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橙皮苷对去卵巢骨质疏松症大鼠骨质流失和机制的影响 被引量：8
1
作者 张晓文 马应卓 +2 位作者 朱佳丽 李娟芳 王涛 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1283-1288,共6页
目的研究橙皮苷对去卵巢骨质疏松大鼠骨质流失和骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/核因子kappa B配体的受体激活物(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)/RANK通路的影响。方法将48只雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠... 目的研究橙皮苷对去卵巢骨质疏松大鼠骨质流失和骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/核因子kappa B配体的受体激活物(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)/RANK通路的影响。方法将48只雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为假手术组、去卵巢骨质疏松组、橙皮苷低剂量组、橙皮苷中剂量、橙皮苷高剂量组和雌激素组。检测骨组织骨体积分数(bone volume fraction,BV/TV)、骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb.Th)、骨密度(bone mineral density,BMD)、骨小梁数量(trabecular number,Tb.N)、骨小梁分离度(trabecular separation,Tb.Sp),通过HE染色观察骨组织病理损伤,采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测人Ⅰ型胶原C端肽(C-terminal peptide collagen typeⅠ,CTX-Ⅰ)和血清骨钙素(bone glaprotein,BGP)的表达量。运用qRT-PCR和Western bolt分别检测骨组织OPG、RANKL、RANK的mRNA和蛋白表达。结果在橙皮苷治疗后,与去卵巢骨质疏松组相比,骨质疏松标志物BV/TV、BMD、Tb.Th和Tb.N水平升高,Tb.Sp水平降低;大鼠骨小梁数量明显增加,且骨小梁连接更为紧密;骨吸收标志物CTX-Ⅰ水平降低;骨形成标志物BGP水平升高。OPG mRNA相对表达量和蛋白的表达量升高,RANKL和RANK mRNA相对表达量和蛋白的表达量降低。结论橙皮苷能缓解去卵巢骨质疏松大鼠骨质流失并调节OPG/RANKL/RANK信号通路。 展开更多
关键词 橙皮苷 去卵巢骨质疏松症 骨质流失 OPG/RANKL/RANK信号通路
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Pcsk9基因干扰对高脂诱导的大鼠非酒精性脂肪性肝病合并动脉粥样硬化的影响 被引量：5
2
作者 张晓文 王祎 +3 位作者 张婵 张迪 贠航 黄笛 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期150-157,共8页
目的·探讨前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin kexin 9,Pcsk9)基因干扰对高脂诱导的大鼠非酒精性脂肪性肝病及动脉粥样硬化损伤的影响。方法·构建非酒精性脂肪性肝病SD大鼠模型。40只大鼠随机分为4组... 目的·探讨前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin kexin 9,Pcsk9)基因干扰对高脂诱导的大鼠非酒精性脂肪性肝病及动脉粥样硬化损伤的影响。方法·构建非酒精性脂肪性肝病SD大鼠模型。40只大鼠随机分为4组:对照组、模型(high fat)组、shRNA-阴性对照(negative control,NC)干扰模型(high fat+shRNA-NC)组及Pcsk9-shRNA干扰模型(high fat+Pcsk9-shRNA)组。实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测Pcsk9基因干扰效率。放射免疫法测定空腹血清胰岛素。全自动生化分析仪检测大鼠血脂指标。苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,H-E染色)观察肝脏组织及主动脉组织损伤。TUNEL染色检测肝脏组织细胞凋亡情况。酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测外周血中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达水平。蛋白印迹法检测PCSK9、Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)P65及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)的表达。结果·与对照组比较,模型组的肥胖指数和胰岛素水平显著升高(均P=0.000);肝脏细胞凋亡率显著升高(P=0.000);高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平显著降低,而低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、总胆固醇(total cholesterol,TC)和三酰甘油(triacylglycerol,TAG)水平显著升高(均P=0.000);炎症因子IL-1β、IL-6、iNOS水平均显著升高(均P=0.000);TLR4、NF-κB P65蛋白活化及TNF-α表达均显著升高(均P=0.000);肝脏组织和主动脉组织均呈现明显损伤。干扰Pcsk9基因表达后,与模型组比较,high fat+Pcsk9-shRNA组肥胖指数和胰岛素水平显著降低(P=0.007,P=0.000);肝脏细胞凋亡率显著降低(P=0.000);HDL-C水平显著升高,而LDL-C、TC和TAG水平显著降低(均P=0.000);炎症因子IL-1β、IL-6及iNOS水平均显著降低(均P=0.000);TLR4、NF-κB P65蛋白活化及TNF-α表达均显著降低(均P=0.000);肝脏组织和主动脉组织病理损伤均得到改善。结论·干扰Pcsk9基因可减轻非酒精性脂肪性肝病合并动脉粥样硬化大鼠的肥胖指数、胰岛素水平、血脂指标及炎症反应,并抑制TLR4、NF-κB P65蛋白激活,进而改善大鼠肝脏及主动脉组织的损伤。 展开更多
关键词 前蛋白转化酶枯草溶菌素9 基因干扰 非酒精性脂肪性肝病 动脉粥样硬化 炎症因子
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香叶木素调节巨噬细胞M1/M2型极化对CVB3诱导的乳小鼠病毒性心肌炎的保护作用 被引量：5
3
作者 张晓文 范娜 +2 位作者 郭耀东 王学军 程敏 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2019年第7期502-510,共9页
目的研究香叶木素是否通过调节巨噬细胞M1/M2型极化对柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导的病毒性心肌炎起保护作用。方法 BALB/c乳小鼠单次ip 0.1 mL CVB3 1×10^5pfu,记为D 0;24 h后(D1),ig给予香叶木素12.5,25和50 mg·kg^-1,连续7 d。... 目的研究香叶木素是否通过调节巨噬细胞M1/M2型极化对柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导的病毒性心肌炎起保护作用。方法 BALB/c乳小鼠单次ip 0.1 mL CVB3 1×10^5pfu,记为D 0;24 h后(D1),ig给予香叶木素12.5,25和50 mg·kg^-1,连续7 d。实验结束,检测乳小鼠的平均动脉压(MAP)、心率(HR)和左室收缩压(LVSP);血清中肌酸激酶(CK)、CK的MB型同工酶(CK-MB)和肌红蛋白(Mb)水平;通过流式细胞术分析和分选外周血中巨噬细胞M1和M2极化情况;HE染色和TUNEL染色观察心肌组织病理变化;Western印迹法检测心肌组织中活化的胱天蛋白酶3和活化的胱天蛋白酶9蛋白表达水平。从乳小鼠脾组织分选巨噬细胞,分别用干扰素γ(IFN-γ)5 mg·L^-1、CVB3 1×10^5pfu、香叶木素20μmol·L^-1、CVB3 1×10^5pfu^+香叶木素20μmol·L^-1处理巨噬细胞24 h,Western印迹法检测细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶1(Arg-1)表达水平。结果与正常对照组相比,模型组乳小鼠上述指标均显著降低(P<0.05);与模型组相比,香叶木素12.5,25和50 mg·kg^-1组乳小鼠的MAP,HR和LVSP均显著升高(P<0.05)。与正常对照组相比,模型组乳小鼠血清中CK,CK-MB和Mb水平以及心肌细胞凋亡率均显著升高(P<0.05),心肌组织活化的胱天蛋白酶3和活化的胱天蛋白酶9表达水平显著升高(P<0.05);与模型组相比,香叶木素12.5,25和50mg·kg^-1组乳小鼠血清中上述指标均显著降低(P<0.05),且心肌组织中活化的胱天蛋白酶3和活化的胱天蛋白酶9表达水平也显著降低(P<0.05)。与正常对照组相比,模型组乳小鼠外周血中F4/80^+iNOS^+,F4/80^+TLR4^+和F4/80^+CD40^+的细胞百分比显著升高(P<0.05),F4/80^+CD14^+,F4/80^+Arg-1^+和F4/80^+CD206^+的细胞百分比明显降低(P<0.05);与模型组相比,香叶木素12.5,25和50 mg·kg^-1组小鼠外周血中F4/80^+iNOS^+,F4/80^+TLR4^+和F4/80^+CD40^+的细胞百分比显著降低(P<0.05),F4/80^+CD14^+,F4/80^+Arg-1^+和F4/80^+CD206^+的细胞百分比明显升高(P<0.05)。与正常对照组相比,IFN-γ或CVB3单独处理均能上调脾巨噬细胞iNOS表达,抑制Arg-1的表达(P<0.05);香叶木素处理则能够抑制细胞iNOS的表达,上调Arg-1的表达(P<0.05);与CVB3单独处理组相比,CVB3+香叶木素处理后,iNOS表达降低,Arg-1表达升高(P<0.05)。结论香叶木素能抑制病毒感染引起的M1型巨噬细胞的活化,促进其向M2型极化发展,改善病毒性心肌炎的心功能。 展开更多
关键词 香叶木素 巨噬细胞 M1/M2型极化 病毒性心肌炎
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