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T11TS通过调节T淋巴细胞中CaN-NFAT增强新生隐球菌感染大鼠免疫功能的实验研究
1
作者 王立娟 苏艳宾 +2 位作者 叶珊珊 邢秀伟 陈建设 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第10期2416-2421,共6页
目的:探讨T11TS治疗新生隐球菌感染及对T淋巴细胞钙调神经磷酸酶(CaN)-活化的T淋巴细胞核因子(NFAT)途径的调节作用。方法:采用免疫增强剂T11TS治疗新生隐球菌感染SD大鼠,流式细胞术、免疫印迹及核移位法检测T细胞功能及相关信号通路变... 目的:探讨T11TS治疗新生隐球菌感染及对T淋巴细胞钙调神经磷酸酶(CaN)-活化的T淋巴细胞核因子(NFAT)途径的调节作用。方法:采用免疫增强剂T11TS治疗新生隐球菌感染SD大鼠,流式细胞术、免疫印迹及核移位法检测T细胞功能及相关信号通路变化。结果:CT3组肺和脾中新生隐球菌数量显著少于新生隐球菌感染组、CT1组及CT2组(P<0.05);流式细胞术实验结果显示,新生隐球菌感染组淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶LCK、FYN、LAT、磷脂酶Cγ1(PLCγ1)、CaN、NFAT及IL-2表达水平均显著低于健康对照组(P<0.05);CT1、CT2及CT3组LCK、FYN、LAT、PLCγ1、CaN、NFAT及IL-2表达水平均显著高于新生隐球菌感染组(P<0.05)。免疫印迹实验结果与流式细胞术实验相似。结论:T11TS治疗新生隐球菌感染可通过上调T淋巴细胞CaN-NFAT通路中相关信号因子表达,增加核内NFAT水平和IL-2表达,刺激T淋巴细胞活化增殖,从而达到增强机体免疫力的作用。 展开更多
关键词 新生隐球菌 感染 T淋巴细胞 钙调神经磷酸酶 活化T淋巴细胞核因子
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山柰酚对链脲佐菌素诱导糖尿病肾病大鼠的治疗作用及机制研究 被引量：1
2
作者 郭亚莉 刘青 +1 位作者 郭辉 常景芝 《天然产物研究与开发》 北大核心 2025年第3期393-402,共10页
本研究旨在探究山柰酚(kaempferol,KPF)通过激活腺苷酸激活蛋白激酶/核因子E2相关因子2(AMP-activated protein kinase/nuclear factor erythroid 2-related factor 2,AMPK/Nrf2)信号通路对糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)大... 本研究旨在探究山柰酚(kaempferol,KPF)通过激活腺苷酸激活蛋白激酶/核因子E2相关因子2(AMP-activated protein kinase/nuclear factor erythroid 2-related factor 2,AMPK/Nrf2)信号通路对糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)大鼠模型中氧化应激、铁死亡与炎症反应的影响。将SD大鼠随机分为实验组与对照组,每组6只。实验组大鼠通过腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)构建DKD模型后,将其随机分为4组:DKD组、KPF低剂量组(KPF in low dose group,KPF-L;50 mg/kg)、KPF高剂量组(KPF in high dose group,KPF-H;100 mg/kg)及高剂量KPF加AMPK抑制剂(compound C,CC;0.2 mg/kg)组(KPF-H+CC)。检测大鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血肌酐(serum creatinine,SCr)、尿白蛋白肌酐比(urine albumin-to-creatine ratio,UACR)。采用苏木素-伊红和马松染色观察大鼠肾脏组织病理变化和纤维化,TUNEL法评估肾脏组织细胞凋亡,生化试剂盒检测肾脏组织丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平,酶联免疫吸附测定法检测磷酸化核转录因子κB-p65(phosphorylated nuclear transcription factorκB-p65,p-NF-κB-p65)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)水平,比色法检测亚铁离子水平,二氢乙锭荧光探针法检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,蛋白免疫印迹法检测肾脏组织中AMPK/Nrf2通路相关蛋白水平。结果显示,与DKD组相比,KPF-L和KPF-H组大鼠的FBG、BUN、SCr和UACR水平显著下降,肾脏损伤程度减轻(P均<0.05)。KPF处理还降低了肾组织中ROS、MDA、亚铁离子、p-NF-κB-p65水平以及炎症相关因子(TNF-α、IL-1β与IL-6)水平,增加了GSH含量(P均<0.05)。KPF处理提升了AMPK与Nrf2的磷酸化水平,促进了AMPK/Nrf2途径的活化(P均<0.05)。然而,CC的使用可部分逆转KPF对于氧化应激、铁死亡与炎症反应的治疗效果。以上结果表明,山柰酚通过激活AMPK/Nrf2信号通路,有效减轻DKD大鼠的氧化应激、铁死亡与炎症反应,从而改善DKD大鼠的肾脏功能。 展开更多
关键词 山柰酚 糖尿病肾病 AMPK/Nrf2信号通路 氧化应激 铁死亡 炎症反应
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布鲁氏菌BspL蛋白对巨噬细胞炎症因子表达的影响及生物信息学分析
3
作者 李志强 祝芳 +5 位作者 王书利 丁金阔 歹雅雯 郑好 王承与 李天乐 《河南农业科学》 北大核心 2025年第6期144-151,共8页
为探究布鲁氏菌分泌蛋白L(Brucella secretion protein L,BspL)对巨噬细胞炎症反应的调控作用,基于牛种布鲁氏菌(Brucella abortus)2308菌株的BspL基因序列(BAB1_1533),构建pET-32a-BspL表达载体,诱导表达并纯化重组BspL蛋白(rBspL)。经... 为探究布鲁氏菌分泌蛋白L(Brucella secretion protein L,BspL)对巨噬细胞炎症反应的调控作用,基于牛种布鲁氏菌(Brucella abortus)2308菌株的BspL基因序列(BAB1_1533),构建pET-32a-BspL表达载体,诱导表达并纯化重组BspL蛋白(rBspL)。经SDS-PAGE鉴定及浓度测定后,使用rBspL刺激RAW264.7巨噬细胞,通过qRT-PCR检测炎症因子(IL-1β和IL-18)及炎症小体(NLRP3和Caspase-1)的mRNA表达水平,并通过Western blot分析炎症小体(NLRP3和Caspase-1)的蛋白质表达水平;利用在线软件对BspL蛋白进行生物信息学分析。结果表明,成功构建pET-32a-BspL表达载体,pET-32a-BspL表达产物经纯化后在36 ku处出现特异性条带;用rBspL刺激RAW264.7细胞后,与对照组(添加DMEM培养基)相比,试验组(添加50μg/mL rBspL)NLRP3、Caspase-1、IL-1β和IL-18的mRNA相对表达量极显著提高,且炎症小体NLRP3、Caspase-1的蛋白质表达水平显著提高。生物信息学分析显示,BspL蛋白具有亲水性,存在2个跨膜区,有2个分泌途径信号肽(Sec信号肽),有26个磷酸化位点和5个抗原决定簇;BspL蛋白二级结构以无规卷曲和α-螺旋为主,还存在少量延伸链;三级结构预测结果显示,BspL蛋白中多为无规卷曲,与二级结构预测分析结果一致。综上,经大肠杆菌表达的布鲁氏菌rBspL可诱导宿主细胞释放炎症因子,为进一步研究BspL的功能及分子机制提供了参考。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 BspL蛋白 炎症因子 生物信息学分析
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