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微小RNA-21对脊髓缺血再灌注损伤后神经元细胞凋亡的影响 被引量:3
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作者 张涛 倪双飞 +2 位作者 郎野 吕红斌 胡建中 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期169-175,共7页
目的 :探讨微小RNA-21(miR-21)能否抑制FASL的表达进而减少脊髓缺血再灌注损伤后神经元细胞的凋亡。方法:通过慢病毒载体转染PC-12细胞,测定最佳的感染复数(MOI)。分别转染不同的慢病毒载体建立并验证上调miR-21、下调miR-21和对照的PC... 目的 :探讨微小RNA-21(miR-21)能否抑制FASL的表达进而减少脊髓缺血再灌注损伤后神经元细胞的凋亡。方法:通过慢病毒载体转染PC-12细胞,测定最佳的感染复数(MOI)。分别转染不同的慢病毒载体建立并验证上调miR-21、下调miR-21和对照的PC-12细胞体系,经过氧糖剥夺以及复糖复氧处理模拟脊髓损伤后缺血再灌注损伤过程。利用Hoechst/PI染色技术检测上调以及下调miR-21对PC-12细胞凋亡情况的影响;利用q RT-PCR技术以及Western blot技术检测上调以及下调miR-21表达对PC-12细胞中FASL表达水平的影响。在293T细胞中,通过质粒转染技术分别建立miR-21/miR-21阴性对照和FASL野生型/FASL突变型/FASL阴性对照的共转染体系,利用双荧光素酶实验验证miR-21和FASL的靶向关系。结果:MOI=20为最佳的感染复数。在该条件下进行慢病毒转染72h后,荧光显微镜下可观测到绝大多数PC-12细胞中有明显的绿色荧光,通过q RT-PCR技术检测miR-21的水平发现:上调组的miR-21水平较对照组明显提高(P<0.05);但是下调组miR-21水平和对照组相比却没有明显变化(P>0.05)。转染三种不同慢病毒的PC-12细胞经过氧糖剥夺及复氧处理后,Hoechst/PI双染法检测结果证实上调组细胞凋亡较对照组明显减少(P<0.05),而下调组的细胞凋亡比例较对照增高(P<0.05)。另外,氧糖剥夺及复氧处理后,三组PC-12细胞中FASL表达水平均较处理前增高,而上调组的FASL水平较对照组均下降(P<0.05),下调组的FASL水平较对照组有所升高(P<0.05)。双荧光素酶实验结果发现miR-21在FASL野生型(3′UTR-WT)组间有显著差异(P<0.05),而miR-21在FASL对照组以及FASL突变型组间无显著差异(P>0.05)。结论 :miR-21能够通过靶向抑制FASL表达,减少脊髓缺血再灌注损伤后神经元的凋亡。 展开更多
关键词 脊髓损伤 神经元 MIR-21 凋亡 FASL
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巨噬细胞在骨腱界面损伤修复中的作用 被引量:2
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作者 徐子涵 李声灿 +1 位作者 吕红斌 张涛 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期800-805,共6页
以肩袖损伤和交叉韧带损伤为代表的骨腱界面损伤修复过程均以炎症反应为起始阶段,而炎症早期招募到损伤部位的巨噬细胞对骨腱界面远期愈合质量至关重要。巨噬细胞在组织损伤修复的整个过程中发挥着重要的调控作用,是局部微环境调控的核... 以肩袖损伤和交叉韧带损伤为代表的骨腱界面损伤修复过程均以炎症反应为起始阶段,而炎症早期招募到损伤部位的巨噬细胞对骨腱界面远期愈合质量至关重要。巨噬细胞在组织损伤修复的整个过程中发挥着重要的调控作用,是局部微环境调控的核心。在损伤修复早期,主要表现为M1型巨噬细胞分泌多种促炎因子,发挥清除损伤及坏死组织细胞的作用。随着损伤修复进展,M2型巨噬细胞逐渐增多,并释放多种抗炎因子和生长因子促进组织损伤的修复。该文分析了目前已发表的关于巨噬细胞和骨腱界面损伤的文献,对巨噬细胞在骨腱界面损伤修复中的作用及可能的机制进行了综述,为日后骨腱界面损伤修复的研究及治疗提供了新思路。 展开更多
关键词 巨噬细胞 骨腱界面 损伤修复 细胞因子 炎症
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同步辐射技术对大鼠腰椎小关节退变的三维可视化研究 被引量:3
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作者 罗子翔 胡建中 +5 位作者 吕红斌 段春岳 姜力元 曹勇 陈华斌 肖体乔 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期353-359,共7页
目的 :利用同步辐射相衬成像技术(synchrotron radiation propagation phase contrast micro-tomography,SR-PPCT)对大鼠腰椎小关节(lumbar facet joint,LFJ)的解剖微结构进行三维可视化观测及量化分析,探讨小关节源性腰痛(low back pai... 目的 :利用同步辐射相衬成像技术(synchrotron radiation propagation phase contrast micro-tomography,SR-PPCT)对大鼠腰椎小关节(lumbar facet joint,LFJ)的解剖微结构进行三维可视化观测及量化分析,探讨小关节源性腰痛(low back pain,LBP)的潜在机制。方法:取成年(对照组)和老化(实验组)SD大鼠L4/5小关节,经多聚甲醛固定、梯度脱水后于上海光源X射线成像与生物医学应用(BL13W1)光束线站进行扫描。采用独立样本t检验比较两组大鼠LFJ间软骨、软骨下骨板、松质骨、关节间隙的差异。结果:成年组大鼠LFJ关节间隙为38.00±4.50μm,软骨厚度为15.6±0.63μm,软骨体积为(51.25±1.49)×104μm3,软骨下骨板厚度为16.37±1.23μm,软骨下骨骨体积分数(BV/TV)为(60±5)%,表面积体积分数(BS/TV)为180±20mm-1,松质骨骨小梁数量(Tb N)为6.85±0.31mm-1;老化组LFJ关节间隙为16.25±0.85μm,软骨厚度为18.90±2.14μm,软骨体积为(37.00±1.83)×104μm3,软骨下骨板厚度为72.48±3.14μm,软骨下骨骨体积分数(BV/TV)为(87±4)%,表面积体积分数(BS/TV)为0.97±0.08mm-1,松质骨骨小梁数量(Tb N)为2.07±0.21mm-1;与成年组相比,老化组大鼠LFJ关节间隙变窄(P<0.05)、软骨容量减低(P<0.05),软骨厚度改变无统计学差异(P>0.05)、软骨下骨骨板增厚(P<0.05),孔隙状结构消失,松质骨骨小梁数量减少(P<0.05)。结论 :SR-PPCT可实现软骨和软骨下骨的同时高精度三维可视化观测;LFJ退变过程中软骨和软骨下骨形态均发生明显改变。 展开更多
关键词 同步辐射 相位衬度成像 腰椎小关节 三维可视化
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mTOR复合物组分Raptor和Rictor在小鼠毛囊周期中的表达与定位 被引量:1
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作者 陈梦婷 谢红付 +3 位作者 刘芳芬 徐伞 李吉 邓智利 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期725-730,共6页
目的:探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)复合物组分Raptor和Rictor在小鼠毛囊周期中的表达与定位及其意义。方法:通过增殖标志物Ki-67的免疫荧光染色确定所用出生后不同时间的小鼠背部皮肤与所报道的毛... 目的:探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)复合物组分Raptor和Rictor在小鼠毛囊周期中的表达与定位及其意义。方法:通过增殖标志物Ki-67的免疫荧光染色确定所用出生后不同时间的小鼠背部皮肤与所报道的毛囊周期阶段是否准确对应。采用real-time PCR技术检测Raptor和Rictor mRNA在出生后43 d(P43,静止期早期)、56 d(P56,静止期中期)、69 d(P69,静止期末期)、74 d(P74,生长期早期)中的表达情况;采用免疫荧光共染技术进一步检测Raptor和Rictor蛋白在上述各个时期中的表达与定位。结果:Ki-67免疫荧光结果表明所选取的小鼠皮肤与其所处毛囊周期阶段准确对应。Real-time PCR和免疫荧光检测结果表明:Raptor和Rictor mRNA在毛囊周期各时期的毛囊中表达差异无统计学意义(P>0.05);Raptor特异表达于毛囊隆突部的毛囊干细胞中,而Rictor主要表达在毛囊内根鞘中。结论:Raptor和Rictor的表达水平在毛囊周期各时期并未见明显差异,但Raptor会特异表达于毛囊干细胞中,而Rictor特异表达在内根鞘中,提示Raptor可能是毛囊干细胞的分子标志物之一,Rictor可能参与内根鞘的维持及毛干的形成。 展开更多
关键词 毛囊周期 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 RAPTOR RICTOR 毛囊干细胞 内根鞘
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微小小单胞菌腰椎间盘炎并椎管内硬膜外脓肿1例及文献回顾 被引量:1
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作者 杨彦 吴建煌 +1 位作者 胡建中 吴天定 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1929-1936,共8页
微小小单胞菌引起的脊柱感染罕见,其影像学表现为椎间盘炎、脊椎炎、椎旁脓肿和硬膜外脓肿。中南大学湘雅医院于2023年2月收治1例微小小单胞菌腰椎间盘炎并椎管内硬膜外脓肿患者。患者为60岁男性,临床表现为腰痛伴左下肢麻木,MRI表现为... 微小小单胞菌引起的脊柱感染罕见,其影像学表现为椎间盘炎、脊椎炎、椎旁脓肿和硬膜外脓肿。中南大学湘雅医院于2023年2月收治1例微小小单胞菌腰椎间盘炎并椎管内硬膜外脓肿患者。患者为60岁男性,临床表现为腰痛伴左下肢麻木,MRI表现为脊椎炎、椎间盘炎、硬膜外脓肿。行脊柱病灶清除及减压融合术,手术标本培养为阴性,手术标本宏基因组二代测序(metagenomic next-generation sequencing,mNGS)检测结果为微小小单胞菌。术后静脉滴注利奈唑胺和哌拉西林1周,静脉滴注头孢他啶和口服甲硝唑2周,随后口服甲硝唑和奈诺沙星2周。在随访过程中,患者腰痛及左下肢麻木完全缓解。微小小单胞菌脊柱感染极为罕见,当培养结果呈阴性时,mNGS检测有助于最终明确诊断。 展开更多
关键词 微小小单胞菌 椎间盘炎 硬膜外脓肿 宏基因组二代测序
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