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重金属在细菌耐药产生中的作用与机制
1
作者 刘娜 张嘉宝 +1 位作者 程安春 刘马峰 《中国家禽》 北大核心 2025年第11期108-116,共9页
随着化工业的发展,重金属应用和排放造成严峻的环境污染问题,不仅对动植物以及人类健康造成严重威胁,而且对细菌耐药性也有重要作用,但重金属在细菌耐药形成过程中的作用长期被忽视。文章对重金属在细菌耐药产生中的作用与机制进行了综... 随着化工业的发展,重金属应用和排放造成严峻的环境污染问题,不仅对动植物以及人类健康造成严重威胁,而且对细菌耐药性也有重要作用,但重金属在细菌耐药形成过程中的作用长期被忽视。文章对重金属在细菌耐药产生中的作用与机制进行了综述,包括重金属污染的来源以及重金属对细菌的危害和诱导细菌耐药产生机制,以期为更全面地理解重金属在细菌耐药产生中的作用与机制提供参考,为我国正在进行的《遏制微生物耐药国家行动计划》提供决策依据。 展开更多
关键词 细菌 耐药性 重金属 共选择机制
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家禽免疫失败的原因与对策 被引量：5
2
作者 徐大为 周春宇 +1 位作者 程安春 汪铭书 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2004年第10期56-57,共2页
关键词 家禽 免疫失败 疫苗 免疫程序 免疫抑制性因素
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免疫荧光技术在家禽传染病研究和诊断中的应用 被引量：5
3
作者 沈福晓 程安春 汪铭书 《中国家禽》 北大核心 2009年第1期30-34,共5页
介绍免疫荧光技术的发展过程,阐述其在抗原定位、组织亲嗜性和蛋白质功能等方面的研究进展,展望免疫荧光技术在家禽传染病研究和诊断中的应用前景,旨在为家禽传染病的分子生物学研究工作提供参考。
关键词 免疫荧光技术 家禽传染病 抗原定位 组织亲嗜性 蛋白质功能
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实验动物CAR杆菌16SrRNA基因PCR监测方法的建立 被引量：3
4
作者 范薇 隋丽华 +5 位作者 刘大伟 赵爽 张慧洋 赵源 汪舟佳 刘永梅 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2010年第4期308-311,I0007,共5页
目的建立CAR杆菌的PCR监测方法 ,筛查国内部分实验动物样本中CAR杆菌携带状况。方法利用CAR杆菌的特有16SrRNA基因序列片段267bp设计引物,通过从日本实验动物中央研究所获取的CAR标准株DNA,建立实验动物CAR杆菌16SrRNA基因PCR监测方法... 目的建立CAR杆菌的PCR监测方法 ,筛查国内部分实验动物样本中CAR杆菌携带状况。方法利用CAR杆菌的特有16SrRNA基因序列片段267bp设计引物,通过从日本实验动物中央研究所获取的CAR标准株DNA,建立实验动物CAR杆菌16SrRNA基因PCR监测方法。结果利用建立的CAR杆菌16SrRNA基因PCR监测方法对国内455份实验动物样本进行筛查,未检出CAR杆菌感染。结论建立了敏感性好,特异性高的实验动物CAR杆菌PCR监测方法 ,未见动物携带CAR杆菌。 展开更多
关键词 实验动物 CAR杆菌 16SrRNA PCR
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鸭疫里氏杆菌不同临床分离株的自然转化频率和耐药谱鉴定与分析
5
作者 姚弈舟 刘思齐 +3 位作者 祁英吉 朱德康 程安春 刘马峰 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第5期1-9,共9页
鸭疫里氏杆菌(RA)可感染多种禽类,其部分临床分离株具有多重耐药性且耐药基因可经自然转化在菌间传播,但不同的RA临床分离株自然转化频率有无差异,以及菌株生长特性和耐药谱差异与其自然转化频率是否相关尚不明确。本试验针对42株RA临... 鸭疫里氏杆菌(RA)可感染多种禽类,其部分临床分离株具有多重耐药性且耐药基因可经自然转化在菌间传播,但不同的RA临床分离株自然转化频率有无差异,以及菌株生长特性和耐药谱差异与其自然转化频率是否相关尚不明确。本试验针对42株RA临床分离株,以ton B1up-cfx A-ton B1down基因片段(携带抗性基因的DNA片段)为底物DNA,检测其自然转化频率;测定菌液不同生长时间的OD_(600 nm)值以绘制生长曲线;测定5大类10种抗菌药对42株RA临床分离株的最小抑菌浓度(MIC)值,并探究自然转化频率与生长特性和耐药谱之间的关联。结果显示,42株RA临床分离株中自然转化频率最高达(9.78±3.6)×10^(-5),最低则低于检测限(<10^(-9));生长曲线测定结果显示,RA临床分离株14 h生长曲线最高OD_(600 nm)值为5.2±0.3,最低为3.1±0.5;RA临床分离株中88.10%(37/42)具多重耐药性,单菌株最高耐7种药物,耐5种以上药物的菌株占比23.81%(10/42),耐4种以上药物的菌株占比40.48%(17/42)。深入分析可知,自然转化频率与生长特性和耐药谱均无显著相关性(r_(pearson)均小于0.8)。本试验为探究RA耐药谱的增加与自然转化频率之间的关联性提供了数据支撑。 展开更多
关键词 鸭疫里氏杆菌(RA) 耐药谱 自然转化频率
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四川白鹅白细胞介素-2基因的克隆及生物信息学分析 被引量：1
6
作者 丁轲 程安春 +2 位作者 汪铭书 朱德康 陈孝跃 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第27期11688-11690,共3页
[目的]克隆分析四川白鹅白细胞介素-2(IL-2)基因。[方法]参照GenBank中发表的鸭IL-2基因保守序列,设计1对引物,采用RT-PCR技术从ConA刺激的四川白鹅外周血淋巴细胞的总RNA中扩增鹅IL-2基因,并进行测序及生物信息学分析。[结果]四川白鹅I... [目的]克隆分析四川白鹅白细胞介素-2(IL-2)基因。[方法]参照GenBank中发表的鸭IL-2基因保守序列,设计1对引物,采用RT-PCR技术从ConA刺激的四川白鹅外周血淋巴细胞的总RNA中扩增鹅IL-2基因,并进行测序及生物信息学分析。[结果]四川白鹅IL-2基因全长468 bp,含1个441 bp的开放阅读框(ORF),编码146个氨基酸。生物学软件分析表明该序列编码的氨基酸序列中有4个磷酸化位点,1个糖基化位点,含有21个氨基酸残基组成的信号肽。同源性分析表明四川白鹅IL-2基因与鸭、鸡和火鸡IL-2核苷酸及氨基酸序列同源性均分别为92.2%、77.5%、78.2%和85.8%、65.5%、64.1%,而与其他种属的哺乳动物及啮齿类动物(如人、猴、大鼠、牛、马、猪、猫、小鼠、兔和鹿)的IL-2基因的核苷酸和氨基酸同源性均分别低于45%和28%。[结论]四川白鹅IL-2基因与鸭和鸡具有较近的亲缘关系。 展开更多
关键词 四川白鹅 白细胞介素- 克隆 遗传进化
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集约化养鸭如何防治疾病
7
作者 程安春 《中国农村科技》 2001年第3期31-31,共1页
7-10日龄：鸭传染性浆膜炎(鸭疫里氏杆菌病)——雏鸭大肠杆菌病多价蜂胶复合佐剂二联苗皮下注射0．5毫升，本病严重地区可于17-18日龄再免疫注射1次。
关键词 日龄 养鸭 防治疾病 二联苗 鸭传染性浆膜炎 鸭大肠杆菌病 雏鸭 严重 皮下注射 佐剂
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禽霍乱新型疫苗的研究进展 被引量：12
8
作者 梁圣 赵新新 程安春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期2317-2325,共9页
禽霍乱是一种禽类的接触性、系统性传染病,发病率和致死率高,给养禽业发展造成巨大的经济损失。随着病原菌抗生素耐药问题的日益严重,疫苗应成为防控该病的主要手段。目前应用于我国家禽产业的疫苗包括传统的灭活苗和弱毒苗,但它们具有... 禽霍乱是一种禽类的接触性、系统性传染病,发病率和致死率高,给养禽业发展造成巨大的经济损失。随着病原菌抗生素耐药问题的日益严重,疫苗应成为防控该病的主要手段。目前应用于我国家禽产业的疫苗包括传统的灭活苗和弱毒苗,但它们具有一定缺陷,如油乳灭活苗交叉保护差;自然弱毒株遗传背景不明,毒力时而返强等。因此,研制安全、高效、制备方便的新型疫苗是迫切需求,也是未来研究的趋势。本文针对近年来开发的减毒疫苗、亚单位疫苗、DNA疫苗等多种禽霍乱新型疫苗进行综述,为研制更安全有效的疫苗提供一定的参考。 展开更多
关键词 多杀性巴氏杆菌 禽霍乱 疫苗
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禽网状内皮组织增殖病毒引发的免疫抑制 被引量：2
9
作者 陈朝洪 陈宗艳 《畜禽业》 2008年第6期36-39,共4页
REV感染是导致鸡场发生免疫抑制的主要病因之一,SPF雏鸡感染REV后,免疫器官(胸腺、法氏囊和脾脏)淋巴细胞发生变性坏死、数量减少和功能降低,机体的细胞免疫和体液免疫功能均明显降低或抑制。REV常与其它病毒或细菌混合感染,引起鸡群免... REV感染是导致鸡场发生免疫抑制的主要病因之一,SPF雏鸡感染REV后,免疫器官(胸腺、法氏囊和脾脏)淋巴细胞发生变性坏死、数量减少和功能降低,机体的细胞免疫和体液免疫功能均明显降低或抑制。REV常与其它病毒或细菌混合感染,引起鸡群免疫抑制和持续性感染。本文主要对当前REV引起的免疫抑制研究的进展。 展开更多
关键词 REV 禽 免疫抑制 研究进展
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鸭源致病性大肠杆菌的血清型鉴定及其相关毒力基因分析 被引量：42
10
作者 于学辉 程安春 +3 位作者 汪铭书 王英 王远微 汤承 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期53-59,共7页
自规模化养鸭场患典型大肠杆菌败血症雏鸭分离的282株致病性大肠杆菌(E.coli)中鉴定出210株(包含37种血清型),其中O93、O78、O92、O76占43.8%(92/210)为优势血清型,O46、O32&O93混合型、O60&O93混合型为首次从鸭群中分离到。应... 自规模化养鸭场患典型大肠杆菌败血症雏鸭分离的282株致病性大肠杆菌(E.coli)中鉴定出210株(包含37种血清型),其中O93、O78、O92、O76占43.8%(92/210)为优势血清型,O46、O32&O93混合型、O60&O93混合型为首次从鸭群中分离到。应用PCR结合核酸序列测定对210株致病性E.coli(鸭大肠杆菌病分离株)和28株自健康雏鸭泄殖腔拭子分离的E.coli(临床健康鸭大肠杆菌分离株)进行包括强毒力岛(HPI)中的鼠疫菌素受体基因(fyuA)和铁调节蛋白基因(irp2)、I型菌毛必需蛋白基因(fimC)、P型菌毛结构基因(papA)和血清耐受基因(iss)检测,结果表明:fyuAi、rp2、fimC、papA和iss基因在鸭大肠杆菌病分离株的携带率分别为41.0%、43.3%、92.9%、97.6%和96.7%,在临床健康鸭大肠杆菌分离株的携带率分别为21.4%、25.0%、92.9%、100%和92.9%,患病鸭和临床健康鸭大肠杆菌分离株iss、fimC和papA携带率差异不显著(P>0.05),但papA的携带率均显著高于其他宿主(鸡、猪和人)源E.coli;HPI毒力岛在鸭源E.coli中分布较广,其携带率表现为鸭大肠杆菌病分离株极显著高于临床健康鸭大肠杆菌分离株。HPI毒力岛的携带率与菌株的致病性呈明显的正相关,与O78等特定的血清型有一定的关系。鸭大肠杆菌病分离株有37.6%(79/210)同时携带fyuAi、rp2、fimCi、ss和papA基因,极显著高于健康鸭大肠杆菌分离株的14.3%(4/28)(P<0.01)。 展开更多
关键词 鸭 致病性大肠杆菌 血清型 毒力基因 分子流行病学
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雏鸭致病性大肠杆菌的分离鉴定药敏试验及耐药性分析 被引量：22
11
作者 李玲 汪铭书 +4 位作者 程安春 于小娜 钟传德 段泽 陈孝跃 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第12期34-36,共3页
关键词 致病性大肠杆菌 耐药性分析 药敏试验 分离鉴定 雏鸭 败血性传染病 鸭大肠杆菌病 饲养阶段
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用间接免疫荧光染色法检测鸭病毒性肠炎病毒在人工感染鸭体内的侵染过程和分布规律 被引量：9
12
作者 程安春 韩晓英 +3 位作者 汪铭书 袁桂萍 徐超 廖永洪 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期942-946,共5页
用鸭病毒性肠炎病毒(DEV)CHv强毒株感染成年鸭复制鸭病毒性肠炎急性病例,分别于接种后不同时间,取心、肝、脾、肺、肾、胸腺、食道、十二指肠、胰腺、法氏囊和脑组织,制作切片,应用间接免疫荧光染色法(IFA)检测DEV在鸭体内的侵染过程和... 用鸭病毒性肠炎病毒(DEV)CHv强毒株感染成年鸭复制鸭病毒性肠炎急性病例,分别于接种后不同时间,取心、肝、脾、肺、肾、胸腺、食道、十二指肠、胰腺、法氏囊和脑组织,制作切片,应用间接免疫荧光染色法(IFA)检测DEV在鸭体内的侵染过程和分布规律。结果显示:感染后4 h可在脾脏、胸腺和法氏囊中检测到DEV抗原;感染后6 h可在肝脏、食道、十二指肠、直肠及肺脏检测到DEV抗原;IFA对各组织器官中DEV的平均检出率为肝脏46/50、脾脏48/50、肺脏46/50、肾脏0/50、肠道46/50、法氏囊46/50、胸腺47/50、胰腺0/50、大脑0/50、食道44/50、心脏0/50。研究表明:在急性病例中,脾脏、法氏囊、胸腺、食道、肠道、肝脏和肺脏为DEV的主要靶器官;接种后,病毒首先在脾脏、胸腺、法氏囊中出现,然后病毒迅速传播到肝脏、消化道和肺脏中;IFA检测石蜡切片中DEV的方法具有直观、特异性强的优点,是对DEV进行检测和抗原定位的较好方法。 展开更多
关键词 间接免疫荧光染色 鸭病毒性肠炎病毒 检测 分布
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沙门氏菌分子生物学研究进展 被引量：24
13
作者 黄静玮 汪铭书 程安春 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期649-652,共4页
自1885年Sal mon等分离得到猪霍乱沙门氏菌以来,目前已检出沙门氏菌血清型2500余种,我国已有292个血清型报道[1]。沙门氏菌是重要的人兽共患病病原菌之一,本文就沙门氏菌基因组学、鞭毛蛋白。
关键词 猪霍乱沙门氏菌 分子生物学 人兽共患病 基因组学 鞭毛蛋白 外膜蛋白 血清型 Sal
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规模化鸭场鸭源致病性沙门氏菌的药物敏感性检测及耐药性分析 被引量：13
14
作者 钟传德 程安春 +5 位作者 汪铭书 李玲 段泽 于小娜 仲崇岳 陈孝跃 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2008年第1期35-37,共3页
关键词 致病性沙门氏菌 耐药性分析 药物敏感性 鸭源 规模化 鸭疫里默氏杆菌 鼠伤寒沙门氏菌 猪霍乱沙门氏菌
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共表达鹅细小病毒VP3-gIL2重组乳酸杆菌的构建及其口服免疫评价 被引量：7
15
作者 丁轲 余祖华 +8 位作者 李旺 闫文朝 王臣 赵战勤 程相朝 张春杰 王天奇 程安春 汪铭书 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期262-269,共8页
笔者拟构建共表达鹅细小病毒(GPV)VP3和鹅白细胞介素-2(IL-2)的分泌性重组乳酸杆菌,评价口服表达融合蛋白GPV VP3-gIL2的重组乳酸杆菌的免疫效果。通过酶切将VP3基因和IL-2基因连接,并在其5′端连入乳酸杆菌的信号肽基因SP,亚克隆到乳... 笔者拟构建共表达鹅细小病毒(GPV)VP3和鹅白细胞介素-2(IL-2)的分泌性重组乳酸杆菌,评价口服表达融合蛋白GPV VP3-gIL2的重组乳酸杆菌的免疫效果。通过酶切将VP3基因和IL-2基因连接,并在其5′端连入乳酸杆菌的信号肽基因SP,亚克隆到乳酸杆菌整合表达载体pMJ67,电转化入干酪乳杆菌L.CECT5276,SDS-PAGE和Western blot法鉴定重组菌GPVVP3-gIL2融合蛋白的表达活性。将重组乳酸杆菌口服免疫雏鹅后检测血清GPV抗体、小肠黏液sIgA和脾淋巴细胞增殖情况,评价其免疫效果。结果表明,酶切和测序结果表明成功构建重组表达载体pMJ-SP-GPVVP3-gIL2,PCR证实质粒pMJ-SP-GPVVP3-gIL2成功整合到乳酸杆菌基因组;Western blot表明重组乳酸杆菌分泌表达的融合蛋白GPVVP3-gIL2能与GPV阳性血清特异性结合;淋巴细胞增殖试验表明口服重组菌后能特异地刺激脾淋巴细胞增殖,且在第4、5、6周明显高于GPV VP3组和gIL2组;重组乳酸杆菌口服免疫雏鹅可以产生抗VP3蛋白抗体,且具有中和活性的抗体显著高于GPV VP3组;小肠黏液sIgA细胞生成的数量自第2周较GPV VP3组和疫苗组显著上升。动物攻毒试验结果显示GPV VP3-gIL2融合蛋白免疫组能够获得85%的保护率,表明所构建的重组乳酸杆菌口服后对GPV的攻击具有较好的免疫保护作用。本试验成功构建能稳定表达GPV VP3-IL2融合蛋白的口服乳酸杆菌工程菌,为研究其作为口服疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 鹅细小病毒(GPV) VP3 鹅白细胞介素-2(IL-2) 乳酸杆菌 共表达 口服免疫 融合蛋白
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基因枪轰击不同剂量小鹅瘟病毒VP3基因疫苗在雏鹅体内的动态分布 被引量：6
16
作者 黎敏 程安春 +5 位作者 汪铭书 韩新锋 刘晓东 卢菲 车茜 陈孝跃 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1204-1210,共7页
本文开展了检测小鹅瘟病毒(GPV)VP3基因的实时荧光定量PCR(FQ-PCR)方法的建立和基因枪轰击不同剂量(1、3和6μg)GPV-VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)在30日龄四川白鹅体内(心、肝、脾、肺、肾、法氏囊、胸腺、哈氏腺、十二指肠、空肠、回肠... 本文开展了检测小鹅瘟病毒(GPV)VP3基因的实时荧光定量PCR(FQ-PCR)方法的建立和基因枪轰击不同剂量(1、3和6μg)GPV-VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)在30日龄四川白鹅体内(心、肝、脾、肺、肾、法氏囊、胸腺、哈氏腺、十二指肠、空肠、回肠、直肠、盲肠、胰腺、血液、脑及注射部位皮肤)分布规律的研究。结果表明:①建立的FQ-PCR特异性强、灵敏度高、重复性好,核酸模板数与FQ-PCR测定的Ct值相关系数达到0.999,具有很好的直线相关性;②pcDNA-GPV-VP3各剂量免疫雏鹅1 h即可在各组织中检测到,其中注射部位含量最高,肝、肾、淋巴器官(脾、法氏囊、胸腺、哈氏腺)含量较高;③到免疫后217 d时,1μg组免疫雏鹅各个组织器官内仍检测到pcDNA-GPV-VP3的存在,但多数组织器官中的含量比1 h时约少了4个数量级,其中免疫部位减少了7个数量级;④血液中pcDNA-GPV-VP3的含量较少,且免疫后1 h^217 d各时间点的差异不显著(P≥0.05);⑤不同剂量pcDNA-GPV-VP3免疫雏鹅各组织中的含量呈现的总体规律为6μg组>3μg组>1μg组,但差异不显著(P≥0.05)。因此,FQ-PCR是定量检测pcDNA-GPV-VP3在免疫雏鹅体内含量的可靠方法,pcDNA-GPV-VP3免疫雏鹅后1 h时可分布至雏鹅体内各组织器官中并持续存在217 d以上。 展开更多
关键词 FQ-PCR pcDNA-GPV-VP3 基因枪 雏鹅 动态分布
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鸭疫里默氏杆菌病原及其防控关键技术研究 被引量：18
17
作者 程安春 朱德康 +7 位作者 王晓佳 王雪平 张莎秋 贾仁勇 罗启慧 韩新峰 陈孝跃 汪铭书 《中国家禽》 北大核心 2012年第6期1-4,共4页
文章回顾了鸭疫里默氏杆菌的病原鉴定、主要抗原、耐药机制等若干基础问题的研究进展,分析了鸭疫里默氏杆菌全基因组测序工作的完成对进一步深入开展致病机理研究和疫苗研发的重要意义。同时,从我国水禽生产的角度对鸭疫里默氏杆菌病的... 文章回顾了鸭疫里默氏杆菌的病原鉴定、主要抗原、耐药机制等若干基础问题的研究进展,分析了鸭疫里默氏杆菌全基因组测序工作的完成对进一步深入开展致病机理研究和疫苗研发的重要意义。同时,从我国水禽生产的角度对鸭疫里默氏杆菌病的防控关键技术进行了详细阐述。 展开更多
关键词 鸭疫里默氏杆菌 鸭疫里默氏杆菌病 防控 关键技术
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鸭致病性大肠杆菌外膜蛋白型研究 被引量：7
18
作者 于学辉 程安春 +5 位作者 汪铭书 汤承 王远微 王英 岳华 张焕容 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期554-560,共7页
测定了从我国分离到的130株鸭病原性大肠杆菌外膜蛋白型（Outer membrane protein patterns,OMP型）,其中O93、O92、O78和O76优势血清型53株,O46等30个其他血清型分离株77株,这些分离株共产生了4个OMP型,其中OMP-1型81株,占62.3%（81/13... 测定了从我国分离到的130株鸭病原性大肠杆菌外膜蛋白型（Outer membrane protein patterns,OMP型）,其中O93、O92、O78和O76优势血清型53株,O46等30个其他血清型分离株77株,这些分离株共产生了4个OMP型,其中OMP-1型81株,占62.3%（81/130）,覆盖O93、O92、O78和O76等29个血清型,占85.3%（29/34）,为主要的OMP型;根据GenBank中大肠杆菌K-12外膜蛋白A基因（ompA）的核苷酸序列设计引物,从9株优势血清型和1株O46血清型的鸭大肠杆菌中分别扩增得到ompA基因,进行序列测定及分析,发现优势血清型9个菌株的ompA均由1 171个碱基组成,均只有1个大的开放阅读框（ORF）,长1 053 bp,编码由350个氨基酸组成的前外膜蛋白A（pro-OmpA）,前21个氨基酸残基组成信号肽,成熟的OmpA由329个氨基酸残基组成;O46菌株的ORF全长1 041 bp,在400-411 bp位缺失了12个碱基,成熟的OmpA由325个氨基酸残基组成;10个鸭致病性E.coli的ompA基因核苷酸序列高度同源,相似性达95.8%~100%。 展开更多
关键词 鸭 致病性大肠杆菌 外膜蛋白型 ompA基因 序列分析
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实时荧光定量PCR检测鸭疫里默氏杆菌方法的建立和应用 被引量：10
19
作者 段泽 程安春 +6 位作者 汪铭书 朱德康 仲崇岳 钟传德 于小娜 李玲 陈孝跃 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2008年第2期11-15,共5页
根据我们实验室发现的鸭疫里默氏杆菌(RA)荚膜多糖蛋白基因序列(DQ151838),设计和合成荧光定量PCR引物和探针,建立了检测RA的实时荧光定量PCR方法。该法的表达式Y=-3.416X+39.492,相关系数1.000,PCR循环效率96.2%,DNA拷贝数在100～108... 根据我们实验室发现的鸭疫里默氏杆菌(RA)荚膜多糖蛋白基因序列(DQ151838),设计和合成荧光定量PCR引物和探针,建立了检测RA的实时荧光定量PCR方法。该法的表达式Y=-3.416X+39.492,相关系数1.000,PCR循环效率96.2%,DNA拷贝数在100～108范围内检测曲线有良好的线性关系。该法的最适Mg2+、引物和探针浓度分别为4～5mmol/L、0.16～0.2μmol/L和0.16μmol/L,最低能够检测到RA的DNA模板为2.0copies/μL。1/10半数致死量的RA人工皮下注射感染7日龄樱桃谷鸭后2h即可在心、肝、肺、胸腺、食管中检测到RA核酸;感染后8h即可在心、肝、脾、肺、肾、脑、胰、食管、气管、胸腺、法氏囊、十二指肠、直肠、血液和咽喉拭子检测到RA核酸,36～120h是RA在感染雏鸭除了咽喉、食管和气管各个组织器官繁殖数量最高峰期,其后逐渐下降。RA人工感染致死雏鸭的心、肝、脑RA分离和FQ-PCR检测符合率为100%。对临床送检具有典型鸭疫里默氏杆菌病临床症状和病理变化的死亡雏鸭的肝脏、心血和脑组织的FQ-PCR检测的阳性率均为100%,而RA分离的阳性率分别只有74.3%(26/35)、82.9%(29/35)和91.4%(32/35)。FQ-PCR可用于鸭疫里默氏杆菌感染的快速诊断、流行病学调查和鸭产品的检疫等。 展开更多
关键词 鸭疫里默氏杆菌(RA) 荧光定量PCR 定量检测 应用
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RAPD用于鸭疫里默氏杆菌鸭源致病性大肠杆菌和鸭沙门氏菌的遗传相似性及聚类分析的初步研究 被引量：5
20
作者 汪铭书 程安春 +2 位作者 李淑梅 朱德康 陈孝跃 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第9期9-11,共3页
关键词 鸭疫里默氏杆菌病 致病性大肠杆菌 沙门氏菌感染 遗传相似性 聚类分析 鸭源 RAPD 细菌性传染病
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