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乳酸锌对猪空肠上皮细胞IPEC-J2增殖及相关调控基因mRNA表达的影响 被引量：10
1
作者 韩国全 余冰 +6 位作者 陈代文 相振田 亓宏伟 陈洪 毛倩 毛湘冰 黄志清 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期740-747,共8页
旨在探讨乳酸锌对猪空肠上皮细胞增殖及相关调控基因ZnT2、DMT1、IREG-1、MT1和ZIP4mRNA表达的影响。用乳酸锌的锌浓度分别为50、100、150、200mg.L-1的培养基培养IPEC-J2细胞,采用比色法测定分析细胞增殖变化;用实时荧光定量RT-PCR方... 旨在探讨乳酸锌对猪空肠上皮细胞增殖及相关调控基因ZnT2、DMT1、IREG-1、MT1和ZIP4mRNA表达的影响。用乳酸锌的锌浓度分别为50、100、150、200mg.L-1的培养基培养IPEC-J2细胞,采用比色法测定分析细胞增殖变化;用实时荧光定量RT-PCR方法检测ZnT2、DMT1、IREG-1、MT1及ZIP4mRNA表达,以TBPmRNA的表达水平作为内参对照。在细胞培养前36h,乳酸锌对IPEC-J2细胞基本没有影响,随锌浓度递增细胞增殖幅度升高;乳酸锌处理IPEC-J2细胞后,ZnT2、DMT1、IREG-1及MT1mRNA表达随锌浓度增高而升高,ZIP4mRNA表达则随锌浓度增高而降低。添加乳酸锌可以促进IPEC-J2细胞增殖,上调ZnT2、DMT1、IREG-1、MT1mRNA表达,下调ZIP4mRNA表达。 展开更多
关键词 乳酸锌 猪空肠上皮细胞IPEC-J2 MRNA表达 相关调控基因
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玉米芯-柑橘渣混合青贮料对肉牛生长性能和血清生化指标的影响 被引量：12
2
作者 志莉 薛白 +3 位作者 王之盛 蔡义民 刘振龙 邓华 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期647-653,共7页
本文旨在研究玉米芯-柑橘渣混合青贮料对肉牛生长性能、养分消化率和血清生化指标的影响。选择24头平均体重(173.13±5.10)kg的健康西门塔尔杂种肉牛,随机分为4个处理,每个处理6个重复,每个重复1头牛,饲养时间为50 d。4个处理分别是... 本文旨在研究玉米芯-柑橘渣混合青贮料对肉牛生长性能、养分消化率和血清生化指标的影响。选择24头平均体重(173.13±5.10)kg的健康西门塔尔杂种肉牛,随机分为4个处理,每个处理6个重复,每个重复1头牛,饲养时间为50 d。4个处理分别是:1)对照组(CON),40%精料+60%牛鞭草;2)试验1组(S20),40%精料+40%牛鞭草+20%青贮料(玉米芯-柑橘渣混合青贮料);3)试验2组(S30),40%精料+30%牛鞭草+30%青贮料;4)试验3组(S40),40%精料+20%牛鞭草+40%青贮料。结果表明,S20组平均日增重最高,比CON组提高17.14%(P<0.01),S30组干物质采食量最高,比CON组提高14.51%(P<0.05),S20组肉牛料重比最低(P>0.05)。4个处理间干物质、粗蛋白质、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的表观消化率无显著差异(P>0.05),但是S20组有机物的消化率显著高于CON组(P<0.05)。各处理间总蛋白、葡萄糖含量无显著差异(P>0.05),3个试验组尿素氮含量均极显著低于CON组(P<0.01),分别降低了23.09%、26.10%和30.32%。由此可知,玉米芯-柑橘渣混合青贮料替代部分牛鞭草能提高肉牛生长性能,主要表现在提高肉牛采食量、平均日增重和养分消化率上。玉米芯-柑橘渣混合青贮料的添加量以占饲粮的20%为宜。 展开更多
关键词 肉牛 玉米芯 柑橘渣 青贮 生长性能 养分消化率 血清生化指标
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橙皮苷和绿原酸的体内外抗氧化效应研究 被引量：24
3
作者 刘英 王之盛 +1 位作者 周安国 蔡景义 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第23期196-199,共4页
目的:考察橙皮苷和绿原酸的体内外抗氧化效应。方法:体外实验建立氧自由基模型,采用邻苯三酚自氧化法,产生超氧阴离子;采用H2O2/Fe2+体系,通过Fenton反应产生羟自由基。测定指标为氧自由基清除率和IC50(半数抑制浓度)。体内实验以28日... 目的:考察橙皮苷和绿原酸的体内外抗氧化效应。方法:体外实验建立氧自由基模型,采用邻苯三酚自氧化法,产生超氧阴离子;采用H2O2/Fe2+体系,通过Fenton反应产生羟自由基。测定指标为氧自由基清除率和IC50(半数抑制浓度)。体内实验以28日龄断奶仔猪为动物模型,在基础日粮中添加橙皮苷(300mg/kg)、绿原酸(300mg/kg),进行为期4周的饲养实验。实验结束测定仔猪血浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、抑制羟自由基能力、抗超氧阴离子能力和丙二醛(MDA)含量。结果:体外实验表明橙皮苷和绿原酸对氧自由基均有抑制作用,存在剂量效应关系,且绿原酸的效果优于橙皮苷;绿原酸显著提高仔猪血浆中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性以及抑制羟自由基能力(P<0.05);橙皮苷组显著降低血浆丙二醛(MDA)含量(P<0.05)。结论:橙皮苷和绿原酸均具有显著的体内外抗氧化效应,绿原酸的抗氧化效果优于橙皮苷。 展开更多
关键词 橙皮苷 绿原酸 氧自由基
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新生家兔空肠上皮细胞的体外分离培养与鉴定 被引量：8
4
作者 范斌 余冰 +2 位作者 田刚 张凯 刘汉中 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1570-1578,共9页
本试验旨在建立家兔空肠上皮细胞的体外分离培养方法，为进一步研究外源物质对家兔小肠上皮结构功能的影响及其作用机制提供体外模型。试验以新生新西兰白兔（1~3日龄）空肠为研究对象，利用由链霉蛋白酶E、胶原酶Ⅳ和二硫苏糖醇组成的... 本试验旨在建立家兔空肠上皮细胞的体外分离培养方法，为进一步研究外源物质对家兔小肠上皮结构功能的影响及其作用机制提供体外模型。试验以新生新西兰白兔（1~3日龄）空肠为研究对象，利用由链霉蛋白酶E、胶原酶Ⅳ和二硫苏糖醇组成的混合消化液消化空肠组织，通过2%山梨醇密度梯度离心来富集隐窝细胞团。运用相差消化法和差速贴壁法纯化家兔空肠上皮细胞，并从形态学观察、碱性磷酸酶染色、细胞角蛋白8免疫荧光染色和肠上皮细胞标志物基因表达分析4个方面鉴定家兔空肠上皮细胞。结果表明：应用链霉蛋白酶E、胶原酶Ⅳ和二硫苏糖醇混合消化液可获得大量的细胞团，细胞团12 h贴壁并向周围辐射生长，生长的细胞呈典型的三角形或多角形，5~7 d融合成片，呈单层生长、互不重叠；原代细胞能够进行传代、纯化；经碱性磷酸酶染色和细胞角蛋白8免疫荧光染色均呈阳性；可表达肠上皮细胞标志蛋白（脂肪酸结合蛋白2、肠肽酶、E-钙黏蛋白、紧密连接蛋白-4）的基因。以上结果表明，本试验成功建立了家兔空肠上皮细胞的体外分离培养方法。 展开更多
关键词 新西兰白兔 空肠上皮细胞 原代培养 鉴定
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氨化银合欢对南江黄羊生长性能和血液指标的影响 被引量：10
5
作者 杨宇衡 王之盛 +1 位作者 蔡义民 赖松家 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期835-841,共7页
旨在研究精料中添加20%的氨化或风干银合欢叶粉替代部分常规蛋白原料对南江黄羊生长性能、养分消化率及血液指标的影响。将15头6月龄,体质量为(20.38±1.51)kg的去势南江黄羊,采用对比设计原则,随机分为3个处理,每个处理5头羊。对... 旨在研究精料中添加20%的氨化或风干银合欢叶粉替代部分常规蛋白原料对南江黄羊生长性能、养分消化率及血液指标的影响。将15头6月龄,体质量为(20.38±1.51)kg的去势南江黄羊,采用对比设计原则,随机分为3个处理,每个处理5头羊。对照组精料为常规原料配制,试验组为氨化银合欢组和风干银合欢组,试验组精料分别添加20%氨化银合欢叶粉和20%风干银合欢叶粉替代部分常规蛋白原料,各组精料采用等能等氮原则配制,试验期共28 d。结果表明,精料中添加氨化或风干银合欢叶粉试验组南江黄羊均无不良症状;添加氨化银合欢叶粉提高了日增体质量(P=0.01),日粮料重比(F/G)最低(P>0.05);氨化银合欢组干物质、粗蛋白、有机物、中性洗涤纤维的表观消化率略有提高,对照组次之,风干银合欢组最低(P>0.05),且氨化银合欢组酸性洗涤纤维的消化率显著高于风干银合欢组(P<0.05)。试验组羊血液常规指标均处于正常范围内,组间差异不显著(P>0.05)。血清尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)、谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)、三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)在两组间差异不显著(P>0.05),氨化银合欢组白蛋白(ALB)水平显著提高(P<0.05)。结果提示,饲喂20%的氨化银合欢叶粉配制的精料对南江黄羊T3和T4水平无显著影响,并可通过提高日粮营养物质的消化率和蛋白质利用效率改善其生长性能。 展开更多
关键词 南江黄羊 氨化银合欢 生长性能 养分消化率 血液指标
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苏氨酸对体外培养感染伪狂犬病毒猪空肠上皮细胞免疫相关基因表达的影响 被引量：4
6
作者 韩国全 余冰 +4 位作者 陈代文 相振田 陈渝 陈洪 毛倩 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期487-496,共10页
本研究旨在探讨苏氨酸对体外培养感染伪狂犬病毒(PRV)猪空肠上皮细胞免疫相关基因表达的影响。试验选用IPEC-J2细胞为细胞模型,分为4个处理,对照组为未经PRV感染、苏氨酸浓度53.45 mg/L,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组为试验组,均经PRV感染,苏氨酸浓度分... 本研究旨在探讨苏氨酸对体外培养感染伪狂犬病毒(PRV)猪空肠上皮细胞免疫相关基因表达的影响。试验选用IPEC-J2细胞为细胞模型,分为4个处理,对照组为未经PRV感染、苏氨酸浓度53.45 mg/L,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组为试验组,均经PRV感染,苏氨酸浓度分别为53.45、106.90、160.35 mg/L,每组3个重复,每个重复4孔。37℃、5%CO2培养后1、6、12、24 h每组取1个重复采集细胞,用实时荧光定量PCR方法检测白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)、白介素15(IL-15)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA表达量。结果表明:1)PRV感染极显著降低了IL-1βmRNA表达量(P=0.001),苏氨酸水平(P=0.830)、时间与苏氨酸水平交互作用(P=0.249)的影响均不显著;2)PRV感染对IL-6 mRNA表达量影响不显著(P=0.162),随苏氨酸水平升高,IL-6 mRNA表达量极显著地先升高后降低(P=0.002),时间与苏氨酸水平交互作用的影响显著(P=0.012);3)PRV感染极显著提高了IL-15 mRNA表达量(P=0.000),提高苏氨酸水平极显著提高了IL-15 mRNA表达量(P=0.000),时间与苏氨酸水平交互作用的影响亦极显著(P=0.000);4)PRV感染极显著提高了TNF-αmRNA表达量(P=0.000),苏氨酸水平(P=0.113)、时间与苏氨酸水平交互作用(P=0.195)的影响均不显著;5)PRV感染极显著提高了TGF-β1 mRNA表达量(P=0.000),时间与苏氨酸水平交互作用的影响显著(P=0.015),苏氨酸水平的影响不显著(P=0.055)。结果提示,补充苏氨酸对感染PRV的IPEC-J2细胞先天性免疫功能具有分子表达水平的调控作用,总体上能够抑制IL-1β、TNF-α、TGF-β1基因表达,加强IL-6、IL-15基因表达,但影响具有时间效应。 展开更多
关键词 苏氨酸 猪空肠上皮细胞 伪狂犬病毒 免疫相关基因
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菌丝霉素的串联表达及其菌内抑菌活性分析
7
作者 管韬 余冰 +5 位作者 陈代文 韩国全 黄志清 毛湘冰 郑萍 毛倩 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期620-626,共7页
构建菌丝霉素(Plectasin,PT)的串联表达菌株,研究各串联体融合表达产物的菌内抑菌活性。根据大肠杆菌表达系统对密码子的偏爱性,人工合成优化后PT基因,构建表达质粒pGEX-PT/pe;并利用同尾酶法分别构建PT基因二聚体表达质粒pGEX-PT/pes2... 构建菌丝霉素(Plectasin,PT)的串联表达菌株,研究各串联体融合表达产物的菌内抑菌活性。根据大肠杆菌表达系统对密码子的偏爱性,人工合成优化后PT基因,构建表达质粒pGEX-PT/pe;并利用同尾酶法分别构建PT基因二聚体表达质粒pGEX-PT/pes2与PT基因三聚体表达质粒pGEX-PT/pes3;然后分别将各表达质粒转化入BL21(DE3)进行IPTG的诱导表达,对各表达蛋白进行SDS-PAGE、Western Blot分析,并测定各融合表达产物的菌內抑菌活性。测序结果表明,串联体扩增到产物大小分别为135、261和387bp的目的基因片段;SDS-PAGE分析各串联表达菌表达的融合蛋白相对分子质量分别约为30、35和40ku,其产量分别占细菌总蛋白的64.5%、26.4%和25.3%。Western Blot分析表明各表达蛋白均具有良好的免疫反应性;菌内抑菌结果显示,各融合表达产物均表现对DH5α的弱抑制作用,但随PT基因串联数的增加,融合表达产物的抑菌效果显著提高,且抑菌时间延长。各串联表达菌株的成功构建与其表达产物的宿主菌抑制作用,为菌丝霉素高效抑菌产品的开发奠定了基础。 展开更多
关键词 菌丝霉素 串联表达 菌内抑菌活性
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第二信使环腺苷二磷酸核糖介导Ca^(2+)释放的作用机制
8
作者 李雪吟 冯琳 +2 位作者 刘扬 姜俊 周小秋 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期2043-2047,共5页
环腺苷二磷酸核糖(cADPR)是多种细胞、组织和器官内调节Ca2+浓度的第二信使。cADPR依靠胞内的兰尼碱受体(RyR)的选通性对Ca2+释放进行调节,即:通过底物辅酶Ⅰ(NAD+)与产物cADPR跨膜穿梭,或配体介导胞外酶CD38的内化。本文主要综述了cADP... 环腺苷二磷酸核糖(cADPR)是多种细胞、组织和器官内调节Ca2+浓度的第二信使。cADPR依靠胞内的兰尼碱受体(RyR)的选通性对Ca2+释放进行调节,即:通过底物辅酶Ⅰ(NAD+)与产物cADPR跨膜穿梭,或配体介导胞外酶CD38的内化。本文主要综述了cADPR的合成及其介导Ca2+释放的作用机制。 展开更多
关键词 环腺苷二磷酸核糖 兰尼碱受体 CD38 Ca2+释放
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