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信号识别颗粒14调控肝细胞癌进程并影响患者预后
1
作者 田慧敏 唐冬梅 +1 位作者 马美琳 傅湘辉 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期460-471,共12页
目的:探究信号识别颗粒14(SRP14)在肝细胞癌(HCC)中的表达及功能。方法:利用生物信息学、定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)、免疫组织化学染色和蛋白质印迹法等明确SRP14在HCC中的表达;应用Kaplan-Meier法分析SRP14 mRNA表达变化与HCC... 目的:探究信号识别颗粒14(SRP14)在肝细胞癌(HCC)中的表达及功能。方法:利用生物信息学、定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)、免疫组织化学染色和蛋白质印迹法等明确SRP14在HCC中的表达;应用Kaplan-Meier法分析SRP14 mRNA表达变化与HCC患者的总生存期、无进展生存期及疾病特异性生存期的相关性;通过5-乙基-2′-94脱氧尿苷(EdU)染色、MTS实验、Transwell小室实验及细胞划痕实验等探索SRP14对HCC细胞增殖和迁移的作用;利用京都基因与基因组百科全书(KEGG)和基因本体(GO)富集分析以及qRT-PCR初探SRP14在HCC中的作用机制。结果:在GSE14520数据集、TNMplot数据库和临床标本中,与配对癌旁组织、非配对癌旁组织或正常组织比较,HCC组织的SPR14 mRNA表达均有不同程度的升高(均P<0.05)。在临床标本中,与配对癌旁组织比较,HCC组织的SPR14蛋白表达上调(P<0.05)。SRP14表达上调的HCC患者具有更长的总生存期、无进展生存期及疾病特异性生存期(均P<0.05)。细胞实验结果显示,SRP14能抑制HCC细胞的体外增殖和迁移。KEGG和GO富集分析结果显示,在HCC中,与SRP14共表达的基因主要调控蛋白质合成、加工和运输等相关细胞活动或功能;在非酒精性脂肪性肝病相关HCC中,与SRP14共表达的基因主要调控MAPK、cAMP、PI3K-Akt、Wnt等多条信号传导通路。SRP14抑制HCC细胞中已知抑癌基因GPRC5A的mRNA表达(P<0.05)。结论:SRP14可能调控HCC进程并影响患者预后。 展开更多
关键词 肝细胞癌 非酒精性脂肪性肝病 信号识别颗粒14 G蛋白偶联受体C类组5成员A 细胞增殖 细胞迁移 预后
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α-干扰素对骨巨细胞瘤细胞凋亡和bFGF及其受体表达的影响 被引量：1
2
作者 曾建成 裴福兴 +5 位作者 胡云洲 屠重棋 杨天府 李胜富 雷松 魏于全 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期69-73,共5页
目的:探讨α-干扰素对体外培养的骨巨细胞瘤细胞碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)及受体Bek表达与生物学行为的影响,为骨巨细胞瘤术后复发转移的防治探索新途径。方法:采用不同浓度的α-干扰素诱导体外培养的... 目的:探讨α-干扰素对体外培养的骨巨细胞瘤细胞碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)及受体Bek表达与生物学行为的影响,为骨巨细胞瘤术后复发转移的防治探索新途径。方法:采用不同浓度的α-干扰素诱导体外培养的第三代骨巨细胞瘤细胞,观察α-干扰素对瘤细胞生物学行为的影响,流式细胞术与细胞-酶联免疫吸附法分析α-干扰素诱导48h后瘤细胞凋亡情况及Bek/bFGF表达的变化。结果:浓度为1000IU/ml以上的α-干扰素作用10～12h左右,瘤细胞即出现退缩现象,生长明显受到抑制;至48h,瘤细胞数目明显减少,且出现大量细胞碎片。α-干扰素可诱导第三代骨巨细胞瘤细胞发生凋亡,其凋亡率随α-干扰素作用浓度增加而递增,呈明显的剂量依赖关系。α-干扰素可抑制第三代骨巨细胞瘤细胞bFGF和Bek的表达,其抑制强度也随α-干扰素作用浓度的增加而增加,呈明显的量效关系。当α-干扰素作用浓度达到1000IU/ml以上时,其诱导凋亡与抑制Bek/bFGF表达的效应均发生显著性变化。结论:α-干扰素对体外培养的第三代骨巨细胞瘤细胞具有明确的抗肿瘤效应,可作为骨巨细胞瘤术后辅助治疗,以防治和减少其复发转移。 展开更多
关键词 骨巨细胞瘤 细胞培养α—干扰素 凋亡 成纤维细胞生长因子
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人骨骼肌TnI-fast基因克隆和体外表达
3
作者 熊光武 王世阆 +8 位作者 杨莉 魏于全 田聆 雷松 阚兵 毛咏秋 王玉 杨佩 方芳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期86-89,共4页
目的　构建人骨骼肌TnI fast基因分泌型真核表达载体 ,为利用TnI fast基因进行抗肿瘤血管生成基因治疗奠定基础。方法　采用PCR和RT PCR制备TnI fastcDNA ,构建TnI fast基因克隆质粒 ,测序证实后将TnI fastcDNA插入到pSecTag2B构建分泌... 目的　构建人骨骼肌TnI fast基因分泌型真核表达载体 ,为利用TnI fast基因进行抗肿瘤血管生成基因治疗奠定基础。方法　采用PCR和RT PCR制备TnI fastcDNA ,构建TnI fast基因克隆质粒 ,测序证实后将TnI fastcDNA插入到pSecTag2B构建分泌型重组真核表达质粒。然后用TnI fast基因重组表达质粒转染COS 1细胞 ,检测TnI fast基因体外表达。结果　DNA测序证实 ,我们从人骨骼肌总RNA和cDNA文库中扩增的TnI fastcDNA序列与NCBIGenebankTnI fastcDNA序列完全一致。ELISA检测证实 ,TnI fast pSecTag2B转染后目的基因可在真核细胞中分泌表达。结论　本研究成功地构建了TnI fast基因重组表达质粒 。 展开更多
关键词 TnI-fast基因 pSecTag2B 克隆 真核表达 肿瘤 生物治疗 抗肿瘤血管生成
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