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抗人SOCS3单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定
被引量：
3
1
作者
陈长春
李婉宜
+2 位作者
章崇杰
魏大鹏
邝玉
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第11期1778-1780,1783,共4页
目的制备高效价的抗人SOCS3单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法以重组GST-SOCS3融合蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立可稳定分泌抗SOCS3单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用ELISA及Western blot...
目的制备高效价的抗人SOCS3单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法以重组GST-SOCS3融合蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立可稳定分泌抗SOCS3单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用ELISA及Western blot鉴定单克隆抗体的特性,并测定其效价、Ig亚类及相对亲和力。结果筛选到一株可稳定分泌抗人SOCS3单克隆抗体的杂交瘤细胞株。Western blotting显示在相对分子质量为6.3×104处出现特异性反应带。杂交瘤细胞培养上清效价为1∶640,腹水效价为1∶25600,Ig亚类为IgG2a,相对亲和力达4.84×106L/mol。结论成功制备能特异性识别人SOCS3的单克隆抗体,为进一步研究人体细胞因子信号传导的负反馈调节及SOCS3在微生物感染中的免疫调节作用奠定了基础。
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关键词
SOCS3
单克隆抗体
抗体制备
杂交瘤细胞
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职称材料
免疫毒素基因DT390真核表达载体的构建及功能研究
被引量：
1
2
作者
陈文捷
李虹
+4 位作者
贾怡
张林
吕梅励
李明远
蒋中华
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第3期299-301,305,共4页
目的构建一种新型免疫毒素DT390-mIP10(白喉杆菌毒素390-小鼠γ干扰素诱导性蛋白10)基因的真核表达质粒,并对其功能进行初步研究。方法通过RT-PCR扩增mIP10基因,并插入到含有DT390基因片段的真核质粒SRα中,构建重组质粒。以PolyFect脂...
目的构建一种新型免疫毒素DT390-mIP10(白喉杆菌毒素390-小鼠γ干扰素诱导性蛋白10)基因的真核表达质粒,并对其功能进行初步研究。方法通过RT-PCR扩增mIP10基因,并插入到含有DT390基因片段的真核质粒SRα中,构建重组质粒。以PolyFect脂质体转染NIH3T3细胞,用免疫荧光检测重组质粒的表达;用MTT比色法测定重组免疫毒素质粒的生物学活性。结果构建了DT390-mIP10的真核表达载体SRα-DT390-mIP10,并在NIH3T3细胞中获得表达。表达的DT390-mIP10在体外能有效地杀伤活化的T细胞。结论免疫毒素基因重组真核表达载体DT390-mIP10的构建成功并在真核细胞中表达,为其在肿瘤及自身免疫性疾病治疗方面的进一步应用研究奠定了基础。
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关键词
免疫毒素
mIP10
DT390
真核表达
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职称材料
题名
抗人SOCS3单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定
被引量：
3
1
作者
陈长春
李婉宜
章崇杰
魏大鹏
邝玉
机构
四川大学
华西
基础医学
与法
医学院
微生物
学
教研室
四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第11期1778-1780,1783,共4页
文摘
目的制备高效价的抗人SOCS3单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法以重组GST-SOCS3融合蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立可稳定分泌抗SOCS3单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用ELISA及Western blot鉴定单克隆抗体的特性,并测定其效价、Ig亚类及相对亲和力。结果筛选到一株可稳定分泌抗人SOCS3单克隆抗体的杂交瘤细胞株。Western blotting显示在相对分子质量为6.3×104处出现特异性反应带。杂交瘤细胞培养上清效价为1∶640,腹水效价为1∶25600,Ig亚类为IgG2a,相对亲和力达4.84×106L/mol。结论成功制备能特异性识别人SOCS3的单克隆抗体,为进一步研究人体细胞因子信号传导的负反馈调节及SOCS3在微生物感染中的免疫调节作用奠定了基础。
关键词
SOCS3
单克隆抗体
抗体制备
杂交瘤细胞
Keywords
SOCS3
monoclonal antibody
preparation
hybridoma cells
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
免疫毒素基因DT390真核表达载体的构建及功能研究
被引量：
1
2
作者
陈文捷
李虹
贾怡
张林
吕梅励
李明远
蒋中华
机构
四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室
四川大学
华西
基础医学
与法
医学院
微生物
学
教研室
四川大学
华西
基础医学
与法
医学院
法
医物证
学
教研室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第3期299-301,305,共4页
基金
国家高技术研究发展计划(863)资助(No.2002AA214101)
国家自然基金委创新研究群体基金项目(No.30221001)
四川省应用基础项目基金资助(No.04JY029-002)
文摘
目的构建一种新型免疫毒素DT390-mIP10(白喉杆菌毒素390-小鼠γ干扰素诱导性蛋白10)基因的真核表达质粒,并对其功能进行初步研究。方法通过RT-PCR扩增mIP10基因,并插入到含有DT390基因片段的真核质粒SRα中,构建重组质粒。以PolyFect脂质体转染NIH3T3细胞,用免疫荧光检测重组质粒的表达;用MTT比色法测定重组免疫毒素质粒的生物学活性。结果构建了DT390-mIP10的真核表达载体SRα-DT390-mIP10,并在NIH3T3细胞中获得表达。表达的DT390-mIP10在体外能有效地杀伤活化的T细胞。结论免疫毒素基因重组真核表达载体DT390-mIP10的构建成功并在真核细胞中表达,为其在肿瘤及自身免疫性疾病治疗方面的进一步应用研究奠定了基础。
关键词
免疫毒素
mIP10
DT390
真核表达
Keywords
immunotoxin
mIP10
DT390
eukaryotic expression
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗人SOCS3单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定
陈长春
李婉宜
章崇杰
魏大鹏
邝玉
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
免疫毒素基因DT390真核表达载体的构建及功能研究
陈文捷
李虹
贾怡
张林
吕梅励
李明远
蒋中华
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
1
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