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林麝肺源致病性大肠杆菌O78株crl毒力基因缺失株的构建及其生物学特性研究
1
作者
田青
周鑫
+2 位作者
罗燕
程建国
赵位
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期953-958,共6页
大肠杆菌Crl和Rpo S蛋白的相互作用能够直接促进curli菌毛操纵子的表达,curli菌毛对宿主细胞的黏附性及侵袭性密切相关。为研究林麝肺源致病性大肠杆菌(LPEC)O78株crl毒力基因缺失对其生物学特性和毒力特性的影响,本研究采用λ-Red同源...
大肠杆菌Crl和Rpo S蛋白的相互作用能够直接促进curli菌毛操纵子的表达,curli菌毛对宿主细胞的黏附性及侵袭性密切相关。为研究林麝肺源致病性大肠杆菌(LPEC)O78株crl毒力基因缺失对其生物学特性和毒力特性的影响,本研究采用λ-Red同源重组的方法构建了林麝LPEC O78 crl毒力基因缺失株LPEC O78-crl-,并通过生化特性、生长速率、红细胞凝集性、毒力特性对缺失株进行鉴定。结果表明,与野生株LPEC O78相比较,LPEC O78-crl-对林麝LPEC O78的生化特性和生长速率影响差异不显著;LPEC O78-crl-的红细胞凝集效价为2^(-4),比LPEC O78降低了2倍,其LD50为3.2×10~9 cfu/m L,与野生株LPEC O78相比下降约7倍。本研究构建了林麝LPEC O78-crl-,为进一步研究林麝LPEC的致病机理奠定基础。
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关键词
林麝
肺源致病性大肠杆菌
crl基因
λ-Red同源重组
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职称材料
林麝粪便基因组DNA的提取及PCR扩增
被引量：
2
2
作者
康强
周鑫
+3 位作者
罗燕
田青
程建国
赵位
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2016年第11期1-7,共7页
【目的】探索从林麝粪便中提取基因组DNA并进行物种鉴定的可行性,为林麝野外调查工作以及分子粪便学在林麝保护中的应用提供科学依据。【方法】采集林麝粪便,采用改良的CTAB抽提基因组DNA;按常规PCR法对mtDNA D-loop区和Cyt b基因进行...
【目的】探索从林麝粪便中提取基因组DNA并进行物种鉴定的可行性,为林麝野外调查工作以及分子粪便学在林麝保护中的应用提供科学依据。【方法】采集林麝粪便,采用改良的CTAB抽提基因组DNA;按常规PCR法对mtDNA D-loop区和Cyt b基因进行扩增测序后,用DNAMAN 6.0软件进行系统发育分析;在不同温度存放不同时间,研究林麝粪便基因组DNA的提取与mtDNA D-loop区和Cyt b基因PCR扩增的时效性。【结果】以提取的基因组DNA为模板进行PCR扩增均能特异性地扩增出mtDNA D-loop区和Cyt b基因。系统发育分析结果表明:所扩增产物为林麝的mtDNA D-loop区和Cyt b基因。时效性分析结果显示:常温和4℃条件下保存96h以内的林麝粪便所提取的基因组DNA能有效扩增出mtDNA D-loop区和Cyt b基因。【结论】自然条件下林麝粪便中林麝自身体细胞DNA保存时间较长,通过在野外采集林麝粪便提取基因组DNA并进行物种鉴定是可行的。
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关键词
林麝
粪便
线粒体DNA
D-LOOP区
CYT
B基因
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职称材料
题名
林麝肺源致病性大肠杆菌O78株crl毒力基因缺失株的构建及其生物学特性研究
1
作者
田青
周鑫
罗燕
程建国
赵位
机构
四川农业大学
动物医学院
四川农业大学微生物学实验室
四川
养麝研究所
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期953-958,共6页
基金
人事部留学人员科技活动项目--四川省小额择优资助项目
四川农业大学双支项目
文摘
大肠杆菌Crl和Rpo S蛋白的相互作用能够直接促进curli菌毛操纵子的表达,curli菌毛对宿主细胞的黏附性及侵袭性密切相关。为研究林麝肺源致病性大肠杆菌(LPEC)O78株crl毒力基因缺失对其生物学特性和毒力特性的影响,本研究采用λ-Red同源重组的方法构建了林麝LPEC O78 crl毒力基因缺失株LPEC O78-crl-,并通过生化特性、生长速率、红细胞凝集性、毒力特性对缺失株进行鉴定。结果表明,与野生株LPEC O78相比较,LPEC O78-crl-对林麝LPEC O78的生化特性和生长速率影响差异不显著;LPEC O78-crl-的红细胞凝集效价为2^(-4),比LPEC O78降低了2倍,其LD50为3.2×10~9 cfu/m L,与野生株LPEC O78相比下降约7倍。本研究构建了林麝LPEC O78-crl-,为进一步研究林麝LPEC的致病机理奠定基础。
关键词
林麝
肺源致病性大肠杆菌
crl基因
λ-Red同源重组
Keywords
Forest musk deer
lung pathogenic E.coli
crl gene
×-Red homologous recombination
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
林麝粪便基因组DNA的提取及PCR扩增
被引量：
2
2
作者
康强
周鑫
罗燕
田青
程建国
赵位
机构
四川农业大学
森林资源保护与利用
实验室
四川农业大学微生物学实验室
四川农业大学
动物医学院
四川
养麝研究所
出处
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2016年第11期1-7,共7页
基金
四川省林业厅省级自然保护区重点物种科学研究项目
四川农业大学院级专项
文摘
【目的】探索从林麝粪便中提取基因组DNA并进行物种鉴定的可行性,为林麝野外调查工作以及分子粪便学在林麝保护中的应用提供科学依据。【方法】采集林麝粪便,采用改良的CTAB抽提基因组DNA;按常规PCR法对mtDNA D-loop区和Cyt b基因进行扩增测序后,用DNAMAN 6.0软件进行系统发育分析;在不同温度存放不同时间,研究林麝粪便基因组DNA的提取与mtDNA D-loop区和Cyt b基因PCR扩增的时效性。【结果】以提取的基因组DNA为模板进行PCR扩增均能特异性地扩增出mtDNA D-loop区和Cyt b基因。系统发育分析结果表明:所扩增产物为林麝的mtDNA D-loop区和Cyt b基因。时效性分析结果显示:常温和4℃条件下保存96h以内的林麝粪便所提取的基因组DNA能有效扩增出mtDNA D-loop区和Cyt b基因。【结论】自然条件下林麝粪便中林麝自身体细胞DNA保存时间较长,通过在野外采集林麝粪便提取基因组DNA并进行物种鉴定是可行的。
关键词
林麝
粪便
线粒体DNA
D-LOOP区
CYT
B基因
Keywords
forest musk deer
feces
genomic DNA
D-loop region
Cyt b gene
分类号
S865.41 [农业科学—野生动物驯养]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
林麝肺源致病性大肠杆菌O78株crl毒力基因缺失株的构建及其生物学特性研究
田青
周鑫
罗燕
程建国
赵位
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
林麝粪便基因组DNA的提取及PCR扩增
康强
周鑫
罗燕
田青
程建国
赵位
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2016
2
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职称材料
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