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猪链球菌BALB/c小鼠感染模型的初步建立被引量：5: 1; 作者张奕强刘文倩 +3 位作者刘永生王印姚学萍张杰《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期418-422,共5页; 目的观察猪链球菌(Streptococcus suis)感染小鼠后的临床、病理变化,为将小鼠作为实验室研究猪链球菌的实验动物提供依据。方法用猪链球菌活菌经腹腔注射感染小白鼠,并做阴性对照,观察其临床症状,剖解病死小鼠,制作病理切片观察病理变... 展开更多; 关键词猪链球菌 BALB/c小鼠模型病理变化; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪繁殖与呼吸综合征病毒LAMP检测方法的建立被引量：9: 2; 作者罗忠永王印杨泽晓《动物医学进展》北大核心 2016年第3期1-5,共5页; 应用通用反转录试剂盒和环介导等温核酸扩增技术(LAMP)建立了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的快速检测方法,同时评价了该检测方法的特异性、稳定性和灵敏度。结果表明,根据猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白基因保守区设计的LAMP引物能够在6... 展开更多; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒环介导等温核酸扩增检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测PRRSV方法的建立被引量：6: 3; 作者罗忠永王印杨泽晓《动物医学进展》北大核心 2016年第4期1-5,共5页; 根据编码PRRSV M蛋白的基因序列设计用于SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR扩增的引物,通过温度梯度法优化反应体系;以不同科属常见猪致病性RNA病毒疫苗验证该检测方法的特异性,参考国内PRRSV分子流行病学特征,选择基因型代表性的2株疫苗株... 展开更多; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒 M蛋白 SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

实时荧光定量PCR模板核酸提取方法的比较被引量：3: 4; 作者罗忠永王印杨泽晓《动物医学进展》北大核心 2016年第11期53-56,共4页; 对病料核酸提取前处理方法进行优化,选择酚/氯仿法、试剂盒提取法和DNA/RNA同提取法,比较提取效果,为实验室核酸提取提供参考。配制模拟样品,通过实时荧光定量PCR比较3种方法提取效果。结果表明,提取纯度为试剂盒提取法>酚/氯仿法>... 展开更多; 关键词核酸提取方法实时荧光定量PCR 提取效果; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪链球菌BALB/c小鼠感染模型的初步建立被引量：5: 1; 作者张奕强刘文倩刘永生王印姚学萍张杰; 机构中国农业科学院兰州兽医研究所四川农业大学动物医学院; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期418-422,共5页; 基金中波国际科技合作项目(2010DFA32640)资助; 文摘目的观察猪链球菌(Streptococcus suis)感染小鼠后的临床、病理变化,为将小鼠作为实验室研究猪链球菌的实验动物提供依据。方法用猪链球菌活菌经腹腔注射感染小白鼠,并做阴性对照,观察其临床症状,剖解病死小鼠,制作病理切片观察病理变化。并对病死小鼠做病原分离,通过培养特性鉴定、生化试验以及PCR鉴定确定其为猪链球菌。结果小鼠确由感染猪链球菌而致死,体内各组织、器官均产生典型的败血症病变。结论小鼠对猪链球菌易感,能够作为实验室研究猪链球菌良好的实验动物。; 关键词猪链球菌 BALB/c小鼠模型病理变化; Keywords Streptococcus suis BALB/c mice model pathological changes; 分类号 S852.611 [农业科学—基础兽医学] R535 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪繁殖与呼吸综合征病毒LAMP检测方法的建立被引量：9: 2; 作者罗忠永王印杨泽晓; 机构四川农业大学动物医学院动物检疫实验室; 出处《动物医学进展》北大核心 2016年第3期1-5,共5页; 基金 "十二五"国家科技支持计划项目(2013BAD12B04); 文摘应用通用反转录试剂盒和环介导等温核酸扩增技术(LAMP)建立了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的快速检测方法,同时评价了该检测方法的特异性、稳定性和灵敏度。结果表明,根据猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白基因保守区设计的LAMP引物能够在64.5℃60min内实现对目标核酸片段的大量扩增,检测结果可通过直接观察反应副产物(焦磷酸镁)进行判读,该检测系统具有很高的特异性,与猪瘟病毒、猪乙型脑炎病毒等均无交叉反应;通过PRRSV不同毒株疫苗、模拟样品和临床样品确定,该检测系统具有很好的稳定性;通过质粒确定该检测系统可以检测到10拷贝/μL的病毒核酸模板。结果表明成功建立了猪繁殖与呼吸综合征病毒LAMP快速检测方法,为临床提供了一种很好的检测手段。; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒环介导等温核酸扩增检测; Keywords PRRSV LAMP detection; 分类号 S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测PRRSV方法的建立被引量：6: 3; 作者罗忠永王印杨泽晓; 机构四川农业大学动物医学院动物检疫实验室; 出处《动物医学进展》北大核心 2016年第4期1-5,共5页; 基金 "十二五"国家科技支持计划项目(2013BAD12B04); 文摘根据编码PRRSV M蛋白的基因序列设计用于SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR扩增的引物,通过温度梯度法优化反应体系;以不同科属常见猪致病性RNA病毒疫苗验证该检测方法的特异性,参考国内PRRSV分子流行病学特征,选择基因型代表性的2株疫苗株验证该检测方法的稳定性;以10倍梯度稀释的质粒为标准品扩增并构建标准曲线,探究该检测方法的灵敏度,随机挑取10份保存的PRRSV阳性病料和10份阴性病料同时使用农业部推荐的PRRSV RT-PCR检疫标准方法和建立的方法进行检测,以确定2种方法检测的符合率。结果显示,使用建立的方法可以在54.4℃80min内完成对PRRSV的检测,该检测方法具有特异性和稳定性;检测灵敏度为6.8×10拷贝/μL;以Ct值为横坐标,扩增序列拷贝浓度的对数值为纵坐标,得到标准曲线,方程为y=-3.411 x+39.002,R2=0.999;对随机挑取的10份PRRSV阳性病料和10份阴性病料进行检测,结果2种方法检测结果的符合率100%。结果表明,成功建立了PRRSV SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR快速检测方法,为临床提供了一种很好的检测手段。; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒 M蛋白 SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR; Keywords PRRSV M protein Green I SYBR real-time fluorescence quantitative PCR; 分类号 S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名实时荧光定量PCR模板核酸提取方法的比较被引量：3: 4; 作者罗忠永王印杨泽晓; 机构四川农业大学动物医学院动物检疫实验室; 出处《动物医学进展》北大核心 2016年第11期53-56,共4页; 基金 "十二五"国家科技支持计划项目(2013BAD12B04); 文摘对病料核酸提取前处理方法进行优化,选择酚/氯仿法、试剂盒提取法和DNA/RNA同提取法,比较提取效果,为实验室核酸提取提供参考。配制模拟样品,通过实时荧光定量PCR比较3种方法提取效果。结果表明,提取纯度为试剂盒提取法>酚/氯仿法>DNA/RNA同提取法。提取效率为酚/氯仿法>DNA/RNA同提取法>试剂盒提取法。表明各提取方法效果差异显著(P<0.01),为实验室核酸提取提供了参考。; 关键词核酸提取方法实时荧光定量PCR 提取效果; Keywords nucleic acid extraction method real-time PCR extraction effect; 分类号 S854.4 [农业科学—临床兽医学] Q52 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	猪链球菌BALB/c小鼠感染模型的初步建立	张奕强刘文倩刘永生王印姚学萍张杰	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2011	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	猪繁殖与呼吸综合征病毒LAMP检测方法的建立	罗忠永王印杨泽晓	《动物医学进展》北大核心	2016	9	在线阅读下载PDF 职称材料
3	SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测PRRSV方法的建立	罗忠永王印杨泽晓	《动物医学进展》北大核心	2016	6	在线阅读下载PDF 职称材料
4	实时荧光定量PCR模板核酸提取方法的比较	罗忠永王印杨泽晓	《动物医学进展》北大核心	2016	3	在线阅读下载PDF 职称材料