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人A组轮状病毒VP6蛋白的原核表达及其小鼠多克隆抗体的制备 被引量:1
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作者 张卫斌 吕长坤 +2 位作者 杨颖 王向鹏 王明永 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第9期910-916,共7页
目的表达和纯化人A组轮状病毒VP6蛋白,制备小鼠抗VP6蛋白多克隆抗体。方法通过RT-PCR方法从人A组轮状病毒感染的粪便标本中扩增VP6基因,构建pET-32a-VP6原核表达质粒并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞;用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖... 目的表达和纯化人A组轮状病毒VP6蛋白,制备小鼠抗VP6蛋白多克隆抗体。方法通过RT-PCR方法从人A组轮状病毒感染的粪便标本中扩增VP6基因,构建pET-32a-VP6原核表达质粒并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞;用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导VP6表达,采用镍柱(Ni-NTA)亲和层析纯化VP6蛋白,用SDS-PAGE和Western blotting鉴定VP6蛋白;将VP6蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,采用间接ELISA检测抗体滴度。结果构建了pET32a-VP6重组表达质粒,VP6蛋白主要以包涵体形式表达。经亲和层析法纯化了VP6蛋白,免疫小鼠后获得了多克隆抗体,抗体效价为1∶32000,抗体可以和VP6蛋白发生特异性反应。结论表达和纯化了人A组轮状病毒的VP6蛋白,制备了小鼠抗VP6蛋白的多克隆抗体,为人A组轮状病毒诊断抗原的制备和血清学检测方法的建立奠定了基础。 展开更多
关键词 人A组轮状病毒 VP6蛋白 原核表达 多克隆抗体
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人A组轮状病毒VP6蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立
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作者 张卫斌 吕长坤 +2 位作者 杨颖 王明永 王向鹏 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第9期932-938,共7页
目的建立基于人A组轮状病毒(Rotavirus group A,RVA)VP6蛋白的间接ELISA抗体检测方法,为RVA抗体检测提供技术支持。方法以RVA的VP6蛋白为诊断抗原,用棋盘滴定方法优化ELISA反应条件,建立检测RVA抗体的间接ELISA方法。收集健康儿童血清和... 目的建立基于人A组轮状病毒(Rotavirus group A,RVA)VP6蛋白的间接ELISA抗体检测方法,为RVA抗体检测提供技术支持。方法以RVA的VP6蛋白为诊断抗原,用棋盘滴定方法优化ELISA反应条件,建立检测RVA抗体的间接ELISA方法。收集健康儿童血清和RVA患者血清,用建立的方法检测血清标本。结果以2µg/mL的VP6蛋白包被酶标板,血清1∶250倍稀释为最佳条件,阴阳性临界值为0.137。该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,与Western blotting抗体检测方法符合率为95%。检测370份儿童血清标本,抗体阳性率为81.1%。检测15名RVA患者的急性期和恢复期血清,恢复期血清中RVA抗体滴度相比于急性感染期明显增高。结论建立的ELISA抗体检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可用于RVA抗体检测和RVA感染的辅助诊断。 展开更多
关键词 人A组轮状病毒 VP6蛋白 间接酶联免疫吸附试验 抗体检测
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大健康理念下医疗化工产教融合教学的改革——评《生物化学检验实训指导》
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作者 朱明磊 王明永 《化学工程》 北大核心 2025年第2期I0018-I0018,共1页
大健康理念之“大”的意涵可概括全方位、全周期、全要素。所谓全方位,是指关系到健康的各个领域、行业及维度,如医美领域、化工行业、心理维度,它强调一种“全局性健康”观点。所谓全周期,是指健康评测不以疾病预防、疾病治愈等阶段性... 大健康理念之“大”的意涵可概括全方位、全周期、全要素。所谓全方位,是指关系到健康的各个领域、行业及维度,如医美领域、化工行业、心理维度,它强调一种“全局性健康”观点。所谓全周期,是指健康评测不以疾病预防、疾病治愈等阶段性状态为参照,而是贯穿于人的生命整个发展周期,它强调一种“全过程呵护”的观点。所谓全要素,是指泛在的一切显性、隐性健康危害要素,显性危害要素包括环境污染、药物滥用、食品腐坏等,隐性危害要素包括恶意舆论、道德危机、不良作息等,它强调一种“全面性关怀”观点。 展开更多
关键词 生物化学检验 产教融合 实训指导 人的生命 药物滥用 心理维度 道德危机 全周期
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冬眠心肌数量与冠心病患者心肌存活状况及左心室功能的关系 被引量:2
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作者 张艳辉 孟祥 +3 位作者 从国彬 郑吟诗 蒋凯 权红军 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2021年第2期156-159,共4页
目的研究18F脱氧葡萄糖(^(18)F-FDG)正电子发射断层显像(PET)/CT检测冬眠心肌数量与冠心病患者心肌存活状况及左心室功能的关系。方法选取我院收治的168例老年冠心病患者作为研究对象。入组后1周内行18F-FDG PET/CT心肌灌注代谢显像检测... 目的研究18F脱氧葡萄糖(^(18)F-FDG)正电子发射断层显像(PET)/CT检测冬眠心肌数量与冠心病患者心肌存活状况及左心室功能的关系。方法选取我院收治的168例老年冠心病患者作为研究对象。入组后1周内行18F-FDG PET/CT心肌灌注代谢显像检测,评估冬眠心肌数量、心肌存活状况,通过超声心电图检测左心室功能指标。以冬眠心肌数量中位值分为高冬眠心肌数量组(90例)和低冬眠心肌数量组(78例)。采用Pearson相关性分析冬眠心肌数量与左心室功能及心肌存活状况的相关性,通过ROC曲线分析各指标联合预测血运重建术后预后价值。结果168例老年冠心病患者冬眠心肌数量为12.34%~27.43%,高冬眠心肌数量组瘢痕心肌数量显著高于低冬眠心肌数量组(P<0.01)。高冬眠心肌数量组左心室收缩末期容积(LVESV)、左心室舒张末期容积(LVEDV)水平显著低于低冬眠心肌数量组,而LVEF显著高于低冬眠心肌数量组(P<0.01)。高冬眠心肌数量组心肌代谢情况及心肌存活指数均优于低冬眠心肌数量组(P<0.01)。Pearson相关性分析显示,冬眠心肌数量与心肌存活指数、LVEF呈正相关(r=0.638,P=0.000;r=0.645,P=0.000),与LVESV、LVEDV呈负相关(r=-0.592,P=0.000;r=-0.538,P=0.000)。ROC曲线分析显示,三者联合检测曲线下面积明显高于冬眠心肌数量、心肌存活指数、LVEF的单独检测。结论^(18)F-FDG PET/CT检测冬眠心肌数量与冠心病患者心肌存活状况及左心室功能指标水平存在相关性,联合检测可有效预测血运重建术后疗效。 展开更多
关键词 冬眠 冠心病 氟脱氧葡萄糖F18 心室功能
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