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细菌素产生菌的筛选及其细菌素的分离纯化 被引量:33
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作者 曾志刚 陈英 余柏松 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期257-259,298,共4页
从香肠中分离得到一株产细菌素的乳酸片球菌 ,其发酵液经硫酸铵沉淀 ,CM SephadexC5 0阳离子交换柱层析后 ,得到的细菌素样品通过SDS PAGE证明是一条带 ,分子量约 2 0 83ku ,该细菌素对热及酸碱稳定 ,易被酶降解而失去活性 ,对许多革... 从香肠中分离得到一株产细菌素的乳酸片球菌 ,其发酵液经硫酸铵沉淀 ,CM SephadexC5 0阳离子交换柱层析后 ,得到的细菌素样品通过SDS PAGE证明是一条带 ,分子量约 2 0 83ku ,该细菌素对热及酸碱稳定 ,易被酶降解而失去活性 ,对许多革兰氏阳性菌有较强的抑制作用 ,而对革兰氏阴性菌、酵母和霉没有作用。 展开更多
关键词 乳酸片球菌 细菌素 筛选 分离纯化
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猪带绦虫抗原基因TS76的克隆及原核表达 被引量:2
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作者 沈斌 高荣 +11 位作者 孟民杰 沈翼 武梅 李江凌 龙章富 魏竹波 王克非 朱锦 付玉梅 卓麟 何绍江 刘世贵 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期61-65,共5页
目的 测定和分析自猪囊尾蚴表达型cDNA文库中筛选出的cDNA克隆 (TS76 )的序列 ,并进行该片段的原核表达研究。方法 采用PCR扩增重组 (噬菌体 (TS76中的TS76cDNA片段 ,亚克隆至 pUC18,得到的重组子用于测序 ,并对测定结果进行分析及同... 目的 测定和分析自猪囊尾蚴表达型cDNA文库中筛选出的cDNA克隆 (TS76 )的序列 ,并进行该片段的原核表达研究。方法 采用PCR扩增重组 (噬菌体 (TS76中的TS76cDNA片段 ,亚克隆至 pUC18,得到的重组子用于测序 ,并对测定结果进行分析及同源性比较 ;将TS76片段亚克隆到原核表达载体pGEX - 1(T中 ,免疫印迹方法筛选得到能正确表达TS76片段的重组子 pGTS76 ;制备pGTS76原核表达产物 ,进行浓度梯度SDS -PAGE和Westernblotting分析。 结果 TS76克隆含 5 16对核苷酸 ,编码含 83个氨基酸残基的多肽 ,与EMBL数据库中的猪囊虫免疫原性蛋白质mRNA有 383bp的同源区域。重组质粒在大肠杆菌中表达的融合蛋白分子量为 34KD ,能与抗猪囊尾蚴兔血清产生很强的免疫反应。结论 分离到一个编码具较强免疫原性猪囊尾蚴抗原的基因。 展开更多
关键词 猪带绦虫 抗原基因 克隆 原核表达 TS76 核酸疫苗
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猪囊尾蚴抗原基因TS11的真核表达研究
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作者 沈翼 高荣 +9 位作者 沈斌 武梅 孟民杰 唐漫书 李江凌 郑勇 刘崑 魏竹波 王克非 刘世贵 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2003年第4期6-9,共4页
将猪囊尾蚴抗原基因 TS11亚克隆至 VR10 2 0真核表达载体中 ,用菌落原位杂交法筛选重组质粒 ,将其转染 COS7细胞 ,以 Northern Blotting检测插入片段的转录 ;用 EL ISA检查其翻译表达产物。结果表明 :VTS11在真核细胞中能够转录TS11基因... 将猪囊尾蚴抗原基因 TS11亚克隆至 VR10 2 0真核表达载体中 ,用菌落原位杂交法筛选重组质粒 ,将其转染 COS7细胞 ,以 Northern Blotting检测插入片段的转录 ;用 EL ISA检查其翻译表达产物。结果表明 :VTS11在真核细胞中能够转录TS11基因的 m RNA;其蛋白表达产物能为兔抗猪囊虫高免血清所识别 ,在转染真核细胞 2 4 h后 ,即可检测到正确表达的猪囊尾蚴抗原蛋白。这些为深入研制猪囊虫的 DNA疫苗奠定了可靠的基础。 展开更多
关键词 猪囊尾蚴 抗原基因 TS11基因 真核表达 蛋白表达产物 人畜共患病
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重组人白介素2腺病毒对腹水癌的治疗作用
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作者 魏海燕 郑常文 +2 位作者 童晋 孙雪奇 彭旭东 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2000年第3期209-211,共3页
目的 :为鉴定已构建的重组hIL 2腺病毒 (AdvIL 2 )活性 ,在体外转导人多种癌细胞系 ,以及观察重组病毒对小鼠腹水癌的治疗作用。方法 :通过ELISA法测定所表达hIL 2的量 ,MTT法测定所表达IL 2的活性。从注射后 2 4h后 ,每日称量试验小鼠... 目的 :为鉴定已构建的重组hIL 2腺病毒 (AdvIL 2 )活性 ,在体外转导人多种癌细胞系 ,以及观察重组病毒对小鼠腹水癌的治疗作用。方法 :通过ELISA法测定所表达hIL 2的量 ,MTT法测定所表达IL 2的活性。从注射后 2 4h后 ,每日称量试验小鼠的体重 ,并观察小鼠的存活情况。结果 :发现AdvIL 2在体外能高效转导多种癌细胞 ,并检测到有 10ng水平hIL 2表达 ,持续时间为 3周左右。腹腔注射治疗小鼠腹水癌 (MathA) ,总剂量为 5× 10 8PFU ,注射AdvIL 2组小鼠腹水增加明显低于对照组 :重组荧光酶腺病毒 (AdvLuc)、培养基 ,在观察结束时 ,试验小鼠的平均体重分别为 :2 6 .5g ,39g和 36 .5g。在注射后第 30天时观察存活率 ,AdvIL 2注射组存活率达 6 2 .5 % ,而AdvLuc对照组在 30d时存活率仅为 2 5 % ,培养基注射组动物则在第 2 5天时全部死亡。结论 :表明AdvIL 2用于腹水癌的治疗效果良好 。 展开更多
关键词 AdvIL-2 IL-2 腹水癌 免疫治疗
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