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SD雄鼠3种不同新蛋白构型GnRH去势抗原免疫学及生物学效果对比研究
被引量：
3
1
作者
韩兴发
李俊丽
+2 位作者
曹晓涵
储明星
曾宪垠
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第4期738-749,共12页
旨在对比研究SD雄鼠3种不同新蛋白构型GnRH抗原的免疫学及生物学效果。本研究新蛋白构型GnRH抗原设计采用增加GnRH拷贝数和增大抗原分子量方法。以化学合成法合成G6K-GnRH并列体(G6K-GnRH-tandem,G6KT)作为新蛋白GnRH抗原制备的基本单...
旨在对比研究SD雄鼠3种不同新蛋白构型GnRH抗原的免疫学及生物学效果。本研究新蛋白构型GnRH抗原设计采用增加GnRH拷贝数和增大抗原分子量方法。以化学合成法合成G6K-GnRH并列体(G6K-GnRH-tandem,G6KT)作为新蛋白GnRH抗原制备的基本单元。将G6KT二聚化,形成抗原Ⅰ(G6KTD),将G6KT和G6KTD分别与卵清蛋白(OVA)偶联,分别形成抗原П(G6KT-OVA)及抗原Ⅲ(G6KTD-OVA)。试验分5组:完整对照组(不做任何处理,intact control)、外科阉割去势组(surgical castrates)及3种新蛋白构型GnRH免疫组(G6KTD、G6KT-OVA及G6KTD-OVA免疫组)。将(G6KTD、G6KT-OVA、G6KTD-OVA)3种不同新蛋白构型GnRH抗原配于Specol佐剂,分别免疫SD雄鼠,6周龄时初免,腿部肌肉注射1 mL乳化抗原(含相应新构型GnRH蛋白100μg),8周后加免,注射剂量与方法同初次免疫,每试验组12只雄鼠。放免法及酶联免疫法测定血清抗体及生殖激素浓度变化,qPCR检测垂体-睾丸生殖相关基因mRNA表达变化。结果显示:1)SD雄鼠主动免疫3种不同新蛋白构型GnRH抗原后均能产生良好的抗体反应。2)G6KT-OVA及G6KTD-OVA免疫组仅初免就能诱发较高水平的抗体产生,并显著降低雄鼠血清LH、FSH、睾酮(T)及抑制素B (INHB)浓度(P<0.05);试验结束时,该两种抗原免疫组雄鼠睾丸重量及体积均降低,精子发生完全被终止,垂体GnRHR、LHβ、FSHβ及睾丸LHR、FSHR、INHα、INβA及INHβB mRNA表达显著下调(P<0.05)。3)G6KTD免疫组12只雄鼠中,9只(75%)在加免后血清LH、FSH、T及INHB浓度显著降低(P<0.05),试验结束时睾丸重量及体积均显著降低(P<0.05),精子发生受到明显抑制(P<0.05)。综上表明:新蛋白构型G6KT-OVA和G6KTD-OVA具有极强的免疫原性,初次免疫就能达到抑制生殖激素分泌的目的,在作为单剂量GnRH疫苗方面具良好的开发前景;同时G6KTD也具有较强的免疫原性,可不与载体蛋白偶联单独作为GnRH去势抗原,继而避开GnRH分子与载体蛋白偶联所面临的GnRH抗原损失严重及与载体蛋白偶联的后续纯化等问题。本研究结果为研发高效GnRH去势疫苗及其大规模应用提供了理论参考。
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关键词
GNRH
新蛋白构型
免疫去势
大鼠
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职称材料
GnRH主动免疫对公猪体内粪臭素代谢的影响
2
作者
随芬芬
韩兴发
+4 位作者
曹晓涵
杜小刚
孟风艳
储明星
曾宪垠
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第6期1140-1146,共7页
旨在探讨促性腺激素释放激素(Gonadotropin releasing hormone,GnRH)主动免疫对公猪体内粪臭素代谢的影响。36只公猪随机分为免疫组(10周龄时初免,18周龄加免)、手术去势组(1周龄外科阉割)及完整对照组(不作任何处理)。应用ELISA检测血...
旨在探讨促性腺激素释放激素(Gonadotropin releasing hormone,GnRH)主动免疫对公猪体内粪臭素代谢的影响。36只公猪随机分为免疫组(10周龄时初免,18周龄加免)、手术去势组(1周龄外科阉割)及完整对照组(不作任何处理)。应用ELISA检测血清中睾酮、雌二醇及雄烯酮含量,采用高效液相色谱检测脂肪中粪臭素、雄烯酮和血液中雄烯酮含量,荧光定量PCR检测肝中粪臭素代谢相关基因mRNA表达量,ELISA检测肝中粪臭素代谢相关蛋白表达。结果显示,GnRH主动免疫后,血清睾酮浓度显著下降(P<0.05),睾丸严重萎缩。免疫组和手术组公猪血清中睾酮、雌二醇、雄烯酮浓度和脂肪中粪臭素、雄烯酮含量相似(P>0.05),均显著低于对照组(P<0.05)。免疫组公猪肝中CAR、COUP-TF1、CYP2E1、CYB5A、CYP2C49、GSTO2mRNA表达变化与手术组相似(P>0.05),均显著高于对照组(P<0.05);CYP2A19mRNA表达量手术组显著高于免疫组(P<0.05),免疫组显著高于对照组(P<0.05);而PXR、SULT1A1mRNA表达量在3组间无明显差异(P>0.05)。免疫组公猪肝中CYP2A19、CYP2C49和GSTO2蛋白表达变化与手术组相似(P>0.05),均显著高于对照组(P<0.05);CYP2E1和CYB5A蛋白表达量在手术组最高,对照组最低,免疫组介于两组之间,与两组均有显著性差异(P<0.05);而SULT1A1蛋白表达量在3组间无明显差异(P>0.05)。综上表明,GnRH主动免疫降低公猪血清中睾酮、雌二醇和雄烯酮含量,上调肝CYP450s和GSTO2基因和蛋白表达,加速粪臭素在肝中的代谢,从而降低公猪膻味。
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关键词
GnRH主动免疫
肝
粪臭素代谢
公猪膻味
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职称材料
题名
SD雄鼠3种不同新蛋白构型GnRH去势抗原免疫学及生物学效果对比研究
被引量：
3
1
作者
韩兴发
李俊丽
曹晓涵
储明星
曾宪垠
机构
四川农业大学生命科学学院原子能农业应用研究室
中国
农业
科学
院北京畜牧兽医
研究
所
农业
部畜禽遗传资源与种质创新重点实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第4期738-749,共12页
基金
四川农业大学优秀博士论文培育基金(YB2014004)
四川农业大学双支计划(00770107)
文摘
旨在对比研究SD雄鼠3种不同新蛋白构型GnRH抗原的免疫学及生物学效果。本研究新蛋白构型GnRH抗原设计采用增加GnRH拷贝数和增大抗原分子量方法。以化学合成法合成G6K-GnRH并列体(G6K-GnRH-tandem,G6KT)作为新蛋白GnRH抗原制备的基本单元。将G6KT二聚化,形成抗原Ⅰ(G6KTD),将G6KT和G6KTD分别与卵清蛋白(OVA)偶联,分别形成抗原П(G6KT-OVA)及抗原Ⅲ(G6KTD-OVA)。试验分5组:完整对照组(不做任何处理,intact control)、外科阉割去势组(surgical castrates)及3种新蛋白构型GnRH免疫组(G6KTD、G6KT-OVA及G6KTD-OVA免疫组)。将(G6KTD、G6KT-OVA、G6KTD-OVA)3种不同新蛋白构型GnRH抗原配于Specol佐剂,分别免疫SD雄鼠,6周龄时初免,腿部肌肉注射1 mL乳化抗原(含相应新构型GnRH蛋白100μg),8周后加免,注射剂量与方法同初次免疫,每试验组12只雄鼠。放免法及酶联免疫法测定血清抗体及生殖激素浓度变化,qPCR检测垂体-睾丸生殖相关基因mRNA表达变化。结果显示:1)SD雄鼠主动免疫3种不同新蛋白构型GnRH抗原后均能产生良好的抗体反应。2)G6KT-OVA及G6KTD-OVA免疫组仅初免就能诱发较高水平的抗体产生,并显著降低雄鼠血清LH、FSH、睾酮(T)及抑制素B (INHB)浓度(P<0.05);试验结束时,该两种抗原免疫组雄鼠睾丸重量及体积均降低,精子发生完全被终止,垂体GnRHR、LHβ、FSHβ及睾丸LHR、FSHR、INHα、INβA及INHβB mRNA表达显著下调(P<0.05)。3)G6KTD免疫组12只雄鼠中,9只(75%)在加免后血清LH、FSH、T及INHB浓度显著降低(P<0.05),试验结束时睾丸重量及体积均显著降低(P<0.05),精子发生受到明显抑制(P<0.05)。综上表明:新蛋白构型G6KT-OVA和G6KTD-OVA具有极强的免疫原性,初次免疫就能达到抑制生殖激素分泌的目的,在作为单剂量GnRH疫苗方面具良好的开发前景;同时G6KTD也具有较强的免疫原性,可不与载体蛋白偶联单独作为GnRH去势抗原,继而避开GnRH分子与载体蛋白偶联所面临的GnRH抗原损失严重及与载体蛋白偶联的后续纯化等问题。本研究结果为研发高效GnRH去势疫苗及其大规模应用提供了理论参考。
关键词
GNRH
新蛋白构型
免疫去势
大鼠
Keywords
GnRH
new protein comformation
immunocastration
rat
分类号
S814.1 [农业科学—畜牧学]
在线阅读
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职称材料
题名
GnRH主动免疫对公猪体内粪臭素代谢的影响
2
作者
随芬芬
韩兴发
曹晓涵
杜小刚
孟风艳
储明星
曾宪垠
机构
四川农业大学生命科学学院原子能农业应用研究室
中国
农业
科学
院北京畜牧兽医
研究
所
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第6期1140-1146,共7页
基金
四川农业大学双支计划(00770107)
四川省教育厅重点项目(15ZA0005)
文摘
旨在探讨促性腺激素释放激素(Gonadotropin releasing hormone,GnRH)主动免疫对公猪体内粪臭素代谢的影响。36只公猪随机分为免疫组(10周龄时初免,18周龄加免)、手术去势组(1周龄外科阉割)及完整对照组(不作任何处理)。应用ELISA检测血清中睾酮、雌二醇及雄烯酮含量,采用高效液相色谱检测脂肪中粪臭素、雄烯酮和血液中雄烯酮含量,荧光定量PCR检测肝中粪臭素代谢相关基因mRNA表达量,ELISA检测肝中粪臭素代谢相关蛋白表达。结果显示,GnRH主动免疫后,血清睾酮浓度显著下降(P<0.05),睾丸严重萎缩。免疫组和手术组公猪血清中睾酮、雌二醇、雄烯酮浓度和脂肪中粪臭素、雄烯酮含量相似(P>0.05),均显著低于对照组(P<0.05)。免疫组公猪肝中CAR、COUP-TF1、CYP2E1、CYB5A、CYP2C49、GSTO2mRNA表达变化与手术组相似(P>0.05),均显著高于对照组(P<0.05);CYP2A19mRNA表达量手术组显著高于免疫组(P<0.05),免疫组显著高于对照组(P<0.05);而PXR、SULT1A1mRNA表达量在3组间无明显差异(P>0.05)。免疫组公猪肝中CYP2A19、CYP2C49和GSTO2蛋白表达变化与手术组相似(P>0.05),均显著高于对照组(P<0.05);CYP2E1和CYB5A蛋白表达量在手术组最高,对照组最低,免疫组介于两组之间,与两组均有显著性差异(P<0.05);而SULT1A1蛋白表达量在3组间无明显差异(P>0.05)。综上表明,GnRH主动免疫降低公猪血清中睾酮、雌二醇和雄烯酮含量,上调肝CYP450s和GSTO2基因和蛋白表达,加速粪臭素在肝中的代谢,从而降低公猪膻味。
关键词
GnRH主动免疫
肝
粪臭素代谢
公猪膻味
Keywords
active immunization against GnRH
liver
skatole metabolism
boar taint
分类号
S828.3 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
SD雄鼠3种不同新蛋白构型GnRH去势抗原免疫学及生物学效果对比研究
韩兴发
李俊丽
曹晓涵
储明星
曾宪垠
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
3
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下载PDF
职称材料
2
GnRH主动免疫对公猪体内粪臭素代谢的影响
随芬芬
韩兴发
曹晓涵
杜小刚
孟风艳
储明星
曾宪垠
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
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