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四川省腹泻病猪的猪萨佩罗病毒检测及1B基因序列比较分析 被引量:4
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作者 李雨濛 郭博 +6 位作者 徐逸飞 陈瑛琪 蔡瑶 李小璟 龚双燕 徐志文 朱玲 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第12期1992-1999,共8页
为了解猪萨佩罗病毒(porcine sapelovirus,PSV)的流行及变异情况,采集2015-2016年四川地区12个县市34个猪场共计428份腹泻病料,采用QRT-PCR方法对PSV进行检测。结果显示:在428份病料中,共有114份为PSV阳性,阳性率为26.6%;所检测的34... 为了解猪萨佩罗病毒(porcine sapelovirus,PSV)的流行及变异情况,采集2015-2016年四川地区12个县市34个猪场共计428份腹泻病料,采用QRT-PCR方法对PSV进行检测。结果显示:在428份病料中,共有114份为PSV阳性,阳性率为26.6%;所检测的34个猪场中,共有20个猪场显示PSV阳性,猪场阳性率为58.8%,表明PSV在四川地区普遍存在。此外,对来自不同县市共14份PSV阳性病料1B全基因进行PCR扩增,通过分子克隆,测序,再利用序列分析软件对四川部分地区猪萨佩罗病毒1B基因进行序列分析。结果表明,14条猪萨佩罗病毒1B基因核苷酸序列及推导出的氨基酸序列相似性分别为90.6%~100%和97.1%~100%。遗传进化分析显示,该研究获得的四川株与已知中国株分属于一个大的分支,说明我国猪萨佩罗病毒1B基因序列较为保守,没有发生大的基因变异。所有中国分离株与韩国株、德国株、英国株处在不同分支,又说明我国PSV的流行毒株可能存在独立进化。 展开更多
关键词 猪萨佩罗病毒 流行病学调查 1B基因 遗传进化分析
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猪瘟病毒四川分离株E2基因的分子克隆、原核表达及免疫学活性分析 被引量:4
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作者 韩国全 郭万柱 +4 位作者 林华 王利娜 张博 陈弟诗 陈杨 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第3期65-71,共7页
分子克隆猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)四川分离株E2基因,并对其进行原核表达及免疫学活性分析。PK-15细胞培养增殖CSFV四川分离株提取总RNA,运用RT-PCR扩增E2基因,定向克隆构建原核重组表达载体,转化E.coli Rosetta-gami... 分子克隆猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)四川分离株E2基因,并对其进行原核表达及免疫学活性分析。PK-15细胞培养增殖CSFV四川分离株提取总RNA,运用RT-PCR扩增E2基因,定向克隆构建原核重组表达载体,转化E.coli Rosetta-gami-TM(DE3)plysS,IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测蛋白表达,Western blotting分析表达蛋白的免疫学活性。试验结果表明,成功克隆了E2基因,共1119 bp,包含有编码E2蛋白的完整序列,编码373个氨基酸;成功构建了CS-FVE2基因完整阅读框、主要抗原区原核表达载体pET-E2(pe)、pET-mE2(pe);蛋白质电泳结果显示,成功表达出约45.32、28.49 ku两目的蛋白,而且表达的E2(pe)、mE2(pe)融合蛋白均能被CSFV阳性血清所识别,具有良好的免疫学反应活性。因此,本试验成功获得CSFV四川分离株E2基因,表达出具有生物学活性的E2(pe)、mE2(pe)融合蛋白。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 四川分离株 E2基因 原核表达 免疫学活性
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四川地区猪源致病性大肠埃希菌分子分群、生物被膜形成能力及耐药性研究 被引量:9
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作者 彭珂楠 周雪珂 +8 位作者 殷鑫欢 李飞 蔡瑶 曾喻兵 江朝源 张儒博 杨泽晓 徐志文 朱玲 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第10期1599-1607,共9页
为了解四川地区猪源致病性大肠埃希菌分子流行特点及流行趋势,本研究在2016—2018年,从四川省各个地区无菌采集患病猪肝脏、脾脏、肺脏、肠道等组织样品208份。通过细菌分离鉴定方法筛选出87株大肠埃希菌,通过小鼠攻毒试验确定其中22株... 为了解四川地区猪源致病性大肠埃希菌分子流行特点及流行趋势,本研究在2016—2018年,从四川省各个地区无菌采集患病猪肝脏、脾脏、肺脏、肠道等组织样品208份。通过细菌分离鉴定方法筛选出87株大肠埃希菌,通过小鼠攻毒试验确定其中22株为致病性大肠埃希菌,并对其进行分子分群、生物被膜形成能力检测、耐药性试验、耐药基因及HPI毒力基因检测。结果显示,22株致病性大肠埃希菌多分布于A群(59.09%),且生物被膜形成阳性率为72.73%,其中强成膜能力菌株占40.91%。大肠埃希菌对19种抗生素药物均有不同程度的耐药性,其中对恩诺沙星、复方新诺明、氨苄西林、阿莫西林、红霉素、四环素等9种药物的耐药率较高,为81.82%~100%;对庆大霉素、左氧氟沙星、诺氟沙星、头孢曲松等4种药物的耐药率为63.64%~72.73%;对其他药物的耐药率为4.55%~54.55%,均呈现多重耐药。22株致病性大肠埃希菌检出的耐药基因包括β-内酰胺类TEM(36.36%)、SHV(9.09%)、OXA(9.09%),磺胺类sulⅠ(63.64%)、sulⅡ(95.45%),氨基糖苷类acc(3)-Ⅱ(68.18%)、aph(3′)-Ⅱ(50.00%),氯霉素类cmlA(45.45%)、floR(81.82%),四环素类tetA(81.82%)、tetB(86.36%),喹诺酮类qurB(40.91%)共12个基因型,检测出HPI毒力基因irp1(40.91%)、irp2(13.64%)、fyuA(13.64%)3种。研究结果表明,四川省猪源致病性大肠埃希菌多分布于A群,生物被膜形成阳性率较高,存在严重的多重耐药性,四环素类、氯霉素类、氨基糖苷类及磺胺类耐药基因的携带率较高,且存在多重耐药基因与毒力基因共存情况。研究结果可为四川地区猪病的预防和治疗提供参考依据。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 耐药基因 HPI毒力岛基因 系统进化分群
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大肠埃希氏菌表达系统在猪亚单位疫苗中的应用
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作者 邓锴 扶星星 +5 位作者 朱玲 王永胜 吴福文 徐志文 赵兴洪 万红平 《动物医学进展》 北大核心 2024年第12期117-121,共5页
大肠埃希氏菌表达系统是目前应用最广、研究最为透彻的外源蛋白表达系统,具有遗传背景清楚、易培养和控制、转化操作简单、表达水平高、成本低、周期短等优点深受疫苗研究者的青睐,但也存在易形成包涵体和无法对蛋白修饰等问题需要对其... 大肠埃希氏菌表达系统是目前应用最广、研究最为透彻的外源蛋白表达系统,具有遗传背景清楚、易培养和控制、转化操作简单、表达水平高、成本低、周期短等优点深受疫苗研究者的青睐,但也存在易形成包涵体和无法对蛋白修饰等问题需要对其进行优化。生猪作为我国最重要的经济动物,其疫病安全防控对养猪业和我国人民的健康可持续发展有重要意义。论文对近年来大肠埃希氏菌表达系统在猪病毒性亚单位疫苗中的研究进展进行概述,为促进大肠埃希氏菌表达系统改进及其亚单位疫苗后续应用提供参考。 展开更多
关键词 大肠埃希氏菌表达系统 生猪 疫病 亚单位疫苗
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绞股蓝皂苷体外抗牛病毒性腹泻病毒的作用
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作者 才冬杰 申子凡 +4 位作者 左之才 田斌 叶刚 李伟强 卜庆龙 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第12期2687-2695,共9页
为研究绞股蓝皂苷对牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus, BVDV)的作用,采用体外细胞培养技术、细胞病变效应观察与CCK-8相结合的方法,首先确定绞股蓝皂苷和α-单月桂酸甘油酯的安全浓度,然后采用先加药后加病毒、先加病毒后... 为研究绞股蓝皂苷对牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus, BVDV)的作用,采用体外细胞培养技术、细胞病变效应观察与CCK-8相结合的方法,首先确定绞股蓝皂苷和α-单月桂酸甘油酯的安全浓度,然后采用先加药后加病毒、先加病毒后加药,及药和病毒预先作用这3种加药方式,利用Western blot和定量PCR检测BVDV E2蛋白基因和5′-UTR表达量的变化,探究其在体外对病毒的抑制作用。结果表明,当绞股蓝皂苷和α-单月桂酸甘油酯的浓度分别为16μmol·L-1和25μg·mL-1时,细胞活性与空白组相比的差异无统计学意义(P>0.05),将其确定为两种药物的最大安全浓度。与对照组相比,绞股蓝皂苷可极显著(P<0.01)抑制BVDV E2蛋白基因和5′-UTR的表达,且其直接灭活作用优于α-单月桂酸甘油酯。此外,绞股蓝皂苷还显示出了显著(P<0.05)的吸附阻断作用,但其复制阻断作用与单独病毒组无显著差异。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 绞股蓝皂苷 抗病毒
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玉米、豆粕和麦麸提取物对4株乳酸杆菌胆盐耐受力的影响 被引量:7
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作者 曾东 倪学勤 +2 位作者 胡晓玲 张洪 刘昆 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期659-664,共6页
模拟猪十二指肠高胆盐环境,研究玉米、豆粕和麦麸提取物对乳酸杆菌胆盐耐受力的影响.将约氏乳酸杆菌JJB3、SNZ10,罗伊氏乳酸杆菌MNZ8、KNZ4等4株菌在分别含有玉米、豆粕和麦麸提取物的1.0%胆盐、pH7.0的磷酸盐缓冲液中作用4h,检测活菌数... 模拟猪十二指肠高胆盐环境,研究玉米、豆粕和麦麸提取物对乳酸杆菌胆盐耐受力的影响.将约氏乳酸杆菌JJB3、SNZ10,罗伊氏乳酸杆菌MNZ8、KNZ4等4株菌在分别含有玉米、豆粕和麦麸提取物的1.0%胆盐、pH7.0的磷酸盐缓冲液中作用4h,检测活菌数;另以不同浓度葡萄糖和酵母提取物替代3种提取物,探讨饲料原料提取物对乳酸杆菌胆盐耐受力的作用机制.结果表明:在未添加提取物的对照组,4株乳酸杆菌活菌数极显著下降(P<0.01),其中MNZ8对胆盐最敏感,活菌数下降1.74个对数值,而KNZ4的耐受力最强,仅下降1.16个对数值.分别添加3种提取物后,4株乳酸杆菌的胆盐耐受力均显著提高(P<0.05),其中,玉米、豆粕和麦麸提取物对JJB3的胆盐保护作用最强,菌株存活率从对照组的78.12%分别提高到99.35%、99.48%、99.74%,对MNZ8的胆盐保护作用最弱.葡萄糖能显著提高乳酸杆菌耐胆盐能力,而酵母提取物作用较弱.说明在胆盐环境中,3种提取物均能显著提高4株乳酸杆菌的耐受力,对乳酸杆菌的保护作用是:麦麸提取物>豆粕提取物>玉米提取物. 展开更多
关键词 玉米提取物 豆粕提取物 麦麸提取物 乳酸杆菌 胆盐耐受力
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大熊猫轮状病毒CH-1株外衣壳蛋白(VP7)基因的克隆和生物信息学分析 被引量:11
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作者 颜其贵 雷燕 +5 位作者 张志和 王成东 阳爱国 王旭 左兰 肖洋 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期705-710,共6页
为研究大熊猫轮状病毒(Giant Panda Rotavirus,GPRV)CH-1株外衣壳蛋白VP7基因的结构及功能,用MA-104细胞(恒河猴胎猴肾细胞)增殖GPRV,提取总RNA,运用RT-PCR扩增VP7基因,并测序,用生物信息学软件预测其功能,并构建系统进化树。结果显示... 为研究大熊猫轮状病毒(Giant Panda Rotavirus,GPRV)CH-1株外衣壳蛋白VP7基因的结构及功能,用MA-104细胞(恒河猴胎猴肾细胞)增殖GPRV,提取总RNA,运用RT-PCR扩增VP7基因,并测序,用生物信息学软件预测其功能,并构建系统进化树。结果显示成功获得了长1042bp的GPRV VP7蛋白基因(GenBank登录号GU188284)。经生物信息学分析,此序列包含1个981bp的完整开放阅读框,编码326个氨基酸;预测GPRV VP7蛋白理论相对分子质量为37354.8u,等电点为4.76,半衰期为30h,不稳定系数为26.71,总平均亲水性为-0.015,疏水性介于-2.344~3.567;1—24位氨基酸可能是信号肽序列;跨膜结构分析表明VP7蛋白有2个跨膜区,其N端和C端都位于病毒膜外区;抗原表位预测显示VP7蛋白有12个抗原决定簇;结构预测显示其可能包含2个N-糖基化作用位点,5个蛋白激酶C磷酸化作用位点、4个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化作用位点、1个酪氨酸激酶磷酸化作用位点、4个N-豆蔻酰化位点、1个原核膜脂蛋白脂附着点和1个革兰氏阳性球菌表面蛋白‘锚’六肽。系统进化树分析显示GPRV VP7基因与人A组轮状病毒VP7基因的进化距离最近。本研究成功获得了GPRV VP7基因,为今后研究此基因的生物学功能以及建立该病毒的诊断方法奠定基础。 展开更多
关键词 大熊猫轮状病毒 VP7基因 克隆 生物信息学分析
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玉米赤霉烯酮的毒性及生物降解研究进展 被引量:20
8
作者 蔡雨函 胡延春 +2 位作者 赵黑成 张莎莎 谭辉 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第5期102-105,共4页
玉米赤霉烯酮是由某些真菌产生的次级代谢产物,具有极强的毒性,给人类和动物健康造成了极大的危害,该毒素的解毒与去毒一直是研究的热点。论文结合国内外的最新研究结果,对玉米赤霉烯酮的生殖发育毒性、免疫毒性、肝肾毒性、对内分泌系... 玉米赤霉烯酮是由某些真菌产生的次级代谢产物,具有极强的毒性,给人类和动物健康造成了极大的危害,该毒素的解毒与去毒一直是研究的热点。论文结合国内外的最新研究结果,对玉米赤霉烯酮的生殖发育毒性、免疫毒性、肝肾毒性、对内分泌系统的影响及生物降解方面的研究进展进行了综述,阐明了玉米赤霉烯酮的危害及去除玉米赤霉烯酮的重要性及紧迫性,为进一步研究生物转化玉米赤霉烯酮提供参考资料。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮 真菌毒素 生物降解
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一株猪源棒状杆菌的分离及其16S rRNA基因分析鉴定 被引量:10
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作者 李敏 田明星 +3 位作者 邹年莉 王远萍 柳萍 黄勇 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第10期76-81,共6页
四川某商品猪场仔猪出现以体温升高,背、腹和腿部皮肤发绀,淋巴结出血肿大,肺、脾脏出血、化脓为主要特征的疾病。通过对分离细菌的纯化培养、形态学观察、生化试验、致病性试验和药物敏感性试验,鉴定出一株致病菌。应用通用引物对其16S... 四川某商品猪场仔猪出现以体温升高,背、腹和腿部皮肤发绀,淋巴结出血肿大,肺、脾脏出血、化脓为主要特征的疾病。通过对分离细菌的纯化培养、形态学观察、生化试验、致病性试验和药物敏感性试验,鉴定出一株致病菌。应用通用引物对其16S rRNA基因进行克隆和序列分析,序列在NCBI上进行BLAST比对,选择同源性较高的棒状杆菌属中25株不同种的菌株16S rRNA序列进行比对分析,构建遗传进化树。分离纯化的细菌在鲜血琼脂平板厌氧条件下生长良好,为革兰氏染色阳性杆状菌,能发酵部分糖类,能致死小白鼠,对头孢类抗生素敏感,16S rRNA序列与棒状杆菌属细菌的同源性最高,在78.2%-98.0%之间,遗传进化树分析结果表明,该菌株与棒状杆菌属细菌属于同一分类群,分离菌鉴定为棒状杆菌。 展开更多
关键词 棒状杆菌 分离 鉴定 16SrRNA 同源性分析
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甘肃棘豆中降解苦马豆素内生细菌的筛选与鉴定 被引量:5
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作者 胡延春 刘鹏 +2 位作者 赵春蕊 郑传廷 刘玲 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期521-526,共6页
为研究甘肃棘豆(Oxytropis kansuensis Bunge)中降解疯草毒素——苦马豆素的内生细菌,采用选择性富集培养的方法,以苦马豆素作为唯一碳源,从甘肃棘豆内生细菌中筛选到1株苦马豆素降解菌,命名为Ab.在摇床转速为150 r·min-1、28℃条... 为研究甘肃棘豆(Oxytropis kansuensis Bunge)中降解疯草毒素——苦马豆素的内生细菌,采用选择性富集培养的方法,以苦马豆素作为唯一碳源,从甘肃棘豆内生细菌中筛选到1株苦马豆素降解菌,命名为Ab.在摇床转速为150 r·min-1、28℃条件下培养30 h,菌株Ab对质量浓度为100 mg·L-1苦马豆素的降解率为11.577 1%;延长培养时间并不能提高其降解苦马豆素的能力,但可耐受高质量浓度(1 g·L-1)的苦马豆素.通过形态学、生理生化试验和16S rDNA序列比对分析对Ab进行鉴定,结果表明,菌株Ab为革兰阴性短小杆菌,在LB平板上菌落呈圆形,中心凸起,边缘整齐,乳白色,表面光滑,属于短波单胞杆菌属(Brevundi monas),与缺陷短波单胞菌(Brevundi monas diminuta)同源性为100%.说明甘肃棘豆中存在降解苦马豆素的内生细菌Brevundi monas diminutaAb;降解苦马豆素的内生细菌可能与产生苦马豆素的内生真菌共同维持疯草中苦马豆素的动态平衡. 展开更多
关键词 甘肃棘豆 内生细菌 苦马豆素 生物降解 缺陷短波单胞菌
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鸡腿菇菌糠对天府肉鸭生长性能及免疫功能的影响 被引量:14
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作者 张雅雪 王涛 +3 位作者 殷中琼 贾仁勇 周瑞平 唐代云 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第11期14-18,共5页
本试验旨在研究肉鸭日粮中添加鸡腿菇菌糠对肉鸭生长性能及免疫功能的影响。试验选用320只1日龄健康天府肉鸭,随机分成4组,对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别饲喂在基础日粮中添加2%、4%和6%鸡腿菇菌糠的日粮。结果表明,与对照... 本试验旨在研究肉鸭日粮中添加鸡腿菇菌糠对肉鸭生长性能及免疫功能的影响。试验选用320只1日龄健康天府肉鸭,随机分成4组,对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别饲喂在基础日粮中添加2%、4%和6%鸡腿菇菌糠的日粮。结果表明,与对照组相比,在肉鸭日粮中添加鸡腿菇菌糠,肉鸭的日采食量显著提高(P<0.05);在试验前2周肉鸭的日增重显著提高(P<0.05),后2周对肉鸭的日增重影响不大(P>0.05);饲料的转化率略微降低(P>0.05)。鸡腿菇菌糠对肉鸭的免疫器官指数和淋巴细胞增殖反应无显著影响(P>0.05)。因此,在肉鸭日粮中添加2%、4%、6%的鸡腿菇菌糠均对肉鸭的生长性能具有一定的促进作用,但对免疫功能无显著影响,综合各项指标,在肉鸭日粮中添加2%的鸡腿菇菌糠效果最好。 展开更多
关键词 鸡腿菇菌糠 天府肉鸭 生长性能 免疫功能
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1株髓细胞瘤型J亚群禽白血病病毒感染性克隆的构建与病毒拯救 被引量:5
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作者 林艳 夏静 +6 位作者 邹年莉 郭明萍 王富妍 赵扬 文心田 曹三杰 黄勇 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期754-759,共6页
为构建髓细胞瘤型J亚群禽白血病病毒(avian leukosis virus,ALV-J)SCGS-1株前病毒cDNA分子标记感染性克隆,根据SCGS-1全基因测序结果,分3段进行全序列PCR扩增,顺次连接至pUC19,构建SCGS-1株前病毒cDNA感染性克隆pUC-SCGS;通过重叠PCR方... 为构建髓细胞瘤型J亚群禽白血病病毒(avian leukosis virus,ALV-J)SCGS-1株前病毒cDNA分子标记感染性克隆,根据SCGS-1全基因测序结果,分3段进行全序列PCR扩增,顺次连接至pUC19,构建SCGS-1株前病毒cDNA感染性克隆pUC-SCGS;通过重叠PCR方法对SCGS-1基因组进行沉默突变,在4 684位点引入SalⅠ位点,构建SCGS-1株分子标记感染性克隆pUC-△SCGS;以pUC-SCGS和pUC-△SCGS重组质粒转染CEF进行病毒拯救,并通过PCR、间接免疫荧光与双抗体夹心ELISA进行拯救病毒检测。结果显示,成功构建pUC-SCGS与pUC-△SCGS重组质粒,转染后盲传第3代、第4代细胞与上清中均检测到拯救病毒;间接免疫荧光与抗原ELISA方法分别在CEF细胞和上清中检测到ALV-J抗原。成功拯救获得分子标记ALV-J。 展开更多
关键词 髓细胞瘤型 J亚群禽白血病病毒 感染性克隆 分子标记 病毒拯救
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含水率对发酵饲料品质的影响 被引量:10
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作者 周梦佳 李涛 +4 位作者 曾燕 吴海燕 孙彦 倪学勤 曾东 《中国饲料》 北大核心 2013年第7期12-14,共3页
本试验用乳酸杆菌对基础饲料进行固态发酵,分析含水率对发酵饲料pH、乳酸含量、干物质回收率及乳酸杆菌数量变化的影响。试验设A、B、C、D和E共5个处理,含水率分别为25%、30%、35%、40%和45%,每个处理3个重复。结果表明:D组pH... 本试验用乳酸杆菌对基础饲料进行固态发酵,分析含水率对发酵饲料pH、乳酸含量、干物质回收率及乳酸杆菌数量变化的影响。试验设A、B、C、D和E共5个处理,含水率分别为25%、30%、35%、40%和45%,每个处理3个重复。结果表明:D组pH降低最快,乳酸杆菌数量最高;c组乳酸含量最高;干物质回收率与水分含量呈负相关。综合考虑,发酵饲料最适含水率为35%~40%。 展开更多
关键词 发酵饲料 含水率 乳酸杆菌 PH 乳酸
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当归补血汤对肉鸡免疫脏器指数和红细胞免疫功能的影响 被引量:11
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作者 夏春丽 殷中琼 +4 位作者 刘宇 范静 李艳华 徐明祥 申义君 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第18期11100-11102,共3页
[目的]研究当归补血汤对肉鸡免疫脏器指数和红细胞免疫功能的影响。[方法]选取100只1日龄健康三黄鸡,随机分成5组。7日龄时,通过滴鼻的方法接种鸡新城疫疫苗,并分别在试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组鸡的饮水中添加2%、5%和10%的当归补血汤,Ⅳ组在饮... [目的]研究当归补血汤对肉鸡免疫脏器指数和红细胞免疫功能的影响。[方法]选取100只1日龄健康三黄鸡,随机分成5组。7日龄时,通过滴鼻的方法接种鸡新城疫疫苗,并分别在试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组鸡的饮水中添加2%、5%和10%的当归补血汤,Ⅳ组在饮水中添加2%的黄芪多糖,Ⅴ组为空白对照组。分别于14、21和28日龄进行颈静脉采血和剖检,测定各免疫器官脏器指数、红细胞E-C3bRR的花环率和红细胞免疫复合物E-ICR的花环率。试验期28 d。[结果]当归补血汤对胸腺免疫脏器指数无显著影响,能显著提高脾脏和法氏囊脏器指数。在外周和体液免疫功能方面,以添加10%的当归补血汤效果最佳,其对机体的外周免疫和体液免疫效果均优于2%的黄芪多糖。[结论]当归补血汤对鸡的免疫脏器指数及红细胞免疫功能有显著的影响作用,可作为免疫增强剂加以应用。 展开更多
关键词 当归补血汤 免疫器官指数 红细胞免疫
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扭角羚肺炎克雷伯氏菌的分离鉴定 被引量:9
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作者 郝中香 廖红 +9 位作者 刘丹 郭玲 杨绍林 文彩芳 张曼丽 罗露 郗立新 杨艳 谌利民 颜其贵 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第1期203-208,共6页
本试验旨在报告四川省野生扭角羚自然生存过程中致病性细菌的检测及生物学特征。试验对发病死亡扭角羚病变组织进行细菌学检查及分离,对分别从肝脏、脾脏和肺脏分离得到的4株优势菌进行形态特征、生化特性和16SrDNA分子鉴定,判定为肺炎... 本试验旨在报告四川省野生扭角羚自然生存过程中致病性细菌的检测及生物学特征。试验对发病死亡扭角羚病变组织进行细菌学检查及分离,对分别从肝脏、脾脏和肺脏分离得到的4株优势菌进行形态特征、生化特性和16SrDNA分子鉴定,判定为肺炎克雷伯氏菌。这4株菌对供试小白鼠均有致病性。测其LD50,分别为2.9×107、2.9×107、4.5×107和1.1×108 CFU/只。4株分离菌对供试的先锋霉素等敏感,对阿米卡星等中度敏感,对红霉素等耐药。推测这4株肺炎克雷伯氏菌是导致扭角羚死亡的主要病原菌。 展开更多
关键词 扭角羚 肺炎克雷伯氏菌 分离鉴定 LD50
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基于H蛋白基因的犬瘟热病毒遗传变异分析 被引量:6
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作者 郭玲 雷燕 +3 位作者 陈世界 王成东 杨晓龙 颜其贵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期98-104,共7页
犬瘟热是犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)感染犬和其他食肉动物造成的多发性、致死性传染病,本文从分子水平上探讨CDV遗传进化特性、变异情况与流行规律之间的关系。通过收集2002—2010年在中国地区分离的14株CDV野毒株、2006—... 犬瘟热是犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)感染犬和其他食肉动物造成的多发性、致死性传染病,本文从分子水平上探讨CDV遗传进化特性、变异情况与流行规律之间的关系。通过收集2002—2010年在中国地区分离的14株CDV野毒株、2006—2007年在全球各地分离的12株CDV野毒株以及从不同宿主分离的12株CDV野毒株和4株疫苗株,将其分为4组,将前3组野毒株分别与国内外正在使用的4株疫苗株的H基因进行遗传变异分析。分析发现,CDV野毒株与疫苗株间H蛋白基因的核苷酸相似性为86.2%~92.1%,其氨基酸相似性为89.1%~91.9%;H基因的584位的天冬酰胺糖基化位点是Asia-Ⅰ型CDV所特有的;H蛋白3555区域的非同义氨基酸替换概率较高。作者推测H蛋白抗原变异可能造成弱毒疫苗免疫效力降低,不能为某些CDV株的感染提供完全有效的保护。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 遗传变异 基因型
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山羊地方性鼻内腺瘤病毒和内源性逆转录病毒gag变异区的克隆与分析 被引量:5
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作者 王小玉 冯迎春 +5 位作者 颜其贵 张国俊 陈瑜 韩国全 任玉鹏 郭万柱 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第1期29-32,共4页
根据病毒gag变异区的两端设计引物,PCR扩增ENTV及ERVs的gag变异区,TA克隆并测序,经比对分析发现,在ERVs的783位~803位的"CCT"重复序列,编码多聚脯氨酸"PPPPPPP",对应在ENTV gag中存在缺失突变和点突变,编码氨基酸为"PSL",生物信... 根据病毒gag变异区的两端设计引物,PCR扩增ENTV及ERVs的gag变异区,TA克隆并测序,经比对分析发现,在ERVs的783位~803位的"CCT"重复序列,编码多聚脯氨酸"PPPPPPP",对应在ENTV gag中存在缺失突变和点突变,编码氨基酸为"PSL",生物信息学预测该区域的变异位于一个重要的抗原决定簇中,对gag在ENTV和ERVs中的功能有较大影响,为进一步研究gag的抗原性及相关免疫学检测方法的建立奠定基础。 展开更多
关键词 山羊 鼻内肿瘤 山羊地方性鼻内肿瘤病毒 羊源内源性逆转录病毒 GAG
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油樟叶挥发油乳剂和醑剂的制备及其对空气的消毒效果研究 被引量:5
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作者 张笑乐 向楠 +4 位作者 殷中琼 尚永祥 夏春丽 申义君 刘涛 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第21期12909-12911,共3页
[目的]研究油樟[Cinnamomum longepaniculatum(Gamble)N.Chao]叶挥发油乳剂和醑剂的空气消毒效果。[方法]制备稳定的油樟叶挥发油乳剂和醑剂,液体喷雾消毒动物实验房15min,消毒后营养琼脂平板采样30min。37℃培养48h后进行空气中菌落计... [目的]研究油樟[Cinnamomum longepaniculatum(Gamble)N.Chao]叶挥发油乳剂和醑剂的空气消毒效果。[方法]制备稳定的油樟叶挥发油乳剂和醑剂,液体喷雾消毒动物实验房15min,消毒后营养琼脂平板采样30min。37℃培养48h后进行空气中菌落计数。[结果]用浓度为2%、8%和16%的油樟叶挥发油乳剂消毒后空气中菌落数显著少于空气对照(P<0.05),浓度为16%的剂量组细菌平均消亡率达84%;油樟叶挥发油醑剂各剂量组空气中菌落数均极显著少于溶剂对照(P<0.01),浓度为4%的剂量组细菌平均消亡率达91%。不同浓度的2种制剂中4%的醑剂消毒效果最佳。[结论]醑剂整体消毒效果高于乳剂,醑剂中低浓度效果相对较好,可替代84消毒液等其他消毒液。 展开更多
关键词 油樟叶 挥发油 乳剂 醑剂 空气消毒
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鲁氏耶尔森氏菌外膜蛋白ompF基因的分子克隆、生物信息学与免疫原性分析 被引量:2
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作者 王二龙 秦振阳 +3 位作者 汪开毓 陈德芳 王均 贺扬 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期24-34,共11页
为筛选潜在的保护性抗原基因研制鲁氏耶尔森氏菌(Yersinia ruckeri)基因工程疫苗,实验利用特异性引物扩增分离自斑点叉尾(Ictalurus punctatus)的Y.ruckeri外膜蛋白omp F基因并对其进行分子克隆,应用相关软件和程序对其核苷酸及氨基... 为筛选潜在的保护性抗原基因研制鲁氏耶尔森氏菌(Yersinia ruckeri)基因工程疫苗,实验利用特异性引物扩增分离自斑点叉尾(Ictalurus punctatus)的Y.ruckeri外膜蛋白omp F基因并对其进行分子克隆,应用相关软件和程序对其核苷酸及氨基酸序列进行生物信息学分析,并进行了omp F蛋白的表达和免疫原性检测。结果显示,omp F基因全长1 095 bp(Gen Bank登录号KP159420),包含一个编码364个氨基酸的完整开放阅读框,其氨基酸序列具有极高保守性,与Y.ruckeri外膜穿孔蛋白omp F(Gen Bank登录号ADK27779.1)亲缘关系最近,序列一致性为99.2%,进化树聚为一支;具有1个革兰氏阴性菌穿孔蛋白保守结构域,存在1个信号肽和1个跨膜区,是一种跨膜蛋白;具有12个与免疫相关的抗原决定簇区域。SDS-PAGE分析发现该蛋白主要以包涵体形式表达在沉淀,经Western-bolt显示omp F蛋白具有较好的免疫原性。以上结果表明omp F基因可作为Y.ruckeri基因工程疫苗的候选抗原基因。 展开更多
关键词 鲁氏耶尔森氏菌 外膜蛋白 ompF基因 分子克隆 生物信息学 免疫原性
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赤腹松鼠肠道细菌分离鉴定及耐药性分析 被引量:2
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作者 权自芳 刘丹 +2 位作者 杨绍林 张蕾 颜其贵 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第1期125-129,共5页
采用松鼠源肠道样品进行细菌分离培养和细菌16SrRNA基因PCR扩增、测序分析,并进行纸片扩散法药敏试验。结果显示,在33只赤腹松鼠肠道中分离出117株细菌,赤腹松鼠肠道内细菌类群主要有葡萄球菌属(金色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、松鼠葡萄球... 采用松鼠源肠道样品进行细菌分离培养和细菌16SrRNA基因PCR扩增、测序分析,并进行纸片扩散法药敏试验。结果显示,在33只赤腹松鼠肠道中分离出117株细菌,赤腹松鼠肠道内细菌类群主要有葡萄球菌属(金色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、松鼠葡萄球菌)、埃希菌属(大肠埃希菌)、芽胞杆菌属(蜡样芽胞杆菌、Weihenstephanensis芽胞杆菌、苏云金芽胞杆菌、Samanii芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌)、肠球菌属(粪肠球菌)、克雷伯菌属(肺炎克雷伯菌)、假单胞菌属(荧光假单胞菌)、明串珠菌属(肠膜样明串珠菌);粪肠球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌对大部分试验药物高度敏感,其他细菌对部分受试药物耐药。赤腹松鼠肠道细菌种群具有多样性,且存在天然耐药现象。本研究为进一步研究野生动物体内细菌携带天然耐药基因提供了素材,也为森林旅游开发的安全性评估及环境保护提供了参考。 展开更多
关键词 赤腹松鼠 肠道细菌 分离鉴定 耐药性分析
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