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题名青稞OMT1基因克隆及原核表达分析
被引量：8
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作者
张鹍飞
牟利
李鹏
方建
刘新春
冯宗云
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机构
四川农业大学农学院/作物遗传育种学系大麦青稞研究中心
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出处
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第12期2314-2322,共9页
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基金
国家现代农业产业技术体系(大麦青稞体系)建设专项基金(CARS-05)
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文摘
类黄酮O-甲基转移酶(FOMT)是一种在植物甲基化黄酮代谢合成中有着重要作用的酶,但在中国青藏高原的特色作物青稞中研究较少。为了更好了解该酶及编码基因在青稞中的生理功能及作用,以高总黄酮青稞品系94-19-1为材料,通过RT-PCR扩增、克隆得到青稞OMT1基因的ORF序列。结果表明,该基因ORF长1 071 bp,编码356个氨基酸,预测蛋白分子量为38.65 KDa,等电点为5.33。序列比对分析发现,所克隆的基因与NCBI数据库收录的大麦Hv OMT1基因有99.44%的一致性,氨基酸序列存在5个残基差异,编码的蛋白序列具有OMT蛋白家族典型的保守结构域。进一步将该基因连接到原核表达载体转化大肠杆菌,最终成功将该基因所编码的蛋白在大肠杆菌诱导表达,并利用亲和层析柱分离技术,将该表达蛋白进行了纯化。这为进一步研究该酶蛋白功能和选育高品质青稞品种奠定了基础。
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关键词
青稞
类黄酮O-甲基转移酶
分子克隆
原核表达
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Keywords
hulless barley, flavonoids O-methyltransferase, molecular cloning, prokaryotic expressi1
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分类号
Q943.2
[生物学—植物学]
S512.3
[农业科学—作物学]
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