不同基质配比对草莓根际微生物的影响 被引量：6

1

作者 马丽 戚瑷娜 +1 位作者 张锐 夏清燕 《湖北农业科学》 北大核心 2014年第7期1551-1554,共4页

以丰香草莓作为试验材料,研究草炭、珍珠岩、蛭石3种基质不同配比对草莓根际微生物的影响,配比分别为T1处理组(草炭∶珍珠岩∶蛭石=3∶1∶1)、T2处理组(草炭∶珍珠岩=2∶1)、T3处理组(草炭∶蛭石∶珍珠岩=2∶1∶1),对照处理组为未加任... 以丰香草莓作为试验材料,研究草炭、珍珠岩、蛭石3种基质不同配比对草莓根际微生物的影响,配比分别为T1处理组(草炭∶珍珠岩∶蛭石=3∶1∶1)、T2处理组(草炭∶珍珠岩=2∶1)、T3处理组(草炭∶蛭石∶珍珠岩=2∶1∶1),对照处理组为未加任何基质的土壤。结果表明,不同基质配比对草莓根际微生物有明显的影响,3种处理均能提高草莓根际微生物数量,T1处理组微生物最为丰富,细菌、放线菌、真菌含量分别为:4.62×107CFU/g、3.36×106CFU/g、5.83×104CFU/g,其总菌落数比对照增加3.3倍。 展开更多

关键词 草莓 基质 微生物 草炭 蛭石 珍珠岩

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棉花黄萎病菌ITS序列的获得及系统进化分析 被引量：5

2

作者 丁锦平 刘冬梅 +2 位作者 李付广 朱荷琴 李成伟 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2011年第10期118-121,共4页

为探明从河南安阳棉区分离的棉花黄萎病菌的系统进化关系,利用真菌内转录间隔区通用引物ITS1和ITS4对来自安阳地区的棉花黄萎病菌内转录间隔区(ITS)进行PCR扩增,得到542bp大小的片段,经过克隆、测序和在GenBank中进行BLASTN分析,证明了... 为探明从河南安阳棉区分离的棉花黄萎病菌的系统进化关系,利用真菌内转录间隔区通用引物ITS1和ITS4对来自安阳地区的棉花黄萎病菌内转录间隔区(ITS)进行PCR扩增,得到542bp大小的片段,经过克隆、测序和在GenBank中进行BLASTN分析,证明了该片段来自大丽轮枝菌的ITS区,也进一步证明该棉花黄萎病菌是大丽轮枝菌。同时,对该序列在NCBI的GenBank进行了登记,登记号为EU835817。利用该ITS序列与GenBank中搜索到的黄萎病菌ITS序列一起构建了相应黄萎病菌的系统进化树,在进化树上所搜索到的13个大丽轮枝菌都聚类到一个进化枝上,而且中国报道的植物黄萎病菌,包括安阳地区黄萎病菌在内的3个大丽轮枝菌在进化树上处于相邻的位置,表明:这3个菌可能具有相同的起源。这些结果有助于理解棉花黄萎病安阳菌株的进化地位,该ITS序列还可以应用于棉花黄萎病安阳菌株的特异分子鉴定。 展开更多

关键词 棉花 黄萎病菌 ITS序列 系统进化树

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黄萎菌诱导棉花活性氧及保护酶系的变化研究 被引量：3

3

作者 丁锦平 张庆琛 +2 位作者 魏理 裴冬丽 李成伟 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第7期84-87,共4页

以棉花耐黄萎病品种中棉41和感黄萎病品种冀棉11为材料,通过测定黄萎菌诱导前后活性氧积累及保护酶系活性的变化,研究其与棉花抗性的关系。结果表明:在接种黄萎菌后36h,2个品种的棉花叶片O2-产生速率均达到高峰,而中棉41O2-产生速率明... 以棉花耐黄萎病品种中棉41和感黄萎病品种冀棉11为材料,通过测定黄萎菌诱导前后活性氧积累及保护酶系活性的变化,研究其与棉花抗性的关系。结果表明:在接种黄萎菌后36h,2个品种的棉花叶片O2-产生速率均达到高峰,而中棉41O2-产生速率明显高于冀棉11;同时,叶片内丙二醛(MDA)的含量也均达到一个高峰,中棉41中MDA含量高于冀棉11;在接种后24h和36h,冀棉11和中棉41棉花叶片中超氧化物歧化酶(SOD)活性分别达到一个高峰,且冀棉11变化幅度大于中棉41;对于过氧化物酶(POD)的活性,在接种后24h,2个品种均达到一个高峰,但是耐病品种中POD活性增加幅度不及感病品种。在棉花与黄萎病菌互作的过程中,活性氧和保护酶系参与不同的抗性反应途径。 展开更多

关键词 棉花 黄萎菌 活性氧 保护酶 超氧化物歧化酶 过氧化物酶 丙二醛

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商丘地区棉花黄萎菌的分离与鉴定 被引量：1

4

作者 刘冬梅 丁锦平 +2 位作者 陈静 李成伟 李付广 《江西农业学报》 CAS 2009年第8期116-120,共5页

从河南商丘各县区采集棉花黄萎病病株,对其进行黄萎病菌的分离和鉴定。采用连续稀释法和单孢分离法分离得到16个单菌系,并以这些单菌系作为研究对象,利用真菌通用引物ITS1和ITS4对所分离的单菌系内转录间隔区(ITS)进行PCR扩增,得到543 b... 从河南商丘各县区采集棉花黄萎病病株,对其进行黄萎病菌的分离和鉴定。采用连续稀释法和单孢分离法分离得到16个单菌系,并以这些单菌系作为研究对象,利用真菌通用引物ITS1和ITS4对所分离的单菌系内转录间隔区(ITS)进行PCR扩增,得到543 bp大小的片段,经过克隆测序和在GenBank中进行BLASTn分析,与安阳棉花黄萎菌的ITS序列的同源性均达到98%以上,证明了这些片段来自大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)的ITS区。同时将这些序列在NCB I的GenBank进行了登记,获得5个登记号:FJ715500、FJ715501、FJ715502、FJ715503、FJ715504。 展开更多

关键词 棉花黄萎菌 分离 鉴定 ITS序列

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病毒诱导番茄的基因沉默 被引量：11

5

作者 马红珍 裴冬丽 +3 位作者 耿慧霞 王来 王文静 李成伟 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1531-1537,共7页

该实验通过RT-PCR获得了番茄八氢番茄红素脱氢酶(Phytoene desaturase,PDS)基因的部分序列,双酶切PDS片段和烟草脆裂病毒载体(pTV00),构建重组载体pTV00-PDS,经农杆菌GV3101介导侵染番茄叶片并观察植株表型变化。结果显示,被侵染的番茄... 该实验通过RT-PCR获得了番茄八氢番茄红素脱氢酶(Phytoene desaturase,PDS)基因的部分序列,双酶切PDS片段和烟草脆裂病毒载体(pTV00),构建重组载体pTV00-PDS,经农杆菌GV3101介导侵染番茄叶片并观察植株表型变化。结果显示,被侵染的番茄表现出明显的光漂白现象。半定量RT-PCR检测表明,PDS的mRNA被显著降解。该沉默体系的建立为下一步大规模验证番茄基因功能奠定了基础。 展开更多

关键词 番茄 八氢番茄红素脱氢酶 病毒诱导基因沉默 烟草脆裂病毒

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棉花突变体的获得及其应用研究进展 被引量：10

6

作者 刘冬梅 丁锦平 +1 位作者 李成伟 李付广 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2009年第11期11-15,共5页

介绍了棉花突变体的获得方法,并分别阐述了各种方法产生变异的机制。为了便于查找棉花突变体材料,将国内突变体收集保存情况进行了总结。另外,还描述了5个重要的棉花突变体及其在棉花遗传育种、基因克隆及功能基因组研究中发挥的重要作用。

关键词 棉花 变异 突变体 获得方法 应用

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exendin-4表达载体构建及其在大肠杆菌中分泌表达 被引量：2

7

作者 张红绪 贾孟 +2 位作者 周庆峰 张怡 李成伟 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期109-112,116,共5页

目的:研究新型抗糖尿病药物exendin-4的分子作用机制,为exendin-4的大规模生产奠定基础.方法:采用重叠PCR法扩增出exendin-4的完整序列,并将其克隆至表达载体pET22b上,得到重组质粒pET-Exn4.重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG... 目的:研究新型抗糖尿病药物exendin-4的分子作用机制,为exendin-4的大规模生产奠定基础.方法:采用重叠PCR法扩增出exendin-4的完整序列,并将其克隆至表达载体pET22b上,得到重组质粒pET-Exn4.重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达后,超声破碎表达产物,Tricine-SDS-PAGE分析exendin-4表达.结果:PCR、酶切鉴定和测序结果证明成功构建了重组表达载体pET-Exn4,Tricine-SDS-PAGE结果表明ex-endin-4基因在大肠杆菌中获得了分泌表达.结论:成功构建了exendin-4的重组表达载体并在大肠杆菌中实现分泌表达. 展开更多

关键词 EXENDIN-4 载体构建 分泌表达 大肠杆菌 Ⅱ型糖尿病

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2种棉花叶片总蛋白质纯化方法比较研究 被引量：4

8

作者 丁锦平 刘冬梅 +2 位作者 周瑞阳 李付广 李成伟 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期103-107,共5页

以三氯乙酸—丙酮沉淀法粗提的棉花总蛋白为材料,比较了丙酮沉淀法、醋酸铵沉淀法纯化棉花总蛋白的效果.结果显示:与三氯乙酸—丙酮沉淀法提取的棉花总蛋白干粉加入裂解液后直接电泳相比较,经丙酮沉淀法和醋酸铵沉淀法处理后的总蛋白杂... 以三氯乙酸—丙酮沉淀法粗提的棉花总蛋白为材料,比较了丙酮沉淀法、醋酸铵沉淀法纯化棉花总蛋白的效果.结果显示:与三氯乙酸—丙酮沉淀法提取的棉花总蛋白干粉加入裂解液后直接电泳相比较,经丙酮沉淀法和醋酸铵沉淀法处理后的总蛋白杂质干扰少、电泳结果蛋白条带清晰,蛋白含量较高,相比醋酸铵沉淀法丙酮沉淀法效果较好,适合于棉花蛋白质组学研究中纯化总蛋白质. 展开更多

关键词 棉仡 蛋白质 纯化

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番茄白粉菌的PCR分子检测 被引量：3

9

作者 王文静 李成伟 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2010年第5期72-75,共4页

根据番茄白粉菌核糖体DNA的ITS(internal transcribed spacer)序列的特异性,设计2对引物OidF1/R1、OidF2/R2,对番茄白粉菌进行了PCR特异性扩增试验。结果表明:2对引物都可以从番茄白粉菌基因组DNA中扩增出350 bp左右的特异性扩增产物,... 根据番茄白粉菌核糖体DNA的ITS(internal transcribed spacer)序列的特异性,设计2对引物OidF1/R1、OidF2/R2,对番茄白粉菌进行了PCR特异性扩增试验。结果表明:2对引物都可以从番茄白粉菌基因组DNA中扩增出350 bp左右的特异性扩增产物,并具有专一性,只在白粉菌和接种感病组织DNA中有扩增条带,而番茄早疫病菌、叶霉菌以及健康组织DNA中均无特异性扩增片段;引物具有高度的灵敏度,可以检测含有1 ng的番茄白粉菌DNA。由此证明,该方法可快速、准确和灵敏地鉴定和检测番茄白粉病的发生。 展开更多

关键词 番茄白粉菌 PCR 分子检测

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棉花NBS抗病基因的发掘 被引量：1

10

作者 丁锦平 张庆琛 +1 位作者 魏理 李成伟 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期50-51,57,共3页

根据已克隆的R基因的保守序列设计引物,在棉花不同抗性品种中克隆出500 bp左右大小片段,克隆测序并在NCBI上进行Blast分析,发现这些序列除一个序列外均与已经克隆的抗病基因类似物(RGAs)同源,且同源性高达98%以上。将这些从棉花中克隆的... 根据已克隆的R基因的保守序列设计引物,在棉花不同抗性品种中克隆出500 bp左右大小片段,克隆测序并在NCBI上进行Blast分析,发现这些序列除一个序列外均与已经克隆的抗病基因类似物(RGAs)同源,且同源性高达98%以上。将这些从棉花中克隆的RGAs和植物中已克隆的几个典型的R基因序列建立进化树,棉花中的RGAs序列分别聚在3个不同的亚家族,可以通过后续的功能验证来确定这些序列片段的功能。 展开更多

关键词 棉花 抗病基因 抗病基因类似物

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凤仙白粉病的病原菌鉴定 被引量：6

11

作者 裴冬丽 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期115-118,共4页

凤仙白粉病菌使凤仙花科植物叶片出现白色病斑.对河南商丘地区的凤仙白粉病菌进行了致病性分析、形态学及分子生物学鉴定.该病原菌分生孢子椭圆形或桶形,大小为22～28μm×16～21μm.分生孢子梗直立,圆柱形,简单不分枝,包含1个足细... 凤仙白粉病菌使凤仙花科植物叶片出现白色病斑.对河南商丘地区的凤仙白粉病菌进行了致病性分析、形态学及分子生物学鉴定.该病原菌分生孢子椭圆形或桶形,大小为22～28μm×16～21μm.分生孢子梗直立,圆柱形,简单不分枝,包含1个足细胞,1～3个远基细胞,3～6个排列成链的桶形分生孢子,大小为112～180μm×9～12μm.对该病原菌rDNA ITS进行PCR扩增和序列测定,GenBank登记号为FJ625796,并对该序列和GenBank中凤仙白粉菌Podosphaera balsaminae的ITS序列做了近邻归群法分析.结果证明,河南商丘地区的凤仙白粉病菌为Podosphaera balsaminae,这将为研究中国凤仙白粉病菌系统进化及凤仙白粉病的防治奠定基础. 展开更多

关键词 凤仙白粉病菌 形态特性 ITS

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干旱胁迫对小麦幼苗过氧化物酶同工酶的影响 被引量：10

12

作者 裴冬丽 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第8期1530-1532,共3页

以河南广泛种植的4个小麦品种幼苗为材料,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,研究了经干旱处理后,4种小麦幼苗根和叶的过氧化物酶同工酶谱及酶活性的变化。结果表明,4种小麦根和叶过氧化物酶同工酶酶带分为A区、B区、C区。在干旱胁迫下,酶带... 以河南广泛种植的4个小麦品种幼苗为材料,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,研究了经干旱处理后,4种小麦幼苗根和叶的过氧化物酶同工酶谱及酶活性的变化。结果表明,4种小麦根和叶过氧化物酶同工酶酶带分为A区、B区、C区。在干旱胁迫下,酶带数目增加,且A、B、C 3个区酶带均有不同程度的加深。干旱胁迫后,4个品种小麦幼苗根和叶中POD活性显著增强。 展开更多

关键词 干旱胁迫 小麦 过氧化物同工酶

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花生油酸/亚油酸比值(O/L)遗传研究 被引量：7

13

作者 丁锦平 《花生学报》 2011年第2期13-15,共3页

研究采用三个不同的杂交组合,"青苗豆×泉州麻壳"、"富川大花生×隆安宝湾花生"和"汕油162×Sunoleic95R",分别对其F2代油酸/亚油酸比值(O/L)进行柱形图分析。结果表明,不同的亲本其后代呈... 研究采用三个不同的杂交组合,"青苗豆×泉州麻壳"、"富川大花生×隆安宝湾花生"和"汕油162×Sunoleic95R",分别对其F2代油酸/亚油酸比值(O/L)进行柱形图分析。结果表明,不同的亲本其后代呈现出不同的图形分布,一个杂交组合后代呈现多峰,另外两个是偏离正态分布的单峰,根据图形分布可以判断出O/L是由主基因控制的数量性状。 展开更多

关键词 花生 油酸/亚油酸(O/L) 图形分析 遗传体系

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花生油酸／亚油酸比值(O／L)遗传研究 被引量：1

14

作者 丁锦平 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期127-129,共3页

本研究采用3个不同的杂交组合,"青苗豆×泉州麻壳"、"富川大花生×隆安宝湾花生"和"汕油162×Sunoleic95R",分别对其F2代油酸/亚油酸比值(O/L)进行柱形图分析,结果表明:不同的亲本其后代就... 本研究采用3个不同的杂交组合,"青苗豆×泉州麻壳"、"富川大花生×隆安宝湾花生"和"汕油162×Sunoleic95R",分别对其F2代油酸/亚油酸比值(O/L)进行柱形图分析,结果表明:不同的亲本其后代就呈现出不同的图形分布,一个杂交组合后代呈现多峰,另外两个是偏离正态分布的单峰,根据图形分布可以判断出O/L是有主基因控制的数量性状. 展开更多

关键词 花生 油酸/亚油酸(O/L) 图形分析 遗传体系

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花生油酸/亚油酸(O/L)比值的AFLP分子标记筛选 被引量：1

15

作者 丁锦平 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2011年第6期63-65,共3页

通过采用不同的酶切组合,即EcoRⅠ/MseⅠ组合240对引物、PstⅠ/MseⅠ组合96对引物、PstⅠ/TaqⅠ组合96对引物,分别对花生高油酸品种Sunoleic95R和低油酸品种汕油162进行AFLP分析。分析了两亲本之间的差异,回收了72条AFLP多态性条带,在... 通过采用不同的酶切组合,即EcoRⅠ/MseⅠ组合240对引物、PstⅠ/MseⅠ组合96对引物、PstⅠ/TaqⅠ组合96对引物,分别对花生高油酸品种Sunoleic95R和低油酸品种汕油162进行AFLP分析。分析了两亲本之间的差异,回收了72条AFLP多态性条带,在所选定高和低O/L比值亲本材料之间建立了AFLP片段序列数据库。 展开更多

关键词 花生 油酸/亚油酸(O/L) 扩增片段长度多态性 酶切组合

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花生DNA三种不同限制酶切组合的AFLP多态性标记分析

16

作者 丁锦平 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第12期2555-2557,共3页

利用扩增片段长度多态性(Amplified fragment length polymorphism,AFLP)标记技术,3种不同的酶切组合,其中EcoRⅠ/MseⅠ240对引物、PstⅠ/MseⅠ96对引物、PstⅠ/TaqⅠ96对引物,对汕油162×Sunoliec95R作图亲本进行分析,统计了不同... 利用扩增片段长度多态性(Amplified fragment length polymorphism,AFLP)标记技术,3种不同的酶切组合,其中EcoRⅠ/MseⅠ240对引物、PstⅠ/MseⅠ96对引物、PstⅠ/TaqⅠ96对引物,对汕油162×Sunoliec95R作图亲本进行分析,统计了不同酶切组合的扩增总带数、多态性位点及多态性率。多态性位点、多态性率及扩增总带数都有不同程度的差异,说明尝试不同的限制酶组合可以揭示出花生品系间更为丰富的遗传变异。有望开发AFLP分子标记,为花生分子育种打下基础。 展开更多

关键词 花生 AFLP 多态性 内切酶

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