素的降解达 6 6 .2 1% ,对木质素的降解达 70 .14%。T .gallica在固体培养基中具有很强的降解生物质能力 ,且首先降解木质素。 展开更多
关键词 粗毛栓菌 木质纤维素降解酶 植物生物质降解 液体培养基 酶活性 生物制浆 造纸业
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短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)脱毛蛋白酶基因的克隆与序列分析 被引量:12
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作者 黄庆 潘皎 +2 位作者 彭勇 李昕 张义正 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2004年第2期31-35,共5页
短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)UN-31-C-42菌株是从成都市生活垃圾中分离,并经多次诱变后得到的菌株。其发酵液具有很好的脱毛效果,且对皮革胶原没有损伤。通过对该菌株发酵液中的碱性蛋白酶DHAP的纯化与N′-末端氨基酸序列测定,以... 短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)UN-31-C-42菌株是从成都市生活垃圾中分离,并经多次诱变后得到的菌株。其发酵液具有很好的脱毛效果,且对皮革胶原没有损伤。通过对该菌株发酵液中的碱性蛋白酶DHAP的纯化与N′-末端氨基酸序列测定,以及对该序列的同源性分析后,设计出相应引物,用PCR方法扩增了该菌株的碱性蛋白酶基因AP。测序结果表明,该克隆基因全长1588bp,有一个全长1149bp的编码区序列,推测蛋白质序列长383个氨基酸残基,成熟肽分子量为27.8kD。推测的成熟蛋白酶N′-末端具有与DHAPN′-末端完全匹配的序列,说明克隆到的基因为脱毛蛋白酶基因。同源性分析表明,该基因序列与已报道的其他碱性蛋白酶基因有较高的同源性。 展开更多
关键词 短小芽孢杆菌 碱性蛋白酶基因 PCR 基因克隆 序列分析 制革业 脱毛工艺
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豆豉溶栓酶产生菌的筛选及其酶学性质的初步研究 被引量:62
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作者 彭勇 张义正 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第2期30-34,共5页
利用纤维蛋白平板筛选、纤溶活性测定、SDS PAGE分析和体外溶栓实验等相结合的方法 ,成功地从豆豉中筛选到一株纤溶活性高达 5 2 0U/mL和具有良好体外溶栓效果的细菌菌株 (编号为DC 4 ) ,经鉴定为解淀粉芽孢杆菌 (Bacillusamyloliquefac... 利用纤维蛋白平板筛选、纤溶活性测定、SDS PAGE分析和体外溶栓实验等相结合的方法 ,成功地从豆豉中筛选到一株纤溶活性高达 5 2 0U/mL和具有良好体外溶栓效果的细菌菌株 (编号为DC 4 ) ,经鉴定为解淀粉芽孢杆菌 (Bacillusamyloliquefaciens)。SDS PAGE和纤维蛋白自显影表明该酶的分子量为 2 8kD ,其最适反应温度和 pH值分别为 4 2℃和 8.0 ,在 pH6~ 10较稳定。PMSF和盐酸苯甲醚能抑制其纤溶活性 ,而EDTA和EGTA不能抑制 ,表明该酶是一种丝氨酸蛋白酶。它溶解纤维蛋白的方式是直接溶解纤维蛋白 ,而不激活纤溶酶原 ,并且不水解血细胞。 展开更多
关键词 筛选 细菌菌体 豆豉 解淀粉芽孢杆菌 溶栓酶 酶学性质 血栓栓塞性疾病 溶栓药物
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植物内源激素的反相高效液相色谱法测定 被引量:67
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作者 谢君 张义正 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期60-62,共3页
报道了以6_N_苄基腺嘌呤(BA)为内标的反相高效液相色谱法测定玉米素(ZT)、赤霉素(GA3)、激动素(KT)、3_吲哚乙酸(IAA)和脱落酸(ABA)等5种植物内源激素的条件 ;采用 μ BondapakC18 柱、乙腈 -甲醇 -0.6% (φ)乙酸流动相、检测波长254nm ... 报道了以6_N_苄基腺嘌呤(BA)为内标的反相高效液相色谱法测定玉米素(ZT)、赤霉素(GA3)、激动素(KT)、3_吲哚乙酸(IAA)和脱落酸(ABA)等5种植物内源激素的条件 ;采用 μ BondapakC18 柱、乙腈 -甲醇 -0.6% (φ)乙酸流动相、检测波长254nm ,建立了一种从植物中提取5种激素的样品处理方法 ,并测定了马铃薯块茎中的5种植物内源激素的含量。 展开更多
关键词 植物 内源激素 反相高效液相色谱 内标法 测定
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解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)DC-4产豆豉溶栓酶发酵条件的优化 被引量:11
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作者 彭勇 张义正 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期19-23,共5页
解淀粉芽孢杆菌DC 4是从豆豉中筛选得到 ,产生的豆豉溶栓酶具有较好的体外溶栓效果。利用单因素实验和正交分析获得该菌株产生豆豉溶栓酶的最佳发酵条件为 :接种量为 7% ;发酵培养基组分为纤维蛋白 2 0 % ,蛋白胨 0 5 % ,糊精 2 0 % ... 解淀粉芽孢杆菌DC 4是从豆豉中筛选得到 ,产生的豆豉溶栓酶具有较好的体外溶栓效果。利用单因素实验和正交分析获得该菌株产生豆豉溶栓酶的最佳发酵条件为 :接种量为 7% ;发酵培养基组分为纤维蛋白 2 0 % ,蛋白胨 0 5 % ,糊精 2 0 % ,酵母膏 0 1 5 % ,K2 HPO40 4% ,NaH2 PO40 0 4 % ,CaCO30 3% ,pH7 0 ;培养温度为 32℃ ;2 5 0mL三角瓶装量为 5 0mL ;2 1 0r/min振荡培养 72h ,其发酵上清液纤溶活性可达到 82 0U/mL。 展开更多
关键词 解淀粉芽孢杆菌 优化 豆鼓 溶栓酶 发酵条件
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碱性蛋白酶№.8的脱毛条件研究 被引量:6
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作者 刘彦 杨志华 张义正 《皮革科学与工程》 CAS 2002年第4期15-20,共6页
本文对新型碱性蛋白酶№ 8在制革浸水、脱毛、软化应用中的最适条件进行了系统研究。结果表明 :碱性蛋白酶№ 8应用的最适 pH为 10、浸水最适浓度为 30 - 5 0u/g ,脱毛最适浓度为 10 0 - 15 0u/g ,软化最适浓度为 5 0 - 10 0u/g ,温度 1... 本文对新型碱性蛋白酶№ 8在制革浸水、脱毛、软化应用中的最适条件进行了系统研究。结果表明 :碱性蛋白酶№ 8应用的最适 pH为 10、浸水最适浓度为 30 - 5 0u/g ,脱毛最适浓度为 10 0 - 15 0u/g ,软化最适浓度为 5 0 - 10 0u/g ,温度 18- 38℃。通过与 1398酶的脱毛效果 ,和胰酶的软化效果比较以及酶脱毛对后工序的影响和工艺平衡等方面的研究 ,确定№ 8酶应用的最适条件 ,为该酶今后在制革生产中得到应用 。 展开更多
关键词 碱性蛋白酶No8 酶脱毛 酶软化 皮革 清洁化工艺 脱毛条件
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猪IL-18 cDNA的克隆及在大肠杆菌中的表达 被引量:1
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作者 肖璐 李惠 +2 位作者 刘红玲 林海荣 张义正 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期530-532,共3页
关键词 IL-18 基因克隆 基因表达
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