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我国山丘疫区杜氏利什曼原虫LACK保护性抗原基因克隆和序列分析 被引量:4
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作者 卜玲毅 胡孝素 易桃林 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期20-23,共4页
利什曼原虫的LACK抗原是利什曼原虫的蛋白激酶C受体的同源物 ,是新发现的一种抗原蛋白。本实验用分子克隆的方法获得我国山丘疫区杜氏利什曼原虫编码LACK保护性抗原的基因片段 ,测序并对其序列分析比较。我国山丘疫区杜氏利什曼原虫 (L ... 利什曼原虫的LACK抗原是利什曼原虫的蛋白激酶C受体的同源物 ,是新发现的一种抗原蛋白。本实验用分子克隆的方法获得我国山丘疫区杜氏利什曼原虫编码LACK保护性抗原的基因片段 ,测序并对其序列分析比较。我国山丘疫区杜氏利什曼原虫 (L dSC10 )LACK抗原基因片段的大小为 94 2bp ,与GenBank中LACK的核苷酸序列一致性在 94 %以上 ,呈高度同源性 ;推导的氨基酸序列与GenBank中LACK的氨基酸序列一致性达 95 %以上 ,具有高度保守性 ;该蛋白质属于WD蛋白家族 ,有重要的生物学意义。 展开更多
关键词 利什曼原虫 LACK抗原 聚合酶链反应 克隆 序列分析 氨基酸 中国 山丘疫区
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杜氏利什曼原虫LACK抗原基因的克隆和表达 被引量:1
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作者 卜玲毅 胡孝素 +2 位作者 敬保迁 王雅静 马莹 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期42-44,共3页
目的 在大肠杆菌中高效表达纯化杜氏利什曼原虫的LACK抗原。方法 以本实验室的重组质粒T -LACK为模板 ,PCR扩增得到LACK抗原基因 ,与表达载体pQE31定向重组 ,转化到宿主菌M 15中进行表达和纯化 ,并以SDS -PAGE和Western -blotting进... 目的 在大肠杆菌中高效表达纯化杜氏利什曼原虫的LACK抗原。方法 以本实验室的重组质粒T -LACK为模板 ,PCR扩增得到LACK抗原基因 ,与表达载体pQE31定向重组 ,转化到宿主菌M 15中进行表达和纯化 ,并以SDS -PAGE和Western -blotting进行鉴定。结果  1 SDS -PAGE电泳检测 ,重组质粒 pQE31-LACK的全菌蛋白没有出现明显的特异表达带 ,而纯化蛋白和包涵体溶解物在 36kDa处均出现了特异的表达带。 2 36kDa的纯化蛋白被抗利什曼原虫鼠血清清晰地识别。结论 得到了高效表达的LACK纯化蛋白 。 展开更多
关键词 利什曼原虫 LACK 聚合酶链反应 克隆 表达 免疫印迹
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